Nguyên lý: Một lớp huỳnh quang được đưa vào bên trong lớp silicon nằm ở đáy ống có đường kính 16x100 mm. Chất huỳnh quang nhạy với sự hiện diện của Oxy hòa tan trong môi trường. Nồng độ oxy ban đầu có trong ống làm bất hoạt huỳnh quang. Sau đó khi vi sinh vật hô hấp tiêu thụ oxy làm giảm lượng oxy dẫn đến sự phát quang. Ống môi trường được đưa vào hệ thống BACTEC MGIT 960/320 được ủ liên tục ở 370C và tín hiệu huỳnh quang được giám sát 60 phút/lần. Máy báo dương bằng tín hiệu đèn và âm thanh khi trong ống chứa từ khoảng 105
- 106 CFU/mL. Sau 42-56 ngày nếu không có tín hiệu huỳnh quang được thu nhận thì máy sẽ báo âm tính.
Mẫu đờm nuôi cấy, định danh MTB tại Bệnh viện Phổi Hà Nội Mẫu đờm nuôi cấy, định danh MTB tại Bệnh viện K74 Gữi mẫu MGIT dương
Nuôi cấy, định danh và phân lập làm kháng sinh đồ tại khoa Vi sinh và Labo Lao chuẩn Quốc Gia - Bệnh viện Phổi Trung
Hình 2.2: Hệ thống BACTEC MGIT 960
Các bƣớc tiến hành: 3-5 ml đờm có nhày mủ được thu thập trong ống falcon 50ml. Mẫu đờm của bệnh nhân được khử tạp bằng dung dịch NaCl-NaOH với thể tích pha là 1:1, voltex, ủ ở nhiệt độ phòng 15 phút sau đó thêm dung dịch NaCl-NaOH cho đến khi đầy 40 ml rồi ly tâm 3000 rpm/15 phút ở 100C, gạn dịch nổi và bổ sung 0,5 ml dung dịch đệm nuôi cấy để thu huyền dịch. Huyền dịch sau đó được đưa vào ống MGIT đã bổ sung thêm các yếu tố tăng trưởng (PANTA supplement), kháng sinh, kháng nấm và nuôi cấy trong hệ thống BACTEC MGIT 960/320. Kết quả cấy được theo dõi trong vòng 42 ngày, mẫu bệnh phẩm sẽ được máy tự động ghi nhận kết quả. Cách nhận định kết quả được tóm tắt ở bảng 2.1.
Bảng 2.1: Nhận định kết quả nuôi cấy MGIT
Máy báo Nhuộm soi Định danh Kết quả
Dương Vi khuẩn khác, nấm Ngoại nhiễm
AFB cuộn thừng, AFB Dương tính M.tuberculosis
complex
Âm tính NTM*
AFB vụn Âm tính NTM*
Âm tính Không thấy cặn vụn Âm tính
Có cặn vụn hoặc nhuộm soi dương tính làm theo quy trình ống dương