B. SUBTILIS VỚI CÁC ISOLATE NẤM B. MAYDIS TRÊN MÔI
TRƢỜNG PGA
4.5.1. Khảo sát hiệu lực đối kháng củ vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isol te nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) trên môi trƣờng PGA
Hiệu lực ức chế của vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isolate nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) trên môi trƣờng PGA thể hiện ở bảng 4.20, đồ thị 4.15 và hình nhƣ sau.
Bảng 4.20. Khảo sát hiệu lực đối kháng của vi khuẩn đối kháng B. subtilis
với isolate nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) trên môi trƣờng PGA
Hiệu lực ƣc chế (%) s u nuôi cấy (ngày)
CT Isolate 2 NSC 3NSC 4NSC CT2 BS-G 86,49 89,37 90,77 BS-C 94,34 96,05 96,25 BS-O 89,91 92,93 93,26 CT3 BS-G 34,23 59,90 66,42 BS-C 62,50 73,68 76,78 BS-O 51,38 72,15 76,24 CT4 BS-G 7,20 45,41 55,72 BS-C 28,90 53,95 60,67 BS-O 15,60 52,74 59,93
Đồ thị 4.15. Khảo sát HLĐK củ vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isol te nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10)
Qua kết quả thí nghiệm, chúng tôi nhận thấy:
Trong các công thức thí nghiệm, có thể thấy đƣợc khả năng kìm hãm của vi khuẩn B. subtilis đối với isolate nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) khác nhau khá rõ rệt:
Ở công thức 2, vi khuẩn B. subtilis đã ức chế hoàn toàn sự phát triển của isolate nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10). Trong 3 isolate vi khuẩn đƣợc sử dụng thì isolate BS-C có khả năng ức chế cao nhất là 96,25 % sau 4 ngày tiến hành thí nghiệm, sau đó đến BS-O là 93,26 % và thấp nhất là BS-G với hiệu lực ức chế là 90,77 %.
Ở công thức 3, khi cấy vi khuẩn B. subtilis đồng thời cùng lúc với isolate nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) trên môi trƣờng PGA thì khả năng ức chế thấp hơn công thức 2. Hiệu lực ức chế của isolate BS-C là cao nhất đạt 76,78%. Sau đó đến BS– O là 76,24% và thấp nhất là BS-G với hiệu lực ức chế là 66,42%.
Ở công thức 4, khi vi khuẩn B. subtilis có mặt sau nấm B. maydis-
LVN99-MT2 (PL:24/10) trên môi trƣờng 24h thì khả năng kìm hãm của vi khuẩn B. subtilis với isolate nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) thấp hơn hẳn. Hiệu lực ức chế của isolate BS-C là cao nhất, hiệu lực đạt 60,67% sau 4
ngày thí nghiệm. Sau đó đến iso,late BS- O là 59,93%. Thấp nhất là BS- G với hiệu lực ức chế là 55,72%.
Nhƣ vậy, qua kết quả khảo sát hiệu lực ức chế của vi khuẩn B. subtilis với isolate nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) gây bệnh đốm lá nhỏ trên cây ngô chúng tôi thấy rằng: Hiệu lực ức chế của các isolate B. subtilis với isolate nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) cao nhất khi B. subtilis có mặt trƣớc trên môi trƣờng. Trong các isolate vi khuẩn B. subtilis thì isolate BS-C có khả năng ức chế và kìm hãm sự phát triển của isolate nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10)tốt nhất, sau đó là isolate BS-O và thấp nhất là isolate BS-G.
Hình 4.11. Hiệu lực đối kháng củ vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isol te nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) trên môi trƣờng PGA
Ghi chú: A. Nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) đối chứng; B. Vi khuẩn B. subtilis-C hai vạch cấy trƣớc, sau 24h cấy nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10); C. Cấy đống thời cả vi khuẩn B. subtilis- C hai vạch và nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10); D. Nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) cấy trƣớc, sau 24h cấy vi khuẩn B. subtilis- C hai vạch.
4.5.2. Khảo sát hiệu lực đối kháng củ vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isol te nấm Bipolaris maydis- HN88-MT trên môi trƣờng PGA
Hiệu lực đối kháng của vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isolate nấm
Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) trên môi trƣờng PGA thể hiện ở bảng , đồ thị và hình .
Bảng 4.21. Khảo sát hiệu lực đối kháng của vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isolate nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) trên môi trƣờng PGA
Hiệu lực ƣc chế (%) s u nuôi cấy (ngày)
CT Isolate 2 3 4 CT2 BS-G 92,03 92,80 93,67 BS-C 88,00 89,50 91,79 BS-O 81,91 85,71 87,82 CT3 BS-G 38,41 56,78 69,33 BS-C 55,00 56,00 67,86 BS-O 27,66 52,80 61,93 CT4 BS-G 18,84 32,63 48,67 BS-C 8,80 23,00 44,64 BS-O 9,57 36,02 41,62
Đồ thị 4.16. Khảo sát HLĐK củ vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isol te nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10)
Qua kết quả thí nghiệm, chúng tôi nhận thấy:
Trong các công thức thí nghiệm, có thể thấy đƣợc khả năng kìm hãm của vi khuẩn B. subtilis đối với isolate nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) khác nhau khá rõ rệt:
Ở công thức 2, vi khuẩn B. subtilis đã ức chế hoàn toàn sự phát triển của isolate nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) Trong 3 isolate vi khuẩn đƣợc sử dụng thì isolate BS-G có khả năng ức chế cao nhất đạt 93,67% sau 4
ngày tiến hành thí nghiệm sau đó đến BS-C là 91,79 % và thấp nhất là BS-O với hiệu lực ức chế là 87,82 %.
Ở công thức 3, khi cấy vi khuẩn B. subtilis đồng thời cùng lúc với isolate nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) trên môi trƣờng PGA thì khả năng ức chế thấp hơn công thức 2. Hiệu lực ức chế của isolate BS-G là cao nhất đạt 69,33%. Sau đó đến BS-C là 67,86% và thấp nhất là BS-O với hiệu lực ức chế là 61,93%.
Ở công thức 4, khi vi khuẩn B. subtilis có mặt sau nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) trên môi trƣờng 24h thì khả năng kìm hãm của vi khuẩn B. subtilis với isolate nấm B. maydis- LVN99-MT2 (PL:24/10) thấp hơn hẳn. Hiệu lực ức chế của isolate BS-G là cao nhất, hiệu lực đạt 48,67% sau 4 ngày thí nghiệm. Sau đó đến isolate BS-C (44,64%). Thấp nhất là BS-O với hiệu lực ức chế là 41,62%.
Nhƣ vậy, qua kết quả khảo sát hiệu lực ức chế của vi khuẩn B. subtilis với isolate nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) gây bệnh đốm lá nhỏ trên cây ngô chúng tôi thấy rằng: Hiệu lực ức chế của các isolate B. subtilis với isolate nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) cao nhất khi B. subtilis có mặt trƣớc trên môi trƣờng. Trong các isolate vi khuẩn B. subtilis thì isolate BS-G có khả năng ức chế và kìm hãm sự phát triển của isolate nấm Bipolaris maydis- HN88- MT (PL:24/10) tốt nhất, sau đó là isolate BS-C và thấp nhất là isolate BS-O.
Hình 4.12. Hiệu lực đối kháng củ vi khuẩn B. subtilis-C với isol te nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10)
Ghi chú: A. Nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) đối chứng; B. Vi khuẩn B. subtilis-C hai vạch cấy trƣớc, sau 24h cấy nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) ; C. Cấy đống thời cả vi khuẩn B. subtilis- C hai vạch và nấm Bipolaris maydis- HN88-MT (PL:24/10) ; D. Nấm Bipolaris maydis- HN88-
4.5.3. Khảo sát hiệu lực đối kháng củ vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isol te nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10) trên môi trƣờng PGA
Hiệu lực ức chế của vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isolate nấm
Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10) trên môi trƣờng PGA thể hiện ở bảng 4.22, đồ thị 4.17 và hình nhƣ sau:
Bảng 4.22. Khảo sát hiệu lực đối kháng của vi khuẩn đối kháng B. subtilis
với isolate nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10)
Hiệu lực ƣc chế (%) s u nuôi cấy (ngày)
CT Isolate 2 NSC 3NSC 4NSC CT2 BS-G 89,52 88,67 94,90 BS-C 95,00 95,07 91,48 BS-O 72,62 75,7 87,82 CT3 BS-G 57,14 67,33 80,78 BS-C 30,95 34,58 61,93 BS-O 30,00 52,80 61,93 CT4 BS-G 30,47 48,00 62,74 BS-C 24,17 42,68 59,26 BS-O 14,29 21,49 47,21
Đồ thị 4.17. Khảo sát HLĐK củ vi khuẩn đối kháng B. subtilis với isol te nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10)
Qua kết quả thí nghiệm, chúng tôi nhận thấy:
Trong các công thức thí nghiệm, có thể thấy đƣợc khả năng kìm hãm của vi khuẩn B. subtilis đối với isolate nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10) khác nhau khá rõ rệt:
Ở công thức 2, khi vi khuẩn B. subtilis có mặt trên môi trƣờng trƣớc, thì sau 4 ngày, vi khuẩn B. subtilis đã ức chế hoàn toàn sự phát triển của isolate nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10). Trong 3 isolate vi khuẩn đƣợc sử dụng thì isolate BS-G có khả năng ức chế cao nhất đạt 94,9% sau 4 ngày tiến hành thí nghiệm sau đó đến BS-C là 91,48 % và thấp nhất là BS-O với hiệu lực ức chế là 87,82 %.
Ở công thức 3, khi cấy vi khuẩn B. subtilis đồng thời cùng lúc với isolate nấm B. maydis- LVN4-MT2 (24/10) trên môi trƣờng PGA thì khả năng ức chế thấp hơn công thức 2. Hiệu lực ức chế của isolate BS-G là cao nhất đạt 80,78%. Sau đó đến BS-C và BS-G với hiệu lực ức chế là 61,93%.
Ở công thức 4, khi vi khuẩn B. subtilis có mặt sau nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10) trên môi trƣờng 24h thì khả năng kìm hãm của vi khuẩn B. subtilis với isolate nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10) thấp hơn hẳn. Hiệu lực ức chế của isolate BS-G là cao nhất, hiệu lực đạt 62,74% sau 4 ngày thí nghiệm. Sau đó đến isolate BS-C là 59,26%. Thấp nhất là BS- O với hiệu lực đạt 47,21%.
Hình 4.13. Hiệu lực ức chế củ vi khuẩn B. subtilis-C với isol te nấm
Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10)
Ghi chú:A. Nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10) đối chứng; B. Vi khuẩn B. subtilis-C hai vạch cấy trƣớc, sau 24h cấy nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10); C. Cấy đống thời cả vi khuẩn B.
subtilis- C hai vạch và nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10); D. Nấm Bipolaris maydis- LVN4- MT2 (24/10) cấy trƣớc, sau 24h cấy vi khuẩn B. subtilis- C hai vạch.
Nhƣ vậy, qua kết quả khảo sát hiệu lực ức chế của vi khuẩn B. subtilis với isolate nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10)gây bệnh đốm lá nhỏ trên cây ngô chúng tôi thấy rằng: Hiệu lực ức chế của các isolate B. subtilis với isolate nấm Bipolaris maydis- LVN4-MT2 (24/10) cao nhất khi B. subtilis có mặt trƣớc trên môi trƣờng. Trong các isolate vi khuẩn B. subtilis thì isolate BS-G có khả năng ức chế và kìm hãm sự phát triển của isolate nấm Bipolaris maydis- LVN4- MT2 (24/10)tốt nhất, sau đó là isolate BS-C và thấp nhất là isolate BS-O.
PHẦN 5. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1. KẾT LUẬN
Qua thời gian thực hiện đề tài luận văn : “Nghiên cứu bệnh đốm lá nhỏ hại ngô vụ xuân hè tại huyện Lương tài, tỉnh Bắc Ninh”, chúng tôi rút ra một số kết luận sau:
1. Thành phần bệnh hại ngô tại huyện Lƣơng Tài tỉnh Bắc Ninh gồm 4 bệnh: đốm lá nhỏ, đốm lá lớn, khô vằn, gỉ sắt.
- Trong đó, bệnh đốm lá nhỏ, gỉ sắt là hai bệnh phổ biến nhất trên các giống ngô.
- Với tỷ lệ bệnh: 21,36 – 27,33%; chỉ số bệnh: 3,38 – 4,44%.
2. Kết quả điều tra diễn biến cho thấy: Vùng đất xã Minh Tân bị nhiễm bệnh đốm lá nhỏ nặng nhất.
- Ở chế độ luân canh Lúa – Ngô - Ngô bị nhiễm nặng nhất.
- Trong 3 giống ngô điều tra thì giống ngô HN88 bị nhiễm nặng nhất. - Ở mức phân bón 14kg ure/sào bị nhiễm nặng nhất.
- Ở chế độ trồng xen Ngô - Mƣớp bị nhiễm nặng nhất. - Trong các thời vụ trồng thì Vụ xuân bị nhiễm nặng nhất. - Ở mật độ gieo 4.500cây/sào bị nhiễm nặng nhất.
3. Bệnh đốm lá nhỏ do nấm Bipolaris maydis gây ra.
- Tản nấm có màu xanh đen trên môi trƣờng PGA, bề mặt tản nấm có đám sợi nấm màu trắng nhô lên trên. Tản nấm hình tr n, đồng tâm.
- Bào tử phân sinh có hình thoi hơi cong, đa bào, có 7 – 11 vách ngăn, màu vàng nâu nhạt, kích thƣớc bào tử 100 - 128 x 13,5 - 21 µm.
- Nấm Bipolaris maydis phát sinh, phát triển tốt nhất ở môi trƣờng nuôi cấy giàu dinh dƣỡng nhƣ PGA, PCGA và phát sinh, phát triển chậm nhất ở môi trƣờng nghèo dinh dƣỡng nhƣ CGA.
4. Kết quả khảo sát tính gây bệnh cho thấy:
- Giống ngô HN88 nhiễm nặng hơn LVN4.
giống HN88 đạt 70% và giống LVN4 đạt 60%.
- Isolate B. maydis-LVN4-MT2 có tỉ lệ nhiễm bệnh thấp nhất, lây trên giống ngô HN88 là 60%, còn trên giống ngô LVN4 là 50%.
5. Khảo sát hiệu lực đối kháng cho thấy:
- Nấm T. Viride và vi khuẩn B. Subtilis có khả năng ức chế sự phát triển nấm B. Maydis.
- Hiệu lực ức chế đạt cao nhất khi nấm T. Viride, vi khuẩn B. Subtilis có mặt trƣớc trên môi trƣờng.
- Trong các isolate nấm làm thí nghiệm thì isolate TV-2 có hiệu lực ức chế cao nhất đạt 74,69% ở isolate B. maydis-HN88-MT.
- Trong các isolate vi khuẩn làm thí nghiệm thì isolate BS - C có hiệu lực đối kháng cao nhất đạt 96,25% ở isolate B. maydis- LVN99-MT2.
5.2. KIẾN NGHỊ
Cần nghiên cứu thêm về khả năng kháng nhiễm của các giống ngô khác với bệnh nấm ngoài đồng ruộng sản xuất để có thể hoàn thiện hơn về cơ cấu giống trên địa bàn Bắc Ninh nói riêng và các vùng trồng ngô nói chung. Tiếp tục nghiên cứu khả năng ph ng trừ nấm hại ngô bằng nấm đối kháng T. viride, vi khuẩn đối kháng B. subtilis trong công tác bảo vệ thực vật đạt hiệu quả kinh tế cao, từ đó giảm thiệt hại về năng suất cũng nhƣ chất lƣợng nông sản phẩm, nâng cao hiệu quả kinh tế, góp phần đảm bảo an ninh.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
I. Tài liệu Tiếng Việt:
1. Cục trồng trọt (2011). Báo cáo định hƣớng và giải pháp phát triển cây ngô vụ đông và vụ xuân các tỉnh phía Bắc. Sơn La, 24 tháng 8 năm 2011.
2. Đỗ Tấn Dũng (2001), “Đặc tính sinh học và khả năng ph ng chống một số nấm bệnh hại rễ cây trồng cạn của nấm đối kháng Trichoderma viride”,Tạp chí BVTV. (4).
3. Lê Lƣơng Tề (1997). Các chủng (Races) của nấm Bipolaris maydis gây bệnh đốm lá ngô. Tạp chí Bảo vệ thực vật. (3). tr. 45-46.
4. Nguyễn Công Thuật (1997). Ph ng trừ tổng hợp sâu bệnh hại cây trồng. NXB Nông nghiệp, Hà Nội. tr. 10-11.
5. Phan Thúy Hiền, Lester W.Burgess, Timothy E.Knight, Len Tesoriero (2009), “Cẩm nang chẩn đoán bệnh cây ở Việt Nam”.
6. Viện Bảo vệ thực vật, (1997). Phƣơng pháp nghiên cứu Bảo vệ thực vật, tập 1,
Phƣơng pháp điều tra cơ bản dịch hại nông nghiệp và thiên địch của chúng, NXB Nông nghiệp, Hà Nội.
7. Viện BVTV (1967-1968), Kết quả điều tra bệnh cây, NXB Nông nghiệp, Hà Nội.
8. Viện Di truyền nông nghiệp (2012). Báo cáo tổng hợp kết quả khảo nghiệm đánh
giá rủi ro ngô biến đổi gen (Event TC 1507) đối với đa dạng sinh học và môi trƣờng sinh thái Việt Nam. Hà Nội, tháng 5 năm 2012.
9. Vũ Triệu Mân (2007). Giáo trình Bệnh cây chuyên khoa. Nhà xuất bản nông nghiệp Hà Nội. tr. 23-24.
II. Tài liệu tiếng Anh:
10. Byrnes K.J., J.K. Pataky and D.G. White(1989). Relationships between yield of three maize hybrids and severity of southern leaf blight caused by race O of Bipolaris maydis. Plant Disease, 73(10). pp. 834-840.
11. CABI/EPPO (2003). Cochliobolus heterostrophus. Distribution Maps of Plant Diseases, No. 346. Wallingford, UK:CAB International.
12. Chang R.Y. and P.A. Peterson (1995). Genetic control of resistance to Bipolaris maydis:one gene or two genes?. Journal of Heredity, 86(2). pp. 94-97.
13. Dodd J. L. and A. L. Hooker (1990). Previously undescripbed pathotype of Bipolaris zeicola on com. Plant Dis. 74:530, 1990. Accepted of publication 13 March. http://www.apsnet.org/pd/PDFS/1990/PlantDisease74n07_530.PD. 14. Garraway M.O., Akhtar M. and E.C.W. Wokoma(1989). Effect of high temperature
stress on peroxidase activity and electrolyte leakage in maize in relation to sporulation of Bipolaris maydis race T. Phytopathology, 79(7). pp. 800-805.
15. Holden M.J. and H. Sze(1989). Effects of Helminthosporium maydis race T toxin on electron transport in susceptible corn mitochondria and prevention of toxin actions by dicyclohexylcarbodiimide. Plant Physiology, 91(4). pp. 1296-1302. 16. Kingsland G.C. (1972). Survival of Helminthosporium maydis under field
conditions in South Carolina. Plant Disease Reporter, 56. pp. 1087-1091.
17. Klittich C.J.R. and C.R. Bronson(1986). Reduced fitness associated with TOX1 of Cochliobolus heterostrophus. Phytopathology, 76(12). pp. 1294-1298.
18. Lakshmi P. and R.C. Sharma (1987). Evaluation of maize germplasm to Helminthosporium maydis using detached leaf technique. Annals of Agricultural