Chương 3 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.4. Kết quả tạo cây bưởi Diễn invitro hoàn chỉnh
Tác dụng rõ rệt nhất của auxin đối với sự phân hóa tế bào là khả năng phát sinh rễ đã được kiểm chứng từ năm 1934. Nhiều kết quả nghiên cứu đã cho thấy vai trò của IBA và α-NAA tác động đến quá trình phát sinh rễ [10].
Để chồi in vitro cây bưởi Diễn phát triển thành cây hoàn chỉnh trong ống nghiệm, chúng tôi thăm dò ảnh hưởng riêng rẽ của IBA và α-NAA đến sự phát sinh rễ ở cây bưởi Diễn.
3.4.1. Ảnh hưởng của IBA đến sự phát sinh rễ cây bưởi Diễn
Các chồi in vitro cây bưởi Diễn có chiều cao từ 3 - 4cm, 3 -5 lá được chúng tôi sử dụng để thăm dò môi trường nuôi cấy. Sử dụng môi trường MS cơ bản + đường 30g/l + agar 9,0g/l + IBA thay đổi nồng độ. Môi trường đối chứng là MS cơ bản + đường 30g/l + agar 9,0g/l. Kết quả thu được trình bày ở bảng 3.6 và hình 3.6.
Kết quả trên bảng 3.6 và hình 3.6cho thấy, trên môi trường có bổ sung IBA đều cho các chỉ tiêu theo dõi cao hơn đối chứng. Sau 4 tuần, số rễ trung bình đạt được từ 0,55-1,23 rễ/chồi, sau 6 tuần, số rễ trung bình đạt từ 0,75-2,41 rễ/chồi; sau 8 tuần, số rễ trung bình đạt được từ 0,90-2,70 rễ/chồi. Trong đó, môi trường bổ sung IBA 0,7mg/l cho hiệu qủa tạo rễ tốt nhất. Sau 8 tuần, số rễ trung bình đạt được là 2,70 rễ/chồi (tăng 1,17 lần so với đối chứng).
Nồng độ IBA cũng ảnh hưởng đến sự phát triển chiều dài rễ của cây bưởi Diễn. Chiều dài trung bình của rễ tăng dần khi nồng độ IBA trong môi trường nuôi cấy tăng từ 0,3 - 0,5mg/l. Chiều dài trung bình của rễ tăng cao nhất trên môi trường có bổ sung IBA nồng độ 0,7mg/l, đạt 3,72cm. Khi tiếp tục tăng nồng độ IBA thì chiều dài trung bình của rễ cũng giảm.
Bảng 3.6. Ảnh hưởng của IBA đến sự phát sinh rễ cây bưởi Diễn
(sau 8 tuần)
Công thức
IBA
(mg/l) Số rễ/chồi Chiều dài rễ (cm) Chất lượng rễ Sau 4 tuần ĐC 0 0 0 CT1 0,3 0,73±0,08 0,75±0,08 + CT2 0,5 1,00±0,09 1,48±0,04 + CT3 0,7 1,23±0,27 1,60±0,05 ++ CT4 0,9 0,55±0,05 1,55±0,07 + Sau 6 tuần ĐC 0 0 0 CT1 0,3 1,07±0,12 1,77±0,11 ++ CT2 0,5 1,18±0,16 2,35±0,36 ++ CT3 0,7 1,41±0,20 3,63±0,51 +++ CT4 0,9 0,75±0,07 1,71±0,12 + Sau 8 tuần ĐC 0 0 0 CT1 0,3 1,67±0,21 1,90±0,14 ++ CT2 0,5 1,70±0,13 2,32±0,34 +++ CT3 0,7 2,70±0,04 3,72±0,20 +++ CT4 0,9 0,90±0,09 0,92±0,08 +
Ghi chú: (+) rễ ngắn, nhỏ, không có rễ phụ, màu trắng; (++): rễ ngắn, màu trắng xanh; (+++): rễ mập, dài, có rễ phụ, màu trắng xanh
ĐC IBA 0.7mg/l
Xét đồng thời các chỉ tiêu theo dõi trong thí nghiệm của chúng tôi cho thấy môi trường tối ưu nhất trong các nồng độ nghiên cứu cho việc tạo rễ cây bưởi Diễn là môi trường bổ sung IBA 0,7mg/l. Trên môi trường này, số rễ/chồi đạt 2,07, chiều dài trung bình là 3,72cm, bề mặt rễ sần xùi, có nhiều rễ phụ, màu xanh nhạt.
3.4.2. Ảnh hưởng của α-NAA đến sự phát sinh rễ ở cây bưởi Diễn
NAA là chất kích thích sinh trưởng thuộc nhóm auxin, được đưa vào môi trường nuôi cấy nhằm thúc đẩy sự sinh trưởng và dãn nở của tế bào, tăng cường quá trình sinh tổng hợp và trao đổi chất, kích thích sự hình thành rễ [10]. Dựa trên những đặc tính của NAA, chúng tôi tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của NAA đến sự phát sinh rễ cây bưởi Diễn. Thí nghiệm được tiến hành trên 4 công thức có bổ sung α-
NAA ở các nồng độ khác nhau.
Bảng 3.7. Ảnh hưởng của α-NAA đến sự phát sinh rễ ở cây bưởi Diễn Công
thức
α-NAA
(mg/l) Số rễ/chồi Chiều dài rễ (cm) Chất lượng rễ Sau 4 tuần ĐC 0 0 0 CT1 0,3 0,38±0,11 0,47 ±0,03 + CT2 0,5 0,88±0,15 0,91 ±0,02 ++ CT3 0,7 0,53±0,10 0,52 ±0,04 ++ CT4 0,9 0,52±0,08 0,29 ±0,08 + Sau 6 tuần ĐC 0 0 0 CT1 0,3 0,73 ±0,11 1,59 ±0,13 +++ CT2 0,5 2,00 ±0,06 1,55 ±0,25 +++ CT3 0,7 1,16 ±0,10 1,94 ±0,11 +++ CT4 0,9 0,88 ±0,08 0,95 ±0,11 + Sau 8 tuần ĐC 0 0 0 CT1 0,3 1,32 ±0,14 2,08 ±0,15 ++ CT2 0,5 2,80 ±0,17 2,85 ±0,32 +++ CT3 0,7 1,68 ±0,17 2,36 ±0,15 +++ CT4 0,9 1,40 ±0,06 1,42 ±0,10 ++
Ghi chú: (+): rễ ngắn, nhỏ, màu trắng; (++): rễ ngắn, màu trắng xanh; (+++): rễ dài mập, màu trắng xanh.
ĐC α-NAA 0,5mg/l
Hình 3.7. Ảnh hưởng của α-NAA đến sự phát sinh rễ ở cây bưởi Diễn
(sau 8 tuần)
Kết quả bảng 3.7 chỉ ra rằng, trên môi trường bổ sung α-NAA chỉ tiêu về số rễ trung bình và chiều dài rễ tăng hơn so với môi trường không bổ sung α-NAA. Sau 8 tuần nuôi cấy, số rễ trung bình đạt được từ 1,32- 2,8, chiều dài rễ tăng từ 1,42- 2,85 cm. Bề mặt rễ xốp, rễ mập, khỏe, màu trắng xanh.
Có thể thấy, môi trường có bổ sung α-NAA ở nồng độ 0,5mg/l cho các chỉ tiêu theo dõi của thí nghiệm là tốt nhất trong các nồng độ nghiên cứu. Trên môi trường này, rễ cây bưởi Diễn khỏe, mập, sinh trưởng phát triển nhanh.
So sánh kết quả nghiên cứu ảnh hưởng riêng rẽ của IBA và α-NAA đến sự phát sinh rễ cây bưởi Diễn chúng tôi nhận thấy, cả 2 môi trường đều tạo ra chất lượng rễ tốt. Nếu nghiên cứu tạo cây hoàn chỉnh mang đặc điểm hình thái rễ của cây bưởi (có rễ chính và rễ bên), thì môi trường bổ sung IBA là phù hợp. Nếu nghiên cứu tạo số lượng rễ nhiều thì môi trường bổ sung α-NAA là thích hợp hơn trong kĩ thuật tạo rễ cây bưởi Diễn.