*) Lấy mẫu, bảo quản mẫu
a. Mẫu đồ uống
Đã tiến hành thu tám mẫu đồ uống đƣợc mua từ các siêu thị tại Hà Nội. Tất cả các mẫu này đƣợc đựng trong chai nhựa.
b.Mẫu nƣớc
Mẫu nƣớc thải đƣợc lấy trong phạm vi cách bờ khoảng 2 - 3 m. Đối với các mẫu phân tích nồng độ phthalate đƣợc lƣu trong chai thủy tinh sẫm màu dung tích 100mL và đƣợc bổ sung NaN3 với liều lƣợng 0,5 g NaN3/Lít mẫu nhằm hạn chế sự phân hủy sinh học. Lấy mẫu sau các nguồn thải của hai con sông và khoảng cách khoảng 1km/1 mẫu (đã đi khảo sát các vị trí lấy mẫu trƣớc đó).
Vị trí các điểm lấy mẫu nƣớc tại sông Tô Lịch
Bảng 2.1: Vị trí các điểm lấy mẫu tại Sông Tô Lịch
STT Ký hiệu mẫu Vị trí lấy mẫu Tọa độ
1. N1 Nƣớc tại Hồ Tây- Đối diện công ty Đầu tƣ phát triển đô thị
X: 105°49’02.2’’ Y: 21°02’41.5’’
2. N2 Nƣớc tại cửa điều tiết Hồ Tây A- Đối diện ngõ 65 Trích Sài
X: 105°48’54.9’’ Y: 21°02’44.5’’
3. N3
Nƣớc tại cống khu dân cƣ đối diện tòa nhà công ty CP xây dựng bảo tàng Hồ
Chí Minh- Số 1 Văn Cao
X: 105°49’00.8’’ Y: 21°02’34.1’’
STT Ký hiệu mẫu Vị trí lấy mẫu Tọa độ
Hoàng Quốc Việt với đƣờng Bƣởi Y: 21°02’45.3’’
5. N5
Nƣớc tại cống nút giao Nguyễn Khánh Toàn với đƣờng Đào Tấn chỗ rẽ vào phố Quan Hoa (có 3 cống xả chảy hợp
vào sông)
X: 105°48’19.2’’ Y: 21°02’04.7’’
6. N6 Nƣớc tại cống xả dân sinh cạnh UBND Quận Cầu Giấy
X: 105°48’04.9’’ Y: 21°01’50.4’’
7. N7 Nƣớc sông Tô Lịch tại cầu 361 đƣờng Láng
X: 105°48’08.0’’ Y: 21°01’04.6’’
8. N8
Nƣớc tại sông Tô Lịch cầu vƣợt Trung Hòa đƣờng Nguyễn Ngọc Vũ có
nguồn thải chảy ra
X: 105°48’19.4’’ Y: 21°00’51.3’’
9. N9 Nƣớc sông Tô Lịch tại cầu Ngã Tƣ Sở - phố Giáp Nhất
X: 105°49’04.1’’ Y: 21°00’06.2’’
10. N10
Nƣớc tại cống dân sinh chảy ra sông Tô Lịch đối diện ngã 3 Khƣơng Đình-
Thƣợng Đình
X: 105°48’52.6’’ Y: 20°59’42.6’’
11. N11 Nƣớc sông Tô Lịch đối diện ngõ 40- đƣờng Kim Giang- Thanh Xuân
X: 105°48’51.8’’ Y: 20°59’05.5’’
12. N12 Nƣớc sông Tô Lịch trƣớc đập ngăn X: 105°48’36.6’’ Y: 20°57’26.8’’
13. N13 Nƣớc sông Tô Lịch sau đập ngăn X: 105°48’36.1’’ Y: 20°57’26.1’’
14. N14 Nƣớc sông Tô Lịch tại cầu Lủ- Kim Giang
X: 105°48’51.8’’ Y: 20°59’05.5’’
Hình 2.1: Bản đồ vị trí lấy mẫu nƣớc tại sông Tô Lịch Vị trí các điểm lấy mẫu nƣớc tại sông Kim Ngƣu
Bảng 2.2: Vị trí các điểm lấy mẫu tại Sông Kim Ngƣu
STT Ký hiệu mẫu Vị trí lấy mẫu Tọa độ
1 NT1
Nƣớc thải sông Kim Ngƣu đầu ngõ 71 Kim Ngƣu- Hai Bà Trƣng- Hà Nội (có dòng chảy, 3 cống thải chảy vào sông)
X: 105°’51’39.4’’ Y: 21°00’26.8’
STT Ký hiệu mẫu Vị trí lấy mẫu Tọa độ
2 NT2 Nƣớc thải sông Kim Ngƣu tại cầu Lạc Trung- Hai Bà Trƣng
X: 105°’51’42.0’’ Y: 21°00’11.7’’
3 NT3 Nƣớc thải sông Kim Ngƣu tại cầu Kim Ngƣu S3- Hai Bà Trƣng
X: 105°’51’43.8’’ Y: 20°59’54.5’’
4 NT4 Nƣớc thải sông Kim Ngƣu tại cầu Mai Động- sau cống xả dân sinh 20m
X: 105°’51’44.7’’ Y: 20°59’47.7’’
5 NT5 Nƣớc thải sông Kim Ngƣu tại cầu KU1- gần chợ Mai Động
X: 105°’51’47.0’’ Y: 20°59’28.4’’
6 NT6 Nƣớc thải sông Kim Ngƣu tại cầu KU0- đối diện ngõ 281 Tam Trinh
X:105°’51’47.60’’ Y: 20°59’17.3’’
7 NT7 Nƣớc thải sông Kim Ngƣu tại cầu Đền Lừ- đối diện HC Home Center
X: 105°’51’49.2’’ Y: 20°59’04.3’’
8 NT8
Nƣớc thải sông Kim Ngƣu trƣớc đập ngăn nƣớc đối diện nhà máy xử lý
nƣớc Yên Sở
X: 105°’51’54.4’’ Y: 20°58’40.0’’
9 NT9
Nƣớc thải sông Kim Ngƣu sau đập ngăn nƣớc đối diện nhà máy xử lý
nƣớc Yên Sở
X: 105°’51’57.9’’ Y: 20°58’41.2’’
Hình 2.2: Bản đồ vị trí lấy mẫu nƣớc tại sông Kim Ngƣu *) Chuẩn bị dung dịch chuẩn làm việc
Pha loãng chất chuẩn 10-4 g/mL bằng n-hexane tới 10-6g/mL (10mL) bằng cách hút 0,1mL chuẩn 10-4 g/mL sử dụng n-hexane định mức 10mL. Lấy 1mL hỗn hợp chuẩn 10-6 g/mL định mức 10mL đƣợc hỗn hợp 10-7 g/mL Lấy 1mL hỗn hợp chuẩn 10-7g/mL định mức 10mL đƣợc hỗn hợp 10-8 g/mL Lấy 1mL hỗn hợp chuẩn 10-8g/mL định mức 10mL đƣợc hỗn hợp 10-9g/mL Sau đó lấy mỗi 1mL hỗn hợp các điểm chuẩn phthalate cho vào lọ đựng mẫu (GC vial) đem đi phân tích trên mấy GC-MS.
*) Tối ƣu hóa các điều kiện phân tích
a. Thay đổi độ dài cột trong hệ thống GC
Với đặc điểm cấu tạo của các chất phân tích nhóm phthalate là các phân tử có độ phân cực trung bình-thấp, vì vậy chúng tôi đã lựa chọn cột sắc kí khí mao quản trên nền pha tĩnh 5% diphenyl 95% dimethyl siloxane. Tuy nhiên, sự thay đổi trong khảo sát này là không nhiều và chỉ thay đổi chiều dài của cột.
- Trƣờng hợp 1: sử dụng cột mao quản DB-5MS từ Agilent (5% diphenyl 95% dimethylpolysiloxane); 25 m x 0,25 mm; Độ dày màng 0,25µm).
- Trƣờng hợp 2: sử dụng cột mao quản DB-5MS từ Agilent từ Agilent (5% diphenyl 95% dimethylpolysiloxane); 30 m x 0,25 mm; Độ dày màng 0,25µm).
b. Thay đổi chƣơng trình nhiệt độ
Chƣơng trình nhiệt độ của buồng cột đƣợc thay đổi sao cho khả năng tách các cấu tử là tối ƣu và đáp ứng yêu cầu phân tích. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã khảo sát với các chƣơng trình nhiệt độ nhƣ sau:
Với nhiệt độ injector: 250oC Chƣơng trình 1:
- Nhiệt độ cột ban đầu: 45oC, giữ trong 2 phút - Tăng đến 210oC với tốc độ 15o C/phút - Tăng đến 270oC với tốc độ 8o C /phút - Tăng đến 310oC với tốc độ 30oC/phút - Giữ ở 310oC trong 25 phút Chƣơng trình 2:
-Nhiệt độ ban đầu: 80ºC. Giữ 1,0 phút
-Tăng lên 230ºC với tốc độ 6ºC/phút
-Tăng lên 270ºC với tốc độ 8ºC/phút, giữ 2,0 phút -Tăng lên 280ºC với tốc độ 30ºC/phút, giữ 12,0 phút
c. Xác định giới hạn phát hiện và giới hạn định lƣợng của thiết bị
Chuẩn bị một dãy dung dịch chuẩn phthalate với các nồng độ từ cao xuống thấp: 50 ng/mL; 25 ng/mL; 10 ng/mL; 5 ng/mL; 1 ng/mL, tiến hành bơm vào máy sắc ký các dung dịch chuẩn này theo các điều kiện đã xác lập với thể tích bơm mẫu là 1- 3 µL, không chia dòng. Đến khi nào ta thu đƣợc tín hiệu cao gấp khoảng 3 lần tín hiệu đƣờng nền (S/N ≈ 3). Nồng độ nhỏ đƣợc bơm vào máy mà detector cho tín hiệu S/N ≈ 3 đem nhân với thể tích bơm mẫu đƣợc gọi là giới hạn phát hiện của thiết bị. Giới hạn định lƣợng của thiết bị đƣợc xác định bằng công thức: IQL = 3 IDL.
d. Tối ƣu hóa việc chuẩn bị mẫu
Các tài liệu chỉ ra rằng nên sử dụng các dung môi hữu cơ để chiết tách mẫu có chứa phthalate có thể là n-hexane hoặc acetone. Sau đó dung dịch chiết đƣợc đem cho vào máy cất quay chân không để loại bỏ dung môi hữu cơ ở nhiệt độ 40°C đến còn khoảng 5mL sau đó cho vào cột silicagel và Na2SO4 để làm sạch.
Khảo sát các lƣợng 1,0g; 1,5g; 2,0g silicagel và Na2SO4 để làm sạch mẫu sau khi đã thay đổi dung môi hòa tan với các mức 10, 15, 20mL. Sau khi thử nghiệm thì chọn tách chiết mẫu với 15mL n-hexane lắc trong 20 phút, làm lặp lại 3 lần. Dung dịch thu đƣợc sau 3 lần khoảng 45mL, cô quay còn khoảng 5mL đem qua cột lọc silicagel để làm sạch với lƣợng 1,5g silicagel :1,0g Na2SO4. Sau đó các hợp chất phthalate sẽ đƣợc rửa giải bằng 15mL n-hexane. Cuối cùng đem dung dịch thu đƣợc thổi khí N2 đến khi còn 1mL, rồi đựng vào vial đem đi phân tích.
e. Mẫu trắng
Cho 50µL chất nội chuẩn 10 ng/mL vào 45mL n-hexane. Sau khi cho vào máy cất quay chân không đến còn khoảng 5mL, thì sử dụng cột nhồi silicagel 1,5g cùng 1,0g Na2SO4 để làm sạch dung môi. Phthalate đƣợc rửa giải với 15mL n-hexane. Sau đó đƣợc thổi khí bằng khí N2 đến còn 1mL đem đi phân tích trên GC/MS.
Giá trị của mẫu thực = giá trị đo đƣợc của mẫu – giá trị mẫu trắng.
Tất cả các mẫu trắng đều đƣợc thêm 500ng/mL nội chuẩn để kiểm tra lại hiệu suất thu hồi của phƣơng pháp và làm lặp lại 10 lần để tính độ lặp lại của phƣơng pháp.
*) Phƣơng pháp phân tích các phthalate
STT Tên
1. Dimethyl phthalate (DMP) 2. Diethyl phthalate (DEP) 3. Dipropyl phthalate (DPP) 4. Diisobutyl phthalate (DiBP) 5. Dibutyl phthalate (DBP) 6. Dihexyl phthalate (DnHP) 7. Benzyl butyl phthalate (BzBP) 8. Di-cyclohexyl phthalate (DCHP) 9. di-n-octyl phthalate (DnOP)
10. Bis-(2-ethylhexyl) phthalate (DEHP) Và 7 đồng vị phthalate (sử dụng làm chất đồng hành):
STT Tên
1. Dipropyl phthalate (d4)
2. Diethyl phthalate (d4) 3. Di-n-hexyl phthalate (d4)
4. Diisobutyl phthalate (d4) 5. Benzyl butyl phthalate (d4)
6. Di(2-ethylhexyl) phthalate (d4) 7. Dimethyl phthalate (d4)
Với phƣơng pháp của Guo và cộng sự (2014) chúng tôi đã kế thừa để phân tích mẫu: Lấy 50mL mẫu, cho 500ng/mL hỗn hợp nội chuẩn vào trong mẫu nƣớc sau đó cho 15mL n-hexane và lắc trong vòng 5 phút. Làm lặp lại 3 lần. Dung dịch chiết đƣợc đem cô đặc bằng máy cất quay chân không ở nhiệt độ 40°C đến còn khoảng 5mL sau đó cho vào cột silicagel (1,5g) để làm sạch. (1,0g) Na2SO4 đƣợc cho vào trên và dƣới
cột silicagel để hút nƣớc. Sau đó các hợp chất phthalate sẽ đƣợc rửa giải bằng 15mL n- hexane. Cuối cùng đem dung dịch thu đƣợc thổi khí N2 đến khi còn 1mL, rồi đựng vào vial đem đi phân tích trên GC-MS.