Sự tập hợp protein để tạo thành sợi amyloid là một đặc tính phổ biến trong các bệnh rối loạn ở con người như bệnh Alzheimer.
Thioflavin T là một chất đánh dấu thường được sử dụng để theo dõi sự hình thành sợi amyloid in vitro. Khi gắn với các sợi amyloid, ThT cho tín hiệu huỳnh quang mạnh hơn. Dựa vào đặc tính này, chúng tôi ghi nhận sự thay đổi tín hiệu huỳnh quang của thioflavin T trong các mẫu thí nghiệm khác nhau. Sự thay đổi tín hiệu huỳnh quang được tính toán và thể hiện trong hình 3.15.
Trong đó: Aβ là β-amyloid peptide trong điều kiện bình thường Qc: mẫu β-amyloid khi có mặt quercetin chuẩn
Rc: mẫu β-amyloid khi có mặt rutin chuẩn C2: mẫu β-amyloid khi có mặt của chất C2 C6: mẫu β-amyloid khi có mặt của chất C6
89,643 46,857 78,214 51,143 80,571 ,000 10,000 20,000 30,000 40,000 50,000 60,000 70,000 80,000 90,000 100,000 Aβ Qc Rc C2 C6 Phần trăm tích lũy Các chất thử nghiệm
Trong điều kiện thường, không có mặt của các chất ức chế, tỉ lệ tạo thành sợi của β-amyloid là 89,64%. Với sự có mặt của chất ức chế quercetin chuẩn, tỉ lệ tạo thành sợi chỉ còn 46,86%, tỉ lệ này thấp hơn khi có mặt của chất C2 là 51,14%. Với sự có mặt của chất chuẩn Rutin, khả năng tạo sợi của β-amyloid giảm khoảng 11% còn 78,21%. Chất C6 có khả năng ức chế kém hơn rutin chuẩn, khả năng tạo sợi của β- amyloid khi có mặt chất này là 80,87%.
Theo See-Lok Ho và cộng sự, với sự xuất hiện của quercetin và neohesperidin ở nồng độ 200 µM, β-amyloid giảm đáng kể sự hình thành sợi peptide, Trong môi trường đệm có mặt neohesperidin hoặc quercetin, các monomer β-amyloid tồn tại trong thời gian dài hơn trước khi tạo thành oligomer và tạo sợi peptide so với trong môi trường đệm phosphate đối chứng [49]. Karim và cộng sự cũng đã chứng minh quercetin và rutin ngăn cản sự tạo thành sợi và sự tích tụ của β-amyloid in vitro thông qua mô hình tế bào APPswe [30].
KẾT LUẬN
Đã tinh sạch được hai chất C2 và C6 từ dịch chiết nụ hoa hòe khô. Chất C2 được xác định là quercetin, chất C6 được xác định là neohesperidin.
Các chất quercetin chuẩn, rutin chuẩn, C2 và C6 tại nồng độ 20 µM thể hiện hoạt tính chống oxi hóa tương đương với vitamin C chuẩn nồng độ từ 100 đến 200 µg/ml.
Các chất quercetin chuẩn, rutin chuẩn, C2 và C6 tại nồng độ 1 mM thể hiện hoạt tính chống lại sự tích tụ peptide β-amyloid. Trong môi trường có mặt các chất này, tỉ lệ tích tụ β-amyloid lần lượt là: 46,86%, 78,21%, 51,14% và 80,57%.
KIẾN NGHỊ
Chúng tôi kiến nghị thực hiện tiếp các nghiên cứu về khả năng ức chế sự tích tụ β-amyloid trên mô hình tế bào và mô hình động vật thí nghiệm.
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt
1. Lại Thị Ngọc Hà và Vũ Thị Thư (2013). "Stress oxi hóa và các chất chống oxi hóa tự nhiên", Tạp chí Khoa học và Phát triển, 7(5), tr.667-677.
2. Nguyễn Ngọc Hòa (2006). Nghiên cứu tỷ lệ mắc và một số yếu tố liên quan đến SSTT ở người cao tuổi huyện Ba Vì, tỉnh Hà Tây 2005-2006, Hà Nội, Đại học Y Hà Nội.
3. Lê Quốc Nam và Trần Duy Tâm(2007). "Khảo sát sơ bộ tỷ lệ sa sút tâm thần trong cộng đồng dân", Nghiên cứu khoa học tại Bệnh viện Tâm thần TP. Hồ Chí Minh.
4. Phạm Thắng (2010), Bệnh Alzheimer và các thể sa sút trí tuệ khác, Hà Nội, Nhà Xuất bản Y học.
5. Phạm Thắng (2007), Chẩn đoán và điều trị bệnh Alzheimer, Hà Nội, Nhà xuất bản Y học.
6. Hoàng Văn Tuấn (2013). "Nghiên cứu tách chiết và xác định một số hoạt tính sinh học của dịch chiết flavonoid từ cây diếp cá (Hoyttuynia cordata Thunberg) thu hái tại Hà Nội", Tạp chí Sinh học, 35(3), tr.183-187.
7. Lê Văn Tuấn (2010). "Nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ học sa sút trí tuệ và suy giảm nhận thức nhẹ (MCI) ở người cao tuổi Hà Nội, Mã số 01C-08/08-2009-2", Đề tài nghiên cứu cấp thành phố, Hà Nội,
8. Đỗ Thị Hoa Viên (2007). "Nghiên cứu khảo sát hoạt chất flavonoid trong quả mơ Prunus armeniaca (họ Rosaceae)", Tạp chí Khoa học và công nghệ, 45(2), tr.49-53.
Tài liệu tiếng Anh
9. Arranz S. and Chiva-Blanch G. (2012). "Wine, beer, alcohol and polyphenols on cardiovascular disease and cancer", Nutrients, 4(7), pp.759-781.
10. Barrie M.P., Rhiannon B., Alfred T. and Louis A.T. (2016), The Life-Cycle of
Pharmaceuticals in the Environment, Woodhead Publishing.
11. Cao X. and Sudhof T.C. (2001). "A transcriptively active complex of APP with Fe65 and histone acetyltransferase Tip60", Science, 293(8), pp.115-120.
12. Cheignon C., Thomas M., Faller P., Hureau C. and Collin F. (2018). "Oxidative stress and the amyloid beta peptide in Alzheimer’s disease", Redox Biology, 14(5), pp.450-464.
13. Christine X., Tiffany Y.L., Dennis C. and Zhefeng G. (2017). "Thioflavin T as an amyloid dye: fibril quantification, optimal concentration and effect on aggregation",
Royal Society Open Science, 4(1), pp.16069-16072.
14. Dai J. and Mumper R.J. (2010). "Plant Phenolics: Extraction. Analysis and Their Antioxidant and Anticancer Properties", Molecules, 15(2), pp.7313-7352.
15. Dasha M. and Sebastian S. (2013). "Antioxidant and Stabilization Activity of a Quercetin Containing Flavonoid Extract Obtained from Bulgarian Sophora japonica L.", Brazilian Archives of Biology and Technology, 56(3), pp.431-438.
16. Ding B.J., Ma W. and He L.L. (2011). "Soybean isoflavone alleviates β-amyloid 1- 42 induced inflammatory response to improve learning and memory ability by down regulation of Toll-like receptor 4 expression and nuclear factor-κB activity in rats",
International Journal of Developmental Neuroscience, 29(5), pp.537-542.
17. Geula C., Wu C. and Daroff D. (1998). "Aging renders the brain vulnerable to amyloid β protein neurotoxicity", Nature Medicine, 4(3), pp.827-831.
18. Graeber MB., Ko¨sel S., Grasbon-Frodl E., Mo¨ller HJ. and Mehraein P. (1998). "Histopathology and APOE genotypes of the first Alzheimer disease patient, Auguste D.", Neurogenetics, 1( 1), pp.223–228.
19. Grotewold E. (2006), The Science of Flavonoids, New York: Springer Science Business Media. Inc.
20. Haag M., Hofman A. and Koudstaal P. (2009). "Statins are associated with a reduced risk of Alzheimer disease regardless of lipophilicity. The Rotterdam Study",
Journal of Neurology, Neurosurgery and Psychiatry, 80(1), pp.150-159.
21. Harborne J.B. and Williams C.A. (2000.). "Review: Advances in flavonoid research since 1992", Phytochemistry, 55(6), pp.481 -504.
22. He X., Bai Y., Zhao Z., Wang X., Fang J., Huang L., Zeng M., Zhang Y. and Zheng X. (2016). "Local and traditional uses, phytochemistry, and pharmacology of Sophora japonica L.: A review.", Journal of Ethnopharmacology, 187(11), pp.160-182. 23. Hodges J.R. (2006). " Alzheimer’s centennial legacy: origins, landmarks and the current status of knowledge concerning cognitive aspects", Brain, 12(3), pp.2811– 2822.
24. Ian R.A. (2000). "Anti-inflammatory drugs and Alzheimer-type pathology in aging", Neurology, 54(3), pp.112-119.
25. Ioannis P., Anastassios T. and Klimentini B. (2002). "Nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy: Basic principles and phenomena, and their applications to
chemistry, biology and medicine", Chemistry education: Research and practice in Europe, 3(2), pp.229-252.
26. Ishida J., Takayuki U., Kuniro T. and Takuo K. (1989). "Studies on the Antihemostatic Substances in Herbs Classified as Hemostatics in Traditional Chinese Medicine. I.: On the Antihemostatic Principles in Sophora japonica L.", Chemical and Pharmaceutical Bulletin, 6(37), pp.1616-1618.
27. Iwata N., Tsubuki S. and Takaki Y. (2001). "Metabolic regulation of brain Abeta by neprilysin", Science, 292(9), pp.1550-1552.
28. Je-Hyuk L. and Gun-Hee K. (2010). "Evaluation of Antioxidant and Inhibitory Activities for Different Subclasses Flavonoids on Enzymes for Rheumatoid Arthritis",
Journal of Food Science, 75(7), pp.212-217.
29. Jing L.X., Qiu H.J., Yang L.J., Miu M. and Gao Z.M. (2012). "Study on nutrition of the pagoda flower", Journal of Dalian University, 23(5), pp.87-89.
30. Karim J., Paloma B. and Juana B. (2011). "Quercetin and rutin exhibit antiamyloidogenic and fibril-disaggregating effects in vitro and potent antioxidant activity in APPswe cells", Life Sciences, 89(25), pp.939-945.
31. Leslie A. and Ulrike M. (2013). "Flavonoids: Their structure, biosynthesis and role in the Rhizosphere, including Allelopathy", Journal of Chemical Ecology, 39(6), pp.283-297.
32. Maheep K., Neelu S. and Mahabeer P. (2011). "Flavonoids: A versatile source of anticancer drugs", Pharmacognosy Review, 5(9), pp.1-12.
33. Mark R.J., Fuson K.S. and May P.C. (1999). "Characterization of 8- epiprostaglandin F2alpha as a marker of amyloid b-peptide-induced oxidative damage", Journal Of Neurochemistry, 72(8), pp.1146-1153.
34. Mark R.J., Lovell M.A. and Markesbery W.R. (1997). "A role for 4- hydroxynonenal, an aldehydic product of lipid peroxidation in disruption of ion homeostasis and neuronal death induced by amyloid b-peptide", Journal Of Neurochemistry, 68(3), pp.255-264.
35. Masters C.L., Simms G. and Weiman N.A. (1985). "Amyloid plaque core protein in Alzheimer disease and Down syndrome", The National Academy of Sciences of the United States of America National Academy of Sciences, 82(8), pp.4245-4249.
36. Naslund A., Haroutunian V. and Mohs R.C. (2000). "Correlation between elevated levels of amyloid beta-peptide in the brain and cognitive decline", The Journal of the American Medical Association, 288(3), pp.1571-1577.
37. Novak P., Reinhold S., Kontsekova E. and Nobert Z. (2017). "Safety and immunogenicity of the tau vaccine AADvac1 in patients with Alzheimer's disease: a randomised, double-blind, placebo-controlled, phase 1 trial", Neurology, 16(2), pp.123- 134.
38. Park S., Shin E.H. and Hahm T.S. (2009). "Biological activities in the extract of flos Sophora japonica L.", Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, 01(38), pp.9-13.
39. Patel R. and Natvar P. (2011). "In vitro antioxidant activity of coumarin compounds by DPPH, Superoxide and nitric oxide free radical scavenging methods",
Journal of Advanced Pharmacy Education & Research, 1(5), pp.52-68.
40. Peter P., Michelle C. and Brenda L. (2002). "Hormone Replacement Therapy and Incidence of Alzheimer Disease in Older Women", Journal of the American Medical Association, 288(17), pp.2123-2129.
41. Piotr K., Anna P., Maciej S. and Lukasz M. (2016). "Structural Characterization of Flavonoid Glycoconjugates and Their Derivatives with Mass Spectrometric Techniques", Molecules, 21(3), pp.1494-1505.
42. Qiu C., De-Ronchi D. and Fratiglioni L. (2007). " The epidemiology of dementias: an update", Current Opinion in Psychiatry, 20(4), pp.380-385.
43. Ramachandran V. and Baojun X. (2015). "Antidiabetic properties of dietary flavonoids: a cellular mechanism review", Nutrition and Metabolism, 12(60), pp.12015-12035.
44. Re R., Pellegrini N., Proteggente A., Pannala A., Yang M. and Rice-Evans C. (1999). "Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay", Free radical biology and medicine, 26(9), pp.1231-1237.
45. Robert C., David S. and Kim A. (1998). "Folate, Vitamin B12, and Serum Total Homocysteine Levels in Confirmed Alzheimer Disease", Journal of the American Medical Association, 55(4), pp.1449-1455.
46. Robert E., Patrick K. and Christian H. (2003). "Amyloidogenic processing of the Alzheimer β-amyloid precursor protein depends on lipid rafts", Journal of Cell Biology, 160(1), pp.113-120.
47. Russo A., Palumbo M., Aliano C. and Lempereur L. (2003). "Red wine micronutrients as protective agents in Alzheimer-like induced insult", Life Sciences,
48. Santamour F. and Reidel L. (1997). "A new name for Sophora japonica", Journal of Arboriculture, 24(4), pp.166-167.
49. See-Lok H., Chung-Yan P., Chengyan L., Ting Y., D. W/. and Ken K. (2015). "Inhibition of β-Amyloid Aggregation by Albiflorin, Aloeemodin and Neohesperidin and their Neuroprotective Effect on Primary Hippocampal Cells Against β-Amyloid Induced Toxicity", Current Alzheimer Research, 12(5), pp.424-433.
50. Segovia R.G. (2008). "Effect of the flavonoid quercetin on inflammation and lipid peroxidation induced by Helicobacter pylori in gastric mucosa of guinea pig", Journal of Gastroenterol, 43(5), pp.441-447.
51. Selkoe D.J., Growdon J.H. and Rossor M.N. (1998). "Molecular pathology of Alzheimer's disease: The role of amyloid", The Dementias, 2(1), pp.567-573.
52. Senay O., Ozgur K. and Zeliha S. (2016). "Antioxidant Activity of Quercetin: A Mechanistic Review", Turkish Journal of Agriculture - Food Science and Technology,
4(12), pp.1134-1138.
53. Serafini M., Peluso I. and Raguzzini A. (2010). "Flavonoids as anti-inflammatory agents", Nutrition Society, 69(3), pp.273-278.
54. Shikha S., Ranganatha R., Mahesh H., Satish K., Mrinal S., Bibha C. and Sathees C. (2016). "Quercetin, a Natural Flavonoid Interacts with DNA, Arrests Cell Cycle and Causes Tumor Regression by Activating Mitochondrial Pathway of Apoptosis",
Nature, 6(2), pp.24049-24052.
55. Shim J.G., Yeom S.H., Kim H.J., Choi Y.M. and Lee D.I. (2005). "Bone loss preveting effect of Sophrae fructus on overiectomized rats", Archives of Pharmacal Research, 28(4), pp.106-110.
56. Van R.M., Naidoo N. and Landberg R. (2013). "Dietary flavonoids and the development of type 2 diabetes and cardiovascular diseases: review of recent findings",
Current Opinion In Lipidology, 24(1), pp.25-33.
57. Varadarajan S., Yatin S. and Aksenova M. (2000). "Review: Alzheimer’s amyloid b-peptide-associated free radical oxidative stress and neurotoxicity", Journal of Structural Biology, 130(5), pp.184-208.
58. Wang X., Ouyang Y. and Liu J. (2014). "Flavonoid intake and risk of CVD: a systematic review and meta-analysis of prospective cohort studies", British Journal of Nutrition, 111(1), pp.1-11.
59. Wang Y.H., Long X.F., He F., Wang J.B. and Yuan J.L. (2009). "Study of total flavonoid from Fructus Sophorae on lipid-lowering in hyperlipidemic rats and its
antioxidant capacity", Journal of the Fourth Military Medical University, 30(8), pp.2677-2681.
60. WHO (2012). Dementia: a public health priority. Geneva, Switzerland, World Health Organization.
61. William R. (1997). "Oxidative Stress Hypothesis in Alzheimer's Disease", Free radical biology and medicine, 23(1), pp.134-147.
62. Yatin S., Varadarajan S., Aksenova M. and Butterfield D.A. (2001). "Vitamin E prevents Alzheimer’s amyloid b-peptide (1–42)-induced protein oxidation and reactivespecies formation", The Journal of Alzheimer's Disease, 2(4), pp.123-131. 63. Yatin S.M., Link C.D. and Butterfield D.A. (1999). "In-vitro and in-vivo oxidative stress associated with Alzheimer’s amyloid b-peptide (1–42)", Neurobiology of Aging,
20(6), pp.325-330.
64. Zhang L., Ravipati A.S., Koyyalamudi S.R. and Jeong S.C. (2011). "Antioxidant and anti-inflammatory activities of selected medicinal plants containing phenolic and flavonoid compounds", Journal of Agricultural and Food Chemistry, 59(5), pp.12361- 12367.
65. Zhang M., Swarts S.G., Yin L., Tian Y. and Cao Y. (2011). "Antioxidant properties of quercetin", Advances in Experimental Medicine and Biology, 701(6), pp.283-289. 66. Ligia G., Julian C. and Mar Q. (2012). "Inhibition of Angiotensin-Converting Enzyme Activity by Flavonoids: Structure-Activity Relationship Studies", Plos, 7(11), pp.49493-49499.