Chúng tôi tiến hành khảo sát hệ dung môi phù hợp cho việc phân tích bằng sắc ký bản mỏng, kết quả để định hướng cho việc xác định, tách chiết và phân tích các hợp chất. Tham khảo các hệ dung môi khác nhau sử dụng cho dịch chiết thực vật, các hệ dung môi sau đã được khảo sát:
1. N-hexane : ethyl acetate (thay đổi tỉ lệ để đạt độ phân cực tăng dần) 2. Ethyl acetate : n-butanol : nước = 5:3:1
3. Ethyl acetate : n-butanol : axit băng = 5:3:1
4. Chloroform : ethyl acetate : methanol: acetic acid 25 mM = 1:1:1:1 5. Ethyl acetate : ethanol : acetic acid 25 mM = 4:1:1
Các hệ dung môi số 1,2,3 và 4 cho kết quả là những vệt chất kéo dài, không rõ ràng. Vì vậy chúng tôi quyết định sử dụng hệ dung môi số 5 làm dung môi khai triển trong sắc ký bản mỏng.
Hình 3.1. Kết quả sắc ký bản mỏng dịch chiết nụ hoa hòe (Bên trái: điều kiện thường, bên phải: dưới bước sóng 365 nm)
Khi quan sát bản silica gel dưới điều kiện thường, ta có thể thấy có ít nhất 3 băng chất màu vàng hiện diện trong dịch chiết với các giá trị Rf lần lượt là 0,89, 0,73 và 0,47. Đặt bản silica gel dưới điều kiện ánh sang tia UV, bước sóng dài 365 nm, quan sát được ít nhất 6 chất với các giá trị Rf lần lượt là 0,89, 0,81, 0,73, 0,47, 0,42 và 0,38. Các băng chất có màu vàng nâu với độ đậm nhạt khác nhau (hình 3.1).
Khi dùng thuốc thử Vanillin, thu được kết quả các băng chất chuyển sang màu nâu đậm, chứng tỏ các chất này có chứa các nhóm OH liền kề nhau. Còn khi dùng thuốc thử AlCl3, các băng chất chuyển sang màu vàng tươi, chứng tỏ các chất này có bộ khung flavonoids. Vì vậy chúng tôi định hướng thành phần chính thu được từ dịch chiết nụ hoa hòe là nhóm chất flavonoids.