- Đọc kết quả
2.5.Thử kháng sinh đồ
Theo Jackie (2005)
Xác định số lượng tế bào vi khuẩn để tiến hành thử kháng sinh đồ
Ở mỗi mật độ vi khuẩn xác định bằng phương pháp so mầu, dùng bộ ống chuẩn Mc-Falands đều được tiến hành trang trên đĩa MHA (theo Kock, 1987) nhằm xác định chính xác số vi khuẩn sống để tiến hành thử kháng sinh đồ.
- Định l−ợng vi khuẩn trên cơ sở sử dụng nồng độ vi khuẩn gốc theo ống chuẩn của Mc-Faland's số 3 t−ơng ứng với 9x108, sau đó pha loãng nồng độ xuống 9x107, 9x106.
- Với từng nồng độ gốc sẽ pha loãng các nồng độ đến hệ số pha loãng 10-6, 10-7, 10-8, từ mỗi nồng độ pha loãng sẽ lấy 0,1ml dung dịch trang đều trên đĩa NA, mỗi nồng độ tiến hành trên 3 đĩạ Sau 24h nuôi cấy trong tủ ấm nhiệt độ 280C tính đ−ợc số l−ợng vi khuẩn có trong 0,1ml hỗn dịch vi khuẩn để tiến hành thử kháng sinh đồ là: 4,2x108 tb/ml; 4,5x107tb/ml; 4,1x106 tb/ml
- Sẽ tiến hành thử kháng sinh đồ đối với mật độ vi khuẩn là 4,2x106tb/ml; 4,5x107tb/ml; 4,1x10 8tb/ml
- Chuẩn bị đĩa giấy kháng sinh cho các loại kháng sinh cần thử nghiệm (hàm l−ợng kháng sinh trên mỗi đĩa giấy kháng sinh đ−ợc chuẩn bị theo đĩa giấy kháng sinh đã th−ơng mại hoá)
- Thí nghiệm sẽ đ−ợc lặp lại 3 lần trên các đĩa petri khác nhau với cùng một loại kháng sinh đối với mỗi mật độ của loài vi khuẩn cần thử nghiệm.
Tiến hành thử riêng kháng sinh đồ đối với vi khuẩn thu đ−ợc trên cá bệnh
Môi tr−ờng MHA 1,5-2,0%NaCl đ−ợc đổ trên đĩa petri, trang vi khuẩn lên các đĩa petri đã chuẩn bị
- Đặt các khoanh giấy kháng sinh lên, đ−a vào tủ ấm 27-29oC
9ml 9ml 9ml 9ml 9ml 9ml 9ml 9ml