Ra rễ in vitro
Trong vi nhân giống, ra rễ in vitro là một giai đoạn quan trọng. Đây là giai đoạn dẫn đến những thay đổi về cấu trúc lớn nhất của các mô lá như sự dày lên của lớp biểu bì và thành tế bào, cải thiện các chức năng sinh lý của khí khổng; do đó, thúc đẩy quá trình thích nghi và tăng khả năng sống sót ngoài vườn ươm của cây mô [17].
Sự hình thành rễ in vitro giúp cây đứng vững, hút nước, chất dinh dưỡng để sinh trưởng, phát triển; thích nghi ở điều kiện vườn ươm; nâng cao hiệu suất trao đổi chất, giúp cây sinh trưởng nhanh chóng và sinh sản ở giai đoạn ex vitro. Chồi in vitro nếu không được cảm ứng tạo rễ sẽ không thể sống sót khi đưa ra điều kiện vườn ươm. Vì vậy, dù các giai đoạn trước giai đoạn ra rễ được thực hiện tốt mà không trải qua giai đoạn cảm ứng hình thành rễ và thích nghi thì vi nhân giống không có ý nghĩa. Do đó đã có nhiều nghiên cứu được thực hiện trên các đối tượng cây salem, dâu tây và sâm Ngọc Linh để cải thiện khả năng ra rễ của chồi in vitro như bổ sung auxin nhân tạo, than hoạt tính hoặc cyclodextrine vào môi trường nuôi cấy (Bảng 1.4). Hầu hết các nghiên cứu này đều cho tỷ lệ ra rễ không cao, không đồng đều và bị đứt gãy khi có tác động cơ học.
Thích nghi vườn ươm
Trong nuôi cấy in vitro, các cây con được nuôi cấy trong điều kiện tối ưu; nhưng khi thuần hoá ở giai đoạn ex vitro, các cây này gặp rất nhiều điều kiện bất lợi từ môi trường. Do đó, việc theo dõi sự sinh trưởng và phát triển của cây giống ở giai đoạn
ex vitro là điều vô cùng cần thiết nhằm đánh giá được chất lượng cây giống của quá
Bảng 1.4. Một số nghiên cứu hình thành cây con hoàn chỉnh của cây salem, dâu tây, sâm Ngọc Linh
Loài thực vật Yếu tố ảnh hưởng Nguồn
Salem (Limonium sinuatum L. Mill.) 1 mg/L NAA [83]
0,4 mg/L NAA [59]
Salem (Limonium perezii Hubbard.) 0,5 mg/L IBA [93] Dâu tây (Fragaria × ananassa
Duch. “Chandler”)
0,25 mg/L IBA;
20 mg/L sucrose [123]
Dâu tây (Fragaria × ananassa Duch.)
1 mg/L IBA;
0,2 mg/L than hoạt tính [82] Sâm Ngọc Linh (Panax vietnamensis
Ha et Grushv.) 2 mg/L NAA [119]