4. Cấu trúc của luận văn
2.4.2. Phương pháp lấy mẫu
- Phương pháp lấy mẫu lá: Mẫu lá được lấy vào buổi sáng, mẫu được lấy theo nguyên tắc đường chéo, lấy những lá xanh, không lấy những lá già hoặc lá non, không lấy lá bị sâu bệnh, lá vàng. Ghi lại thời gian, công thức và vị trí lấy mẫu. Mẫu lấy xong được rửa sạch hoặc lau sạch, thấm khô và đưa về phòng thí nghiệm phân tích ngay [21].
- Phương pháp lấy mẫu quả: Quả được lấy vào buổi sáng. Trung bình mỗi cây lấy 1 quả không quá già hoặc quá non, không bị dị dạng, sâu bệnh. Ghi lại thời gian, công thức và vị trí lấy mẫu. Mẫu lấy xong được rửa sạch hoặc lau sạch, thấm khô đưa về phòng thí nghiệm phân tích ngay [21].
- Thời điểm lấy mẫu để phân tích: + Giai đoạn cây con: Sau gieo 20 ngày
+ Giai đoạn ra hoa đậu quả: Sau gieo 30 ngày. + Giai đoạn trước khi thu hoạch: Sau gieo 40 ngày.
2.4.2.1. Phương pháp xác định các chỉ tiêu
Đo, đếm trực tiếp các chỉ tiêu sinh trưởng theo từng thời gian nhất định, ghi chép các số liệu vào sổ nhật ký. Xử lý các số liệu bằng phương pháp thống kê sinh học.
* Các chỉ tiêu sinh trưởng, phát triển của cây dưa chuột:
- Chiều cao cây (cm): Dùng thước kẻ li đo từ đốt lá mầm đến đỉnh sinh trưởng của thân chính cao nhất ở các giai đoạn cây con, ra hoa và đậu quả.
- Số cành cấp 1/cây: Đếm số cành mọc từ thân chính của cây.
- Số lá/cây: Tính số lá trên cây ở các giai đoạn cây con, ra hoa và đậu quả. - Chiều dài quả (cm): Dùng thước kĩ thuật để đo chiều dài quả.
- Diện tích lá (cm2): Đo bằng phương pháp cân nhanh. - Số hoa/cây: Đếm tổng số hoa trên cây.
* Các chỉ tiêu năng suất, phẩm chất của cây dưa chuột:
- Số quả trên cây: Đếm số quả/ cây.
- Kích thước quả: Dùng thước kỹ thuật để đo đường kính, chiều dài quả. - Trọng lượng quả: Dùng cân đồng hồ cân trọng lượng của một quả (g) và trọng lượng quả/cây (kg).
- Tỷ lệ đậu quả: Đánh số hoa và nụ trên cây dưa chuột rồi theo dõi số hoa đậu quả, tính tỷ lệ % đậu quả/cây.
* Năng suất lý thuyết (NSLT) (tấn/ha) = Số cây/m2 x Khối lượng trung bình 1 quả (g) x Số quả/cây x 10-2.
* Năng suất thực thu (NSTT) (tấn/ha) = Khối lượng quả/ô thí nghiệm (kg) x10/Diện tích ô thí nghiệm (m2).
* Các chỉ tiêu sinh lý, hóa sinh trong lá và trong quả dưa chuột:
- Các chỉ tiêu trong lá dưa chuột:
+ Xác định hàm lượng diệp lục trong lá (diệp lục a, diệp lục b và diệp lục tổng số) theo phương pháp so màu quang phổ [7], [19].
Diệp lục được chiết bằng cồn 96%, sau đó đo mật độ quang trên máy quang phổ ở các bước sóng 665 nm, 649 nm. Hàm lượng diệp lục được tính theo công thức Wintermans, De Most, (1965):
Ca (mg/l) = 13,70 x E665 – 5,76 x E649 Cb (mg/l) = 25,80 x E649 – 7,6 x E665 Ca+b (mg/l) = 6,10 x E665 + 20,04 x E649 Hàm lượng diệp lục (mg/g chất tươi) được tính theo công thức:
Trong đó: A: hàm lượng diệp lục trong mẫu (mg/g chất tươi). C: nồng độ sắc tố (mg/l) (Ca, Cb, Ca+b).
P: trọng lượng mẫu (g).
V: thể tích dịch chiết sắc tố (ml).
+ Hàm lượng nước tổng số: Cân khối lượng lá trước và sau khi sấy khô ở 105oC đến khối lượng không đổi. Hàm lượng nước tổng số được xác định theo công thức:
Trong đó: m1 : Khối lượng lá tươi ban đầu.
+ Hàm lượng chất khô tích lũy trong lá dưa chuột: Hàm lượng chất khô tích lũy trong lá được tính theo công thức:
Trong đó: m1 : Khối lượng lá tươi ban đầu.
m2 : Khối lượng lá khô sau khi sấy ở 105oC. - Các chỉ tiêu trong quả dưa chuột:
+ Hàm lượng chất khô: Chọn mỗi công thức 2 mẫu đều nhau, xác định khối lượng tươi (g), cho vào đĩa pectri, cắt nhỏ, cân cả đĩa. Sấy ở nhiệt độ 800C trong 2 giờ. Sau đó, nâng lên 1050C qua các thời điểm 6 giờ, 8 giờ, 12 giờ cân lại cho đến khi khối lượng không đổi, xác định khối lượng khô (trừ khối lượng đĩa pectri) [25], [26].
Tính % hàm lượng chất khô theo công thức:
Trong đó: m : Hàm lượng chất khô
m1 : Khối lượng mẫu tươi ban đầu.
m2 : Khối lượng mẫu khô sau khi sấy ở 105oC. + Hàm lượng vitamin C (mg/100g chất tươi) xác định theo phương pháp chuẩn độ bằng iot. Chọn mẫu ở các công thức thí nghiệm. Cân 5 (g) thịt lá, cho vào cối sứ với 5 ml dung dịch HCL 5% nghiền nát (không cho bắn ra ngoài) cho vào bình định mức, thêm nước cất đến vạch 50 ml, lắc đều một lúc rồi lọc qua giấy lọc, hút 25 ml dung dịch lọc cho vào bình tam giác, thêm vài giọt tinh bột 5%, chuẩn độ bằng dung dịch iot 0,01N [25], [26].
Lượng vitamin C trong 100g mẫu được theo công thức: X (%) =
Trong đó: Vc: Số ml dung dịch I2 0,01 N dùng để chuẩn độ. Vf: Số ml dung dịch mẫu đem phân tích (20 ml). V: Dung tích mẫu pha loãng (50 ml).
G: Số gam nguyên liệu đem phân tích (5 g).
0,00088: Số g vitamin C tương đương với 1 ml I2 0,01N.
2.4.2.2. Các chỉ tiêu về khả năng chống chịu một số loại sâu, bệnh hại
Theo dõi trên từng ô thí nghiệm bằng quan sát trực tiếp trong suốt quá trình sinh trưởng, phát triển của cây. Theo dõi về tình tình sâu bệnh hại theo: TCVN 01–2010/BNNPTNT. Quy chuẩn quốc gia về phương pháp điều tra phát hiện dịch hại cây trồng. Ngoài ra những đối tượng côn trùng không có trong danh mục sâu hại cần theo dõi của QCVN 01-61:2011/BNNPTNT.
- Tỉ lệ cây bị bệnh (%) = (Số cây bị bệnh/tổng số cây khảo sát) x 100. - Tỉ lệ cây bị sâu hại (%) = (Số cây bị sâu hại/tổng số cây khảo sát) x 100.
+ Sâu hại:
- Rầy mềm, bọ trĩ. Phân theo 4 cấp như sau: Cấp 0: Trên các lá không có rầy hoặc bọ trĩ. Cấp 1: Nhẹ (xuất hiện rải rác).
Cấp 2: Trung bình (phân bố dưới 1/3 cây). Cấp 3: Nặng (phân bố trên 1/3 cây).
-Rệp xanh (Aphis gossypi): Điều tra mỗi ô 10 cây theo 5 điểm chéo góc. Phân thành 5 cấp như sau:
Cấp 0: Trên các lá không có rệp.
Cấp 1: Rệp phân bố rải rác, chưa hình thành các quần tụ. Cấp 3: Có 1-5 quần tụ rệp trên lá.
Cấp 5: Có nhiều quần tụ rệp đông đặc trên lá, chiếm phần đáng kể diện tích lá.
-Bệnh giả sương mai (Pseudoperono spora cubensis), bệnh phấn trắng (Eryshiphe cicorasearum): Quan sát và ước tính tỉ lệ diện tích lá nhiễm bệnh trong ô thí nghiệm. Phân theo 5 cấp như sau:
Cấp 1: Không nhiễm bệnh
Cấp 2: Nhiễm nhẹ, nhỏ hơn 20% diện tích lá nhiễm bệnh.
Cấp 3: Nhiễm trung bình, từ 20% - 40% diện tích lá nhiễm bệnh. Cấp 4: Nhiễm nặng, hơn 40 – 60% diện tích lá nhiễm bệnh. Cấp 5: Nhiễm rất nặng, hơn 60% diện tích lá nhiễm bệnh.
-Bệnh héo vàng (Fusarium oxysporum): Đếm số cây nhiễm bệnh và tính tỉ lệ cây nhiễm bệnh (%) trên tổng số cây trong ô thí nghiệm.
-Virút khảm lá CMV: Đếm số cây nhiễm bệnh và tính tỉ lệ cây nhiễm bệnh (%) trên tổng số cây trong ô thí nghiệm.
* Hạch tính hiệu quả kinh tế
- Tổng giá trị thu nhập (GR) = Năng suất x Giá bán trung bình.
- Tổng chi phí lưu động (TVC) = Chi phí vật tư + Chi phí lao động + Chi phí khác - Lợi nhuận ( RAVC) = GR – TVC.
- Tỷ suất lãi so với vốn đầu tư (lần) (VCR) = RAVC/TVC