3.3.1.1. Phương pháp lấy mẫu và bảo quản mẫu test viêm gan B và viêm gan C
Phương pháp lấy mẫu máu áp dụng theo hướng dẫn sử dụng đi kèm bộ kit Asan Easy Test HCV và Asan Easy Test HBs.
Lấy mẫu và bảo quản mẫu
Theo hướng dẫn kèm theo của nhà sản xuất
-Máu toàn phần: lấy máu toàn phần cho vào ống thu (chứa chất chống đông như heparin, EDTA và natri citrate) qua đường tĩnh mạch.
Nếu mẫu máu không được xét nghiệm ngay, nên để vào tủ lạnh ở 2-8oC và nên dùng trong vòng 3 ngày hoặc ở -20oC nếu để lâu hơn.
-Huyết thanh: Lấy máu toàn phần cho vào trong ống thu (không chứa các chất chống đông như heparin, EDTA và natri citrate) qua đường tĩnh mạch, để yên trong
30 phút để cho máu đông và sau đó gạn và cho vào máy ly tâm để có mẫu huyết thanh.
Nếu mẫu huyết thanh hoặc huyết tương không xét nghiệm ngay, nên để vào tủ lạnh ở 2-80C và nên dùng trong vòng 3 ngày hoặc ở -20oC nếu để lâu hơn.
Thận trọng
1. Khay thử cần thử nghiệm trên huyết thanh huyết tương người.
2. Nếu mẫu không xét nghiệm ngay, nên để vào tủ lạnh ở 2-8oC và nên dùng trong vòng 3 ngày, nếu lâu hơn nên làm đông mẫu.
-Mẫu huyết thanh hay huyết tương có cặn có thể mang lại kết quả không phù hợp. Những mẫu như thế phải được phát hiện trước khi xét nghiệm Sử dụng pipette một lần hoặc đầu pipette riêng biệt cho mỗi mẫu để tránh sự lây nhiễm chéo của bất cứ mẫu nào có thể gây ra sai lệch kết quả.
3.3.1.2. Phương pháp thử nghiệm phát hiện virus viêm gan B
Sử dụng phương pháp miễn dịch sắc kí để xác định nhanh chóng kháng nguyên HBs trong huyết tương hay huyết thanh của người. Kháng nguyên bề mặt HBs ở huyết tương hay huyết thanh được phản ứng với cộng hợp keo vàng – AntiHBs, phức hợp này đã được sấy khô trên khay thử. Hỗn hợp sau đó di chuyển trên màng bằng lực mao dẫn. Đối với kết quả dương tính, sẽ có một vạch nhìn thấy xuất hiện trên vùng thử nghiệm của màng. Virus viêm gan B được phát hiện sử dụng bộ kit Asan easy test HBs- bộ khay thử chẩn đoán phát hiện virus viêm gan B của hãng Asan Pharmaceutical. Quy trình thực hiện theo hướng dẫn của nhà sản xuất như sau:
1. Tất cả vật liệu cần được để ở nhiệt độ phòng trước khi thực hiện thử nghiệm. 2. Lấy khay ra khỏi túi nhôm.
3. Lấy 100 ul huyết thanh, huyết tương cho vào giếng mẫu S của khay thử. 4. Lấy 100 ul huyết thanh, huyết tương cho vào giếng mẫu S của khay thử. 5. Đọc kết quả trong sau 20-30 phút. Không đọc kết quả sau quá 30 phút.
3.3.1.3. Phương pháp thử nghiệm phát hiện virus viêm gan C
Sử dụng phương pháp miễn dịch sắc kí để xác định nhanh chóng kháng thể HCV trong huyết thanh, huyết tương toàn phần ở người. Đối với việc chẩn đoán HCV, kháng nguyên tái tổ hợp HCV (core,NS3,NS4,NS5) được sư dụng như một vật liệu
“bắt giữ” của xét nghiệm miễn dịch sắc kí này. Kit HCV chứa lớp màng được bọc với hỗn hợp kháng nguyên tái tổ hợp HCV (core, NS3,NS4,NS5) thích hợp trên vùng “test band” Trong thời gian xét nghiệm, mẫu được phản ứng với cộng hợp keo vàng- kháng nguyên HCV tái tổ hợp, phức hợp này đã được sấy khô trên miếng đệm cộng hợp giữa miếng đêm màng và miếng đệm mẫu. Hỗn hợp sau đó di chuyển trên màng bằng lực mao dẫn. Đối với kết quả dương tính,sẽ có một vạch nhìn thấy với độ đặc hiệu và độ nhạy cao khi phức hợp kháng nguyên r HCV, hỗn hợp liên tục di chuyển trên màng đến vạch “control line” đã được làm khô. Vì thế vạch control line và xác định thử nghiệm có hợp lệ hay không. Virus viêm gan C được phát hiện sử dụng bộ kit Asan easy test HCV- bộ khay thử chẩn đoán phát hiện virus viêm gan C của hãng Asan Pharmaceutical. Quy trình thực hiện theo hướng dẫn của nhà sản xuất như sau:
1. Tất cả vật liệu cần được để ở nhiệt độ phòng trước khi thực hiện thử nghiệm.
2. Lấy khay ra khỏi túi nhôm.
3. Lấy 10 ul huyết thanh, huyết tương hoặc 20ul máu toàn phần cho vào giếng mẫu S của khay thử.
4. Đọc kết quả trong vòng 20 phút. Không đọc kết quả sau quá 20 phút.
Thận trọng: Thời gian đọc kết quả trên được thực hiện trong phòng thí nghiệm từ 15-30oC. Nếu nhiệt độ phòng thấp hơn 150C, thời gian đọc kết quả có thể tăng thêm.