* đặc tớnh hỡnh thỏi và tớnh chất nuụi cấy:
Vi khuẩn Actinobacillus pleuropneumoniae (A. Pleuropneumoniae)
thuộc họ Pasteurellae, thuộc giống Actinobacillus, trước ủõy cũn cú tờn là
Haemophilus parahaemolyticus hay H. pleuropneumoniae, ủó ủược chứng
minh là nguyờn nhõn chớnh gõy nờn bệnh viờm phổi - màng phổi truyền nhiễm
ở lợn.
Vi khuẩn A. pleuropneumoniae là loại cầu trực khuẩn nhỏ, gram (-), kớch thước 0,3-0,5 x 0,6-1,4 àm, khụng di ủộng, khụng sinh nha bào và cú hỡnh thành giỏp mụ. Dưới kớnh hiển vi ủiện tử quan sỏt thấy vi khuẩn cú lụng hay cũn gọi là pili cú kớch thước 0,5-2 x 60-450 nm.
A. pleuropneumoniae là một vi khuẩn khú tớnh, khú nuụi cấy. Chủ yếu
sinh trưởng trong mụi trường ủược bổ sung 5% huyết thanh ngựa, và trong ủiều kiện cú 5 - 10% CO2. Vi khuẩn khụng mọc trờn mụi trường thạch mỏu thụng thường trừ khi thạch mỏu ủược bổ xung NAD và chỳng mọc xung quanh cỏc khuẩn lạc của tụ cầu do Staphylococcus aureus trong quỏ trỡnh phỏt triển trờn thạch mỏu ủó phỏ huỷ hồng cầu cú trong mỏu và sản sinh ra chất NAD.
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghiệpẦẦẦ 23
Trong mụi trường nuụi cấy, vi khuẩn ủũi hỏi yếu tố V ủể phỏt triển, nú phỏt triển tốt trờn mụi trường thạch Chocolate nhưng vi khuẩn khụng mọc trờn mụi trường MacConkey. Vi khuẩn A. pleuropneumoniae cú khả năng lờn men cỏc loại ủường: Xylose, Ribose, Glucose, Fructose, Maltose, Mannitol,...và khụng lờn men: Trehalose, Arabinose, Lactose, Raffinose,Ầ. Phản ứng sinh Indol, Catalaza, Ureaza, CAMP Test dương tớnh.
* Sức ủề khỏng:
A. pleuropneumoniae cú sức ủề khỏng kộm. Vi khuẩn chỉ tồn tại trong
mụi trường tự nhiờn trong một thời gian ngắn. Tuy nhiờn khi ủược bảo vệ bởi chất nhầy hoặc cỏc chất hữu cơ khỏc thỡ vi khuẩn cú thể sống sút trong vài ngày. Trong nước sạch ở nhiệt ủộ 4oC, vi khuẩn cú thể sống ủược 30 ngày, nhiều giờ trong khớ dung và cú thể tồn tại ủược trong 4 ngày ở mụ phổi và chất thải ở nhiệt ủộ phũng. Nú bị diệt nhanh chúng ởủộ khụ và cỏc chất sỏt trựng.
* Phõn loại:
A. pleuropneumoniae là nguyờn nhõn chớnh gõy nờn bệnh viờm phổi -
màng phổi. Cú thể chia thành 2 biotype dựa trờn nhu cầu sử dụng NAD của vi khuẩn (Pohl và cs, 1983)[38]. Biotype 1 của vi khuẩn khi nuụi cấy trờn mụi trường nhõn tạo phụ thuộc vào NAD, biotype 2 khụng phụ thuộc vào NAD nhưng cần cú cỏc pyridine nucleotide ủặc hiệu hoặc cỏc chất tiền thõn của pyridine nucleotide ủể tổng hợp NAD cần thiết cho sự phỏt triển của chỳng. Biotype 1 cú ủộc lực cao hơn biotype 2.
Trong biotype 1, 12 serotype ủược tỡm thấy, chỳng ủược phõn loại theo type huyết thanh. Type huyết thanh từ 1 - 5 ủó ủược (Kilian va cs 1978)[32] phỏt hiện (riờng serotype 5 ủược chia làm 5A và 5B), type huyết thanh 6 - 7 do ; type 8 , type 9 , type 10 , type 11 và type 12 (Nielsen, 1988)[35] xỏc ủịnh.
Trong biotype 2, serotype 2, 4, 7, 9 cú chung nhúm quyết ủịnh khỏng nguyờn như biotype 1. Gần ủõy biotype 2 cú serotype 13, 14 ủược mụ tả cú khỏng nguyờn khỏc với biotype 1 (Nielsen và cs, 1988)[35].
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghiệpẦẦẦ 24
* Cấu trỳc khỏng nguyờn và yếu tốủộc lực: - Lớp vỏ vi khuẩn:
Vi khuẩn A. pleuropneumoniae ủược bao bọc bờn ngoài bởi một lớp vỏ cú bản chất là cỏc polysaccharide. đõy là thành phần quyết ủịnh ủộc lực của vi khuẩn và gõy hiệu ứng cho serotype ủặc hiệu (Ward and Inzawa, 1997)[41].
Lớp vỏ này khụng chỉ cú ý nghĩa trong quỏ trỡnh gõy bệnh mà cũn cú ý nghĩa chẩn ủoỏn và dịch tễ (Inzana, 1991)[31]. Sự khỏc nhau về ủộc lực liờn quan ủến cấu trỳc và những sản phẩm do vỏ và nội ủộc tố tạo nờn (Dubreuil và cs, 2000)[26]. Quan sỏt dưới kớnh hiển vi ủiện tử thấy những chủng cú ủộc lực thỡ cú kớch thước lớn hơn và cú lớp vỏ bỏm dớnh hơn trong khi những chủng ớt ủộc thỡ nhỏ hơn và chỉ cú lớp vỏ mỏng (Steffens và cs 1990)[40]; (Inzana, 1991)[31]; (Jacques và cs 1987)[33] cũng xỏc ủịnh sự ủa dạng trong cấu trỳc vỏ khi phõn tớch lớp vỏ ở cỏc serotype 1 - 10 dưới kớnh hiển vi ủiện tử và cho thấy lớp vỏ dày khoảng 80 - 90mm ủến 210 - 230mm tựy từng serotype. Chớnh ủiều này ủó giải thớch cho sự khỏc nhau về ủộc lực giữa cỏc serotype.
Lớp vỏ giỳp bảo vệ vi khuẩn khỏi sự ủề khỏng của ủộng vật như hoạt ủộng thực bào và hoạt ủộng bổ thể. Những chủng cú vỏ ủề khỏng với hoạt ủộng tiờu diệt của bổ thểủó ủược Ward và Inzana chứng minh. Những thểủột biến khụng cú vỏ sẽ bị tiờu diệt ngay sau khi cú mặt huyết thanh trong khi những chủng cú vỏ thỡ khụng (Ward và Inzana, 1997)[41].
- độc tố của vi khuẩn:
đa số cỏc chủng A. pleuropneumoniae ủều tạo ra 1 hoặc nhiều hơn 1 ủộc tố phõn hủy hồng cầu. Phõn tớch những ủộc tố hồng cầu này quan sỏt thấy chỳng là 1 protein hạt nhõn của RTX (Repeat in Toxin) chỳng ủược thấy ở hầu hết cỏc vi khuẩn Gram (-) như E. coli, B. pertussin, M. haemolytica . Ở A.
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghiệpẦẦẦ 25
II, Apx III và Apx IV ; (Cho và Chae, 2001c)[24]. Người ta tin chắc chắn về vai trũ của Apx trong quỏ trỡnh gõy bệnh của A. pleuropneumoniae. Mỗi ủộc tố này khỏc nhau do hoạt ủộng phõn giải hồng cầu gõy ủộc tế bào ; (Frey và cs, 1993)[27].
Cỏc chủng biotype 2 khụng thấy tất cả cỏc ủộc tố tương ứng với cỏc chủng thuộc biotype 1. Khụng serotype nào thuộc biotype 2 tạo Apx III nhưng cú tạo ủộc tố Apx I và II .
Vai trũ ủộc lực của Apx ủó ủược chứng minh gõy ra những triệu chứng của bệnh và những tổn thương ủặc trưng trờn lợn.
- Lipopolysaccarit: (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Lipopolysaccarit (LPS) là thành phần chớnh của lớp màng ngoài vi khuẩn, và ủược cho là nguyờn nhõn gõy tổn thương mụ. Những tổn thương do LPS tinh chế, khụng gõy xuất huyết, khụng gõy hoại tử khỏc với tổn thương ủặc trưng của viờm phổi - màng phổi. Song LPS chắc chắn kết hợp với ủộc tố Apx làm tăng
ủộc lực và tăng tớnh mónh liệt cho ủộc tố Apx.
LPS cú vai trũ quan trọng trong sự bỏm dớnh của vi khuẩn lờn tế bào biểu mụ và lớp màng nhầy khớ quản của lợn. Bỏm dớnh là hoạt ủộng ban ủầu giỳp cho sự xõm nhập của vi khuẩn và cú thể là ủặc tớnh gõy bệnh, là nguyờn nhõn gõy ra bệnh.
Những nghiờn cứu gần ủõy chỉ ra rằng phần LPS của
A. pleuropneumoniae cú vai trũ trong sự phỏt triển tổn thương hay gõy chết
lợn khi bị nhiễm vi khuẩn này. Tuy nhiờn cơ chế gõy bệnh khỏc cú thể tham gia trong quỏ trỡnh sinh bệnh khi sự tổn thương vẫn phỏt triển sau khi lợn bị phơi nhiễm với vi khuẩn sống, cú hiệu giỏ huyết thanh cao với lipit A và phần carbonhydrat của phõn tử Lipopolysaccarit.
Trường đại học Nụng nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghiệpẦẦẦ 26