bào của vi khuẩn B velezensis
3.3. ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG SINH ENZYME CỦA VI KHUẨN BACILLUS
lần lượt là 84,44% và 80%. Điều này có thể giải thích ngồi khả năng cạnh tranh dinh dưỡng, tế bào vi khuẩn có khả năng sinh các hoạt chất ngoại bào có khả năng ức chế sự phát triển của nấm bệnh Phytophthora sp.. Từ đây có thể làm cơ sở khoa học để nghiên cứu tách chiết các hợp chất có hoạt tính kháng nấm bệnh từ dịch ngoại bào của vi khuẩn B. velezensis trong ứng dụng sản xuất các chế phẩm sinh học phòng trừ bệnh sương mai trên cây cà chua do nấm bệnh
Phytophthora sp..
Ngoài ra, khi so sánh trong dịch ngoại bào của vi khuẩn B. velezensis thì dịch enzyme ngoại bào có hiệu lực ức chế sự phát triển của nấm bệnh cao gấp 1,6 lần so với các thành phần phi enzyme. Theo nghiên cứu của Trịnh Thành Trung và cs (2017) thì các chủng vi khuẩn B.
velezensis có khả năng sinh một số enzyme ngoại bào như: chitinase, lipase, protease, amylase
và cylanase. Như vậy, có thể kết luận rằng trong dịch enzyme ngoại bào của vi khuẩn B. velezensis có thể chứa những enzyme tiềm năng để ứng dụng trong việc phát triển và đa dạng
hóa các chế phẩm sinh học từ vi khuẩn B. velezensis.
3.3. ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG SINH ENZYME CỦA VI KHUẨN BACILLUS VELEZENSIS VELEZENSIS
Dịch enzyme ngoại bào của vi khuẩn B. velezensis đã được chứng minh có hiệu lực ức chế sự phát triển của nấm bệnh. Trong nghiên cứu này, tiến hành khảo sát khả năng sinh các loại enzyme của vi khuẩn bao gồm: protease, chitinase và cellulase (Hình 3.7; Hình 3.8 và Hình 3.9).
3.3.1. Khả năng sinh enzyme protease
Vi khuẩn B. velezensis sử dụng casein làm nguồn cơ chất để enzyme protease hoạt động, tạo vòng phân giải, lan rộng từ trong ra ngồi. Vịng phân giải hiện lên rất rõ, đường kính vịng dao động từ 2,5 – 3cm.
29
Hình 3.7. Vi khuẩn B. velezensis phân giải casein.
3.3.2. Khả năng sinh enzyme chitinase
Với môi trường thử nghiệm được bổ sung cơ chất huyền phù chitin ở dạng keo, vi khuẩn
B. velezensis có khả năng sinh enzyme chitinase tạo vịng phân giải trên mơi trường này. Vịng
phân giải sẽ được nhìn thấy rõ hơn khi nhuộm với dung dịch Lugol, đường kính vịng phân giải dao động từ 1-1,5cm.
Hình 3.8. Vi khuẩn B. velezensis phân giải huyền phù chitin.
3.3.3. Khả năng sinh enzyme cellulase
Vi khuẩn B. velezensis có khả năng sinh enzyme cellulase tạo vịng phân giải trên môi trường có bổ sung CMC. Đường kính vịng phân giải dao động từ 3-4cm.
30
Hình 3.9. Vi khuẩn B. velezensis phân giải CMC.
Các chủng vi khuẩn B. velezensis được công bố bởi Trịnh Thành Trung và cs (2017)
cũng biểu hiện hoạt tính sinh enzyme ngoại bào chitinase, lipase, protease, amylase và cylanase. Khả năng phân hủy chitin là tiêu chí quan trọng khi tuyển chọn chủng vi khuẩn có khả năng đối kháng nấm gây bệnh hại cho cây trồng vì chitin tham gia cấu trúc thành tế bào nấm.
Theo Nguyễn Lân Dũng về hình thái và cấu tạo của sợi nấm thì trong thành phần thành tế bào của nấm Phytophthora sp. có chứa một lượng lớn glucan, cellulose, chitosan, protein… nên vi khuẩn B. velezensis có thể tiết ra một số enzyme ngoại bào phá hủy thành tế bào của nấm bệnh.
Ngoài ra, các enzyme ngoại bào được vi sinh vật tổng hợp và tiết vào mơi trường cịn có vai trị quan trọng trong việc phân hủy các hợp chất hữu cơ trong tự nhiên để thu nhận nguồn dinh dưỡng cho bản thân và cung cấp dinh dưỡng cho cây trồng.
31
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
1. Kết luận
Trên cơ sở các kết quả thu được và tổng hợp từ dữ liệu đưa ra được một số kết luận sau đây:
Vi khuẩn B. velezensis có khả năng đối kháng mạnh với nấm Phytophthora sp. gây bệnh sương mai trên cây cà chua thông qua các thành phần từ canh trường nuôi cấy vi khuẩn là: tế bào được gia nhiệt ở 55ºC và không gia nhiệt, dịch ngoại bào, dịch enzyme ngoại bào và các thành phần phi enzyme.
Hiệu lực ức chế sự phát triển của nấm bệnh Phytophthora sp. ở các thành phần trong canh trường nuôi cấy vi khuẩn B. velezensis đều trên 45% sau 5 ngày theo dõi khi đã được pha loãng qua nhiều nồng độ. Kết quả nghiên cứu cho thấy khả năng đối kháng rất mạnh với nấm bệnh của vi khuẩn B. velezensis. Trong đó, hiệu lực ức chế sự phát triển nấm bệnh Phytophthora sp. từ tế bào và dịch ngoại bào của vi khuẩn B. velezensis là cao nhất, lần lượt
là 84,44% và 80% sau 5 ngày.
Ngoài ra, qua khảo sát khả năng sinh enzyme thì vi khuẩn B. velezensis cịn có thể tổng hợp được các enzyme ngoại bào để phá hủy thành tế bào của nấm bệnh Phytophthora sp. như protease, chitinase và cellulase. Vì vậy có thể kết luận rằng vi khuẩn B. velezensis rất có tiềm năng trong ứng dụng vào việc sản xuất các loại chế phẩm sinh học phòng trừ bệnh sương mai trên cây cà chua. Trên cơ sở đối kháng với nấm thông qua nhiều thành phần khác nhau trong canh trường nuôi cấy của vi khuẩn B. velezensis giúp tạo cơ sở khoa học cho việc sản xuất đa dạng các loại chế phẩm sinh học hơn, góp phần vào sự đa dạng chế phẩm sinh học trừ bệnh trên cây trồng ứng dụng trong nông nghiệp.