3.3.2.1. Phương pháp lấy mẫu và bảo quản mẫu test HIV
Phương pháp lấy mẫu máu áp dụng theo hướng dẫn sử dụng đi kèm bộ kit Asan Easy Test HIV 1/2.
Lấy mẫu và bảo quản mẫu
-Máu toàn phần: lấy máu toàn phần cho vào ống thu (chứa chất chống đông như heparin, EDTA và natri citrate) qua đường tĩnh mạch.
Nếu mẫu máu không được xét nghiệm ngay, nên để vào tủ lạnh ở 2-80C và nên dùng trong vòng 3 ngày hoặc ở -200C nếu để lâu hơn.
-Huyết thanh: Lấy máu toàn phần cho vào trong ống thu (không chứa các chất chống đông như heparin, EDTA và natri citrate) qua đường tĩnh mạch, để yên trong
30 phút để cho máu đông và sau đó gạn và cho vào máy ly tâm để có mẫu huyết thanh.
Nếu mẫu huyết thanh hoặc huyết tương không xét nghiệm ngay, nên để vào tủ lạnh ở 2-80C và nên dùng trong vòng 3 ngày hoặc ở -200C nếu để lâu hơn.
Thận trọng
-Mẫu huyết thanh hay huyết tương có cặn có thể mang lại kết quả không phù hợp. Những mẫu như thế phải được phát hiện trước khi xét nghiệm.
-Các chất chống đông như heparin, EDTA và natri citrate không ảnh hưởng đến kết quả thử nghiệm.
-Sử dụng pipette một lần hoặc đầu pipette riêng biệt cho mỗi mẫu để tránh sự lây nhiễm chéo của bất cứ mẫu nào có thể gây ra sai lệch kết quả.
3.3.2.2. Phương pháp thử nghiệm phát hiện HIV
Sử dụng phương pháp miễn dịch sắc kí để xác định nhanh chóng kháng thể HIV1/2 trong huyết thanh, huyết tương và máu toàn phần ở người. Đối với việc chẩn doán HIV1/2, kháng nguyên tái tổ hợp HIV1/2 (loại 1: p24,gp41 và loại 2: gp36) được sư dụng như một vật liệu “bắt giữ” của xét nghiệm miễn dịch sắc kí này. Kit HIV1/2 chứa lớp màng được bọc với hỗn hợp kháng nguyên tái tổ hợp HIV1/2 thích hợp trên vùng “test band” Trong thời gian xét nghiệm, mẫu được phản ứng với cộng hợp keo vàng- kháng nguyên HIV1/2 tái tổ hợp, phức hợp này đã được sấy khô trên phần “conjugate pad” giữa “membrane pad” và “sample pad”. Hỗn hợp sau đó di chuyển trên màng bằng lực mao dẫn. Đối với kết quả dương tính,sẽ có một vạch nhìn thấy với độ đặc hiệu và độ nhạy cao khi phức hợp kháng nguyên r HIV1/2, hỗn hợp liên tục di chuyển trên màng đến vạch “control line” đã được làm khô. Vì thế vạch control line và xác định thử nghiệm có hợp lệ hay không. Virus HIV được phát hiện sử dụng bộ kit Asan easy test HIV- bộ khay thử chẩn đoán phát hiện virus HIV của hãng Asan Pharmaceutical. Quy trình thực hiện theo hướng dẫn của nhà sản xuất như sau:
2. Lấy 10 ul huyết thanh, huyết tương hoặc 20ul máu toàn phần cho vào giếng mẫu S của khay thử
3. Thêm 3 giọt (khoảng 90ul) dung dịch khai triển vào trong giếng mẫu S của khay thử
4. Đọc kết quả sau 10-15 phút. Không đọc kết quả sau quá 20 phút