L ỜI CẢM ƠN
2.3. VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU
2.3.1. Vắc xin
Vắc xin E. coli tái tổ hợp do Viện Công nghệ sinh học - Đại học Huế nghiên cứu và cung cấp, mỗi liều vắc xin (1ml) chứa 4 loại kháng nguyên bám dính F4, F5, F6 và F18, mỗi loại 50µg, pha trong PBS vừa đủ 500µl, 500 µl tá chất Montanide ISA 201 VG.
2.3.2. Hóa chất
+ Dung dịch phủ: (Coating buffer (carbonate-Bicarbonate buffer pH 9.6)) do Sigma-Aldrich cung cấp.
+ Dung dịch block: BSA 1%.
+ Dung dịch rửa: 0,05% Tween 20 trong dung dịch 0,1X PBS.
+ Đệm pha cơ chất OPD: Phosphate-Citrate Buffer with Sodium Perborate (Sigma-Aldrich).
+ Cơ chất tạo màu: OPD (O-Phenylenediamine Dihydrochloride).
+ Kháng thể 2: Anti-Pig IgG (whole molecule)−Peroxidase antibody produced
2.3.3. Dụng cụ và thiết bị
+ Khay ELISA
+ Máy ly tâm lạnh Eppendorf Centrifuge 5417R + Máy Vortex – genic 2
+ Máy đọc giá trị OD450 + Tủ lạnh + Tủ hấp dụng cụ + Cân phân tích + Bơm tiêm + Ống Falcon 15ml, 50ml + Ống Eppendorf 1,5 ml
2.4. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU
- Đánh giá đáp ứng kháng thể chủđộng ở lợn nái sau khi tiêm vắc xin E. coli
tái tổ hợp.
- Đánh giá đáp ứng kháng thể thụđộng ở lợn con sinh ra từ lợn nái được tiêm
vắc xin E. coli tái tổ hợp
- Đánh giá đáp ứng kháng thể chủ động ở lợn con sau cai sữa khi tiêm phòng vắc xin E. coli tái tổ hợp.
- Theo dõi tỷ lệ tiêu chảy của lợn con theo mẹ sau khi tiêm phòng vắc xin E. coli tái tổ hợp.
- Đánh giá khả năng bảo hộ của vắc xin E. coli tái tổ hợp đối với lợn sau cai sữa.
2.5. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU