CHƯƠNG 2 .PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM
2.3. Thực nghiệm
2.3.3. Phương pháp chiết tách mẫu
2.3.3.1. Phương pháp chiết tách
Phương pháp chiết tách acetaminophen trong mẫu bụi không khí trong nhà được thực hiện dựa trên phương pháp phân tích các thuốc diệt côn trùng trong mẫu bụi không khí xung quanh, đã được công bố bởi nhóm tác giả Duong và Kadokami [73]. Với nội dung cụ thể như sau:
- Chuẩn bị mẫu với khối lượng 1g và cho vào ống ly tâm màu nâu thể tích 50ml, bơm 50 µL chuẩn đồng hành (nồng độ 4 µg/mL) vào mẫu.
- Sau đó mẫu được chiết siêu âm với 20mL MeOH sử dụng thiết bị siêu âm trong thời gian 20 phút. Ly tâm 10 phút với tốc độ 2000 vòng/phút. Quá trình chiết tách được lặp lại 02 lần (15 mL MeOH/lần).
- Dịch chiết thu được sau 3 lần chiết được gộp lại và cô quay chân không đến 1 mL, sau đó cô đặc bằng thổi khí nitơ đến khi thể tích còn khoảng 0,2 mL. Thêm 50 µL nội chuẩn (4 µg/mL) vào dịch chiết và định mức đến 0,5 mL bằng MeOH. Dịch chiết cuối cùng được lọc bằng bộ lọc ống tiêm (Millex –LG, 4 mm, Merck Millipore, Darmastadt, Đức), sau đó phân tích trên thiết bị LC-QTOF-MS theo quy trình đã khảo sát.
2.3.3.2. Xác định hiệu suất thu hồi của phương pháp chiết tách
38
suất của quá trình chiết tách và phân tích. Chất chuẩn đồng hành acetaminophen –d4 được bơm vào mẫu bụi trước khi chiết tách.
Tiến hành thí nghiệm lặp lại trên nền mẫu trắng mẫu bụi không khí trong nhà thêm 50 µL chất chuẩn đồng hành nồng độ 4 µg/mL. Phân tích các mẫu thêm đó (mỗi mức làm lặp lại tối thiểu 6 lần). Tính hiệu suất thu hồi đối với mẫu theo công thức:
H% = ∁𝑡𝑡
∁𝐶 ×100 (2.14) Trong đó: H%: hiệu suất thu hồi
Ctt: Nồng độ chất phân tích trong mẫu thêm chuẩn Cc: Nồng độ thêm chuẩn (lý thuyết)
Sau đó tính hiệu suất thu hồi chung là trung bình của hiệu suất thu hồi các lần làm lặp lại.
+ Thêm chuẩn ở ba mức nồng độ là mức thấp, trung bình và cao trong khoảng nồng độ làm việc. Theo quy định của hội đồng Châu Âu đối với các chỉ tiêu an toàn (các chỉ tiêu thuộc nhóm độc, có quy định giới hạn cho phép) thêm chuẩn vào mẫu trắng ở ba mức nồng độ 0,5 lần, 1 lần, 2 lần giới hạn cho phép (MRL).
+ Yêu cầu: Độ lệch chuẩn tương đối tương đối (RSD %) tính theo diện tích peak sắc ký của 03 lần thực hiên riêng biệt trên cùng một nồng độ phải nhỏ hơn 10%.
+ Độ thu hồi của mẫu kiểm soát tối đa là 70% - 125%. + Nếu không đạt thì tiến hành kiểm tra và phân tích lại.
+ Nồng độ chất cần phân tích có trong mẫu được tính theo công thức chung như sau: ∁ = 𝑥0× 𝑙
𝑚,(𝑉) (2.14) Trong đó:
X: Nồng độ chất cần phân tích có trong mẫu µg/kg hoặc µg/L C0: Nồng độ chất cần phân tích tính từ đường chuẩn, µg/L l: Thể tích định mức, mL
39