Mẫu được lấy bằng phương pháp thụ động hấp thụ khí trong thời gian 1 tháng nên ngoài PAHs được hấp thụ vào trong đĩa PUF còn có các hợp chất hữu cơ khác, đặc biệt là các hợp chất mang màu, hơi ẩm.... Vì vậy, nếu không được làm sạch sẽ tạo ra sự nhiễu đường nền và giảm giới hạn định lượng của phương pháp. Có nhiều phương pháp làm sạch mẫu trong phân tích PAHs đã được áp dụng như làm sạch bằng axít bazơ [63] hay florisil [64]. Tuy nhiên, để đạt hiệu quả cao, phù hợp với mẫu PUF và chi phí thấp thì silicagel vẫn được sử dụng phổ biến. Lượng silicagel được sử dụng trong quá trình làm sạch mẫu cũng là một trong những yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến HSTH của phương pháp phân tích. Vì nếu lượng silicagel quá ít thì khả năng loại bỏ các tạp chất không cao, nhưng nếu sử dụng quá nhiều thì HSTH lại kém vỡ PAHs được giữ lại trên cột làm sạch cùng với các tạp chất. Trong khuôn khổ của đề tài, đã nghiên cứu khảo sát để tìm ra hàm lượng silicagel tối ưu nhất, vừa có khả năng loại bỏ mầu và các tạp chất hữu cơ, vừa cho độ thu hồi cao. Hàm lượng silicagel lần lượt được sử dụng là 1; 3; 5; 7; 10g. Hệ dung môi rửa giải là hexane : acetone (9:1, v/v), thể tích sử dụng là 100 ml. Cột sắc ký được nhồi ở dưới là lớp bông thủy tinh, tiếp theo phía trên là 2g NaSO4 ở giữa cột là silicagel và trên cùng tiếp tục là 2g NaSO4 khan với mục đích loại nước. Sử dụng phương pháp nhồi cột sắc ký là nhồi ướt, đảm bảo không có khoảng trống và không khí trong cột sẽ làm tăng hiệu quả của quá trình làm sạch. Lượng mẫu lấy đi làm sạch là 4ml sau khi cất quay chân không, nồng độ chuẩn được thêm vào để đánh giá là 100 g/l. Kết quả đánh giá hiệu suất thu hồi khi thay đổi lượng silicagel làm sạch được thể hiện ở hình 3.3 dưới đây.
Hình 3.3. Hiệu suất thu hồi mẫu sau khi làm sạch
Như vậy, lượng silicagel được lựa chọn tối ưu để làm sạch nền mẫu phân tích các hợp chất PAHs là 5g. Mặc dù hệ dung môi rửa giải có khác nhau nhưng lượng sử dụng ở nghiên cứu này cũng tương đương như các nghiên cứu đã được công bố. Ở lượng 1 và 3 g silicagel thì chưa đủ làm sạch mẫu, làm đường nền mẫu sẽ nâng cao, nhiều peak nhiễu hơn, độ thu hồi giảm. Trong khi đó khi sử dụng lượng nhiều silicagel ở mức 7 và 10 g thì hiệu suất giảm, để đạt hiệu suất mong muốn như 5 g thì lượng dung môi rửa giải cần nhiều hơn, điều này là không cần thiết và lãng phí. Vì vậy, cột làm sạch silicagel với 5 g sẽ được sử dụng để phân tích các mẫu PUF thu được.