4. Chức năng Phẩm màu.
5. Yêu cầu kỹ thuật
5.1. Định tính
Độ tan Tan trong dung dịch kiềm, ít tan trong ethanol.
Hấp thụ UV-VIS Dung dịch mẫu thử 0,5% trong dung dịch kali hydroxyd có cực đại hấp thụ tại khoảng 453 và 482 nm.
Sắc ký lớp mỏng Đạt yêu cầu (mô tả trong phần Phương pháp thử) 5.2. Độ tinh khiết
Arsen Không được quá 3,0 mg/kg.
Chì Không được quá 2,0 mg/kg.
Thủy ngân Không được quá 1,0 mg/kg.
5.3. Hàm lượng Tổng các chất màu không thấp hơn 35% (tính theo norbixin)
6. Phương pháp thử
6.1. Định tính
Sắc ký lớp mỏng Hoạt hóa bản mỏng (VD: LK6D SILICA GEL 60 A (chiều dày lớp pha tĩnh: 250 μm, cỡ bản mỏng: 5 x 20 cm)) trong 1 giờ tại 110o. Pha dung dịch mẫu thử 5% trong ethanol (95%) và chấm 10 μL lên bản mỏng. Để khô và khai triển sắc ký trong hệ dung môi gồm n-butanol/ methyl ethyl keton/dung dịch amoniac 10% (3/2/2 - tt/tt/tt)
90 CÔNG BÁO/Số 528 + 529 ngày 03-9-2010
đến khi chiều cao của tuyến dung môi so với vết chấm khoảng 10 cm. Lấy bản mỏng ra và để khô. Vết bixin và norbixin có màu vàng với giá trị Rf tương ứng khoảng 0,50
đến 0,45. Phun dung dịch natri nitrit 5%, tiếp theo phun acid sulfuric 0,5 M vết sẽ mất màu ngay.
6.2. Độ tinh khiết
Arsen - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1-Vol. 4. - Sử dụng kỹ thuật ICP-AES/AAS-hydrid. Hoặc xác định theo chuyên luận thử giới hạn Arsen - phương pháp II. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1-Vol. 4.
Chì - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1-Vol. 4. - Sử dụng kỹ thuật AAS ICP-AES thích hợp với mức hàm lượng đã định để xác định. Lựa chọn cỡ mẫu thử và phương pháp chuẩn bị mẫu dựa trên nguyên tắc của phương pháp mô tả trong JECFA monograph 1-Vol. 4.
Thủy ngân - Thử theo hướng dẫn tại JECFA monograph 1-Vol. 4. - Sử dụng kỹ thuật AAS hóa hơi lạnh. Lựa chọn cỡ mẫu thử phù hợp với mức hàm lượng quy định.
6.3. Định lượng
Tiến hành theo hướng dẫn trong chuyên luận định lượng tổng chất màu bằng phương pháp quang phổ trong JECFA monograph 1-Vol. 4 - quy trình 1, với các điều kiện như sau:
Dung môi: dung dịch KOH 0,5%
Đo độ hấp thụ quang tại λmax ~ 482 nm.
CÔNG BÁO/Số 528 + 529 ngày 03-9-2010 91
Phụ lục 25
YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƯƠNG PHÁP THỬ
ĐỐI VỚI β-APO-CAROTENAL 1. Tên khác, chỉ số CI food Orange 6; Số CI (1975): 40820
INS 160e
ADI = 0 - 5 mg/kg thể trọng.