5. Cấu trúc luận văn
3.2. KẾT QUẢ THĂM DỊ HOẠT TÍNH SINH HỌC
Do thời gian khơng cho phép nên trong nghiên cứu này tơi chỉ trình bày kết quả thăm dị hoạt tính sinh học của chất sạch NWE.CS2. Thí nghiệm được lặp lại 3 lần để đảm bảo tính chính xác của thí nghiệm và dữ liệu. Kết quả thu được như sau:
Bảng 3.9. Kết quả thử hoạt tính sinh học của NWE.CS2
Nồng độ (µg/ml)
% Ức chế
Dịng HepG2 Dịng KB
NWE.CS2 Ellipticine NWE.CS2 Ellipticine
100 102.38 106.83 102.75 96.27 20 88.98 72.52 101.82 80.17 4 49.93 52.18 68.86 47.82 0.8 6.83 20.33 14.47 14.54 IC50 4.99 0.44 3.02 0.52 100 88.46 94.85 89.32 95.12
Nồng độ (µg/ml)
% Ức chế
Dịng HepG2 Dịng KB
NWE.CS2 Ellipticine NWE.CS2 Ellipticine
20 78.07 81.96 73.81 72.91 4 45.47 42.86 47.13 48.44 0.8 19.93 10.56 15.22 19.86 IC50 5.28 0.60 5.97 0.51 100 93.01 99.07 81.25 89.35 20 86.89 79.01 69.58 74.93 4 51.11 47.46 59.77 50.51 0.8 4.59 11.07 2.55 12.82 IC50 5.59 0.55 2.70 0.58 100 99.08 102.87 101.24 98.68 20 79.75 77.94 81.82 80.28 4 47.84 51.63 48.45 53.22 0.8 3.98 18.72 12.19 21.17 IC50 6.13 0.43 5.04 0.40
Kết quả trên cho thấy hoạt chất NWE.CS2 cĩ hoạt tính mạnh với giá trị IC50 là 2.70 – 6.13 g/ml trên cả 8 dịng tế bào ung thư. Chất NWE.CS2 cĩ mức hoạt tính trung bình yếu trên các dịng khác nhau. Chất đối chứng dương Ellipticine hoạt động ổn định trong thí nghiệm. Các kết quả trên là chính xác với r2 ≥ 0,99.
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 1. Kết luận
Thành phần hố học
- Từ dịch chiết EtOAc của lá cây kim giao núi đất (Nageia wallichiana), bằng các phương pháp sắc kí cột silicagelkết hợp với sắc kí lớp mỏng chúng tơi đã tách và xác định được cấu trúc 2 hợp chất:
- Chất NWE.CS1: Podocarpusflavone A (4’’’-Ome-Amentoflavone). Chất này được phân lập trước đây từ lồi Podocarpus henkelii và được xác định cĩ hoạt tính chống lại E. faecalis và P. aeruginosa [12].
- Chất NWE.CS2: Nagilactone B. Chất này được phân lập trước đây từ lồi Podocapus nagi và chưa cĩ nghiên cứu nào về hoạt tính sinh học của hợp chất này.
Hoạt tính sinh học
- Từ kết quả thăm dị hoạt tính sinh học cho thấy hoạt chất NWE.CS2 cĩ hoạt tính mạnh với giá trị IC50 là 2.70 – 6.13 g/ml trên cả 8 dịng tế bào ung thư. Hoạt chất này cĩ triển vọng để thử nghiệm ở các mức cao hơn như trên in vivo.
2. Kiến nghị
Tiếp tục phân lập các phân đoạn cịn lại của dịch chiết EtOAc, n-hexan và MeOH kết hợp với các phương pháp phổ để xác định thành phần hố học. Đồng thời thử hoạt tính sinh học của các chất tách được để cĩ cái nhìn tổng thể về hố thực vật cũng như hoạt tính sinh học của lồi kim giao núi đất (Nageia wallichiana), gĩp phần làm tăng giá trị sử dụng của lồi cây này trong y học.
TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT
[1] Võ Văn Chi (1996), Từ điển cây thuốc Việt Nam, NXB Y học, Hà Nội, Việt Nam.
[2] Trần Đình Đại (1998), Khái quát về hệ thực vật Việt Nam, Hội thảo Việt – Đức về hố học và các hợp chất thiên nhiên, Hà Nội.
[3] Phạm Quốc Long, Châu Văn Minh (2006), Lipit và các axit béo hoạt tính sinh học cĩ nguồn gốc thiên nhiên, NXB KHKT.
[4] Đỗ Tất Lợi (2004), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y học. [5] Trần Đình Lý và cộng sự (1993), 1900 lồi cây cĩ ích ở Việt Nam, NXB
Thế giới.
[6] Nguyễn Hồng Nghĩa (2004), Các lồi cây lá kim ở Việt Nam – trang 65. [7] Nguyễn Hồng Nghĩa (2007), Át lát cây rừng tập 1, NXB Nơng nghiệp,
Hà Nội.
[8] Nguyễn Hồng Nghĩa (2010), Át lát cây rừng tập 3, NXB Nơng nghiệp, Hà Nội.
[9] Nguyễn Kim Phi Phụng (2007), Các phương pháp cơ lập hợp chất tự nhiên, NXB ĐHQG Tp. HCM.
TIẾNG ANH
[10] Alírica I. Suárez, Beth Diaz M., Franco Delle Monache, Reinaldo S. Compagnone (2003), “Biflavonoids from Podocalyx loranthoides”,
Fitoterapia 74, 473–475.
[11] A. Monks, D. Scudiero, P. Skehan, R. Shoemake, K. Paull, D. Vistica, C. Hose, J. Langley, P. Cronise, H. Campbell, J. Mayo, M. Boyd. (1991), “Feasibility of a high-flux anticancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell lines”, Journal of National Cancer Institute 83(11), 757-766.
[12] Bagla, Victor P; McGaw, Lyndy J; Elgorashi, Esam E; Eloff, Jacobus N (2014), “Antimicrobial activity, toxicity and selectivity index of two biflavonoids and a flavone isolated from Podocarpus henkelii (Podocarpaceae) leaves”, BMC Complementary and Alternative Medicine 14(1), 383-389.
[13] Bai-Ping Ying, Isao Kubo (1993), “Norditerpene dilactones from
podocarpus nagi”, Phytochemistry 34(4), 1107- 1110.
[14] Bai-Ping Ying, Isao Kubo, Chairul Takeshi Matsumoto, Yuji Hayashi (1990), “Congeners of norditerpene dilactones from
podocarpus nagi”, Phytochemistry 29(12), 3953-3955.
[15] Carlos Alberto Carbonezi, Lidilhone Hamerski, A. A. Leslie Gunatilaka, Alberto Cavalheiro, Ian Castro-Gamboa, Dulce Helena Siqueira Silva, Maysa Furlan, Maria Claudia Marx Young, Marcia Nasser Lopes, Vanderlan da Silva Bolzani (2007), “Bioactive flavone dimers from Ouratea multiflora (Ochnaceae)”, Brazilian Journal of Pharmacognosy, 17(3), 319-324.
[16] Chang-Ming Sun, Wan-Jr Syu, Yi-Tsau Huang, Chien-Chih Chen and Jun-Chih Ou (1997), “Selective Cytotoxicity of Ginkgetin from c Selaginella moellendorffii”, J. Nat. Prod 60, 382-384.
[17] Cheng, K.T., Hsu, F.L., Chen, S.H., Hsieh, P.K., Huang, H.S., Lee, C.K., Lee, M.H. (2007), “New constituent from Podocarpus macrophyllus var. macrophyllus shows antityrosinase effect and regulates tyrosinase-related proteins and mRNA in human epidermal melanocytes”, Chemical and Pharmaceutical Bulletin 55, 757–761.
[18] D. A. Scudiero, R. H. Shoemaker, K. D. Paull, A. Monks, S. Tierney, T. H. Nofziger, M. J. Currens, D. Seniff, M. R. Boyd (1988),
“Evaluation of a soluble Tetrazolium/Formazan assay for cell growth and drug sensivity in culture using human and other tumor cell lines” Cancer Research 48, 4827-4833.
[19] Haraguchi H, Oike S, Muroi H, Kubo I (1996), “Mode of antibacterial action of totarol, diterpene from Podocarpus nagi”, Planta Med 62(2), 122-125.
[20] Haraguchi, H., Ishikawa, H., Kubo, I., 1997. Antioxidative action of diterpenoids from Podocarpus nagi. Planta Medica 63, 213– 215. [21] H. Haraguchi; H. Ishikawa; S. Sakai; B. -P. Ying; I. Kubo (1996),
“Inhibition of lipid peroxidation by diterpenoid from Podocarpus nagi”, Cellular and Molecular Life Sciences 52(6), 573-576.
[22] Hitender Sharma, Munish Garg (2015), “A review of traditional use, phytoconstituents and biological activities of Himalayan yew, Taxus wallichiana”, Journal of Integrative Medicine 13(2), 80-90. [23] Hyun-Sun Park, Naoki Yoda, Haruhiko Fukaya, Yutaka Aoyagi and
Koichi Takeya (2004), “Rakanmakilactones A– F, new cytotoxic sulfur-containing norditerpene dilactones from leaves of Podocarpus macrophyllusvar.maki”, Tetrahedron 60, 171–177. [24] H.S. Abdillahi, J.F. Finnie, J. Van Staden (2011), “Anti-
inflammatory, antioxidant, anti-tyrosinase and phenolic contents of four Podocarpus species used in traditional medicine in South Africa”, Journal of Ethnopharmacology 136, 496 – 503. [25] Isao Kubo, Bai-Ping Yang (1991), “Two nor-diterpene dilactones
from podocarpus nagi”, Phyfochemistry 30(6), 1967-1969.
[26] Isao Kubo, Bai-Ping Yang (1991), “A bisnorditerpene dilactone from podocarpus nagi”, Phytochemistry 30(10), 3476 - 3477.
[27] Isao Kubo, Masaki Himejiwa, Bai-Ping Ying (1991), “An antifungal norditerpene dilactone from podocarpus nagi”, Phytochemisrry
30(5), 1467-1469.
[28] Kenneth R. Markham, Carolyn Sheppard and Hans Geige (1987), “13C NMR studies of some naturally occurring amentoflavone and hinokiflavone biflavonoids”, Phytochemistry 26(12), 3335-3337.
[29] Kubo, Isao; Muroi, Hisae; Himejima, Masaki (1992), “Antibacterial Activity of Totarol and Its Potentiation”, Journal of Natural Products 55(10), 1436-1440.
[30] Laura Faiella, Abeer Temraz, Nunziatina De Tommasi, Alessandra Braca (2012), “Diterpenes, ionol-derived, and flavone glycosides from Podocarpus elongatus”, Phytochemistry 76, 172–177.
[31] L. B. S. Kardono, C. K. Angerhofer, S. Tsauri, K. Padmawinata, J. M. Pezzuto, A. D. Kinghorn (1991), “Cytotoxic and antimalarial constituents of the roots of Eurycoma longifolia”, J. Nat. Prod.
54(5), 1360-1367.
[32] Li-Jang Xuan, Ya-Min Xu, Sheng-Ding Fang (1995), “Three diterpene dilactone glycosides from podocarpus nagi”,
Phytochemistry 39(5), 1143-1145.
[33] McLaughlin JL, et al (1981), “19-Hydroxybaccatin III, 10- deacetylcephalomannine, and 10-deacetyltaxol: new antitumor taxanes from Taxus wallichiana”, J Nat Prod 44(3), 312-319.
[34] M. C. Alley, D. A. scudiero, A. Monks, M. L. Hursey, M. J. Czerwinski, D. L. Fine, B. J. Abbott, J. G. Mayo, R. H. Shoemaker, M. R. Boyd (1988), “Feasibility of drug screening with panels of human tumor cell lines using a microculture tetrazolium assay”, Cancer Research
[35] R. H. Shoemaker, D. A. Scudiero, E. A. Suasville (2002) “Application of high-throughput, molecular – targeted screening to anticancer drug discovery”, Curr. Top. Med. Chem 3(2), 229-246.
[36] S. Imai, S. Fujioka, E. Murata, Y. Sasakawa, K. Nakanishi (1968), “The structures of three additional phytoecdysones from podocarpus macrophyllus, makisterone B, C and D”,
Tetrahedron Letter 36, 3887 - 3890.
[37] Teruo Hayashi, Hiroshi Kakisawa, Yuh Pan Chen, Hong-Yen Hsu (1972), “Structure of the further norditerpenoids of podocarpus macrophyllus. Inumakilactone A glucoside, a plant growth inhibitor and inumakilactone E”, Tetrahedron Letter 33(3), 3385 - 3388.
[38] Yûji Hayashi, Shigenobu Takahashi, Hisao Ona and Takeo Sakan (1968), “Structures of nagilactone A, B, C and D, novel nor- and bisnorditerpenoids” Tetrahedron Letters 9(17), 2071-2076. [39] Yûji Hayashi, Takeshi Matsumoto, Motokazu Uemura, Masato Koreeda
Hayashi (1980), “Carbon-13 NMR studies of the biologically active nor-diterpenoid dilactones from Podocarpus plants”, Magnetic Resonance in Chemistry 14(2), 86-91.
[40] Yuji Hayashi, Takeo Sakan, Ken Hirotsu, And Akira Shimada (1972), “Stereochemistry of nagilactone A and B”, Chemistry Letters, 349-352.
[41] Yuji Hayashi, Yo-ichi Yiiki, Takeshi Matsumoto (1977), “New congeners of cytotoxic nor-diterpenoid dilactones in podocarpus nagi: three highly polar components with α-pyrone ring”,
Tetrahedron Letters 34, 2953 – 2956.
[42] Zhang JZ, Fang QC, Liang XT, He CH, Kong M, He WY, Jin XL (1995), “Taxoid from barks of Taxus wallichiana”, Phytochemistry