2. 4 Một số tai biến th−ờng gặp khi truyền máu
3.2.Nội dung nghiên cứu
3.2.1. Thử nghiệm truyền máu
- Thử phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính của chó cùng giống và khác giống.
- Theo dõi các chỉ tiêu lâm sàng và phi lâm sàng của chó tr−ớc và sau khi truyền máu của chó cùng giống và khác giống
- Thử lại phản ứng ng−ng kết giữa con cho và nhận máu, đồng thời giữa chó đ1 nhận máu với các chó khác sau 21 ngày truyền
3.2.2. Thành lập ngân hàng máu chó
3.2.3. ứng dụng truyền máu trong một số phác đồ điều trị 3.3. Ph−ơng pháp nghiên cứu 3.3. Ph−ơng pháp nghiên cứu
3.3.1. Ph−ơng pháp xác định các chỉ tiêu lâm sàng
* Kiểm tra thân nhiệt (0C): dùng nhiệt kế 420C đo ở trực tràng của chó Tay cầm nhiệt kế thuỷ ngân vảy nhẹ cho cột thuỷ ngân tụt xuống thấp hơn 350C, rồi dùng bông cồn sát trùng đầu nhiệt kế. Giữ cho con vật đứng yên hoặc nằm yên, đ−a nhiệt kế vào hậu môn, giữ nhiệt kế trong vòng 3-5 phút, lấy ra và đọc kết quả.
* Kiểm tra tần số hô hấp (lần/phút): Để kiểm tra tần số hô hấp chúng tôi tiến hành đếm số lần nâng lên hạ xuống của lồng ngực chó trong vòng 3
phút, rồi tính trung bình trong một phút, kết hợp với việc dùng ống nghe nghe vùng phổi.
* Kiểm tra tần số tim mạch (lần/phút): Để đo tần số tim mạch ta áp tay sát vào lồng ngực ở vị trí nghe tim của chó hoặc lấy ngón tay áp sát vào động mạch đùi trên phía trong, hoặc dùng ống nghe đặt vào vị trí nghe tim. Nghe và đếm tần số trong 2-3 phút rồi tính trung bình trong một phút.
3.3.2. Ph−ơng pháp xác định các chỉ tiêu phi lâm sàng
- Đếm số l−ợng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, hàm l−ợng hematocrit… bằng máy ABX Micros 60.
- Để xác định các chỉ tiêu phi lâm sàng, chúng tôi tiến hành lấy khoảng 2ml máu tĩnh mạch cho vào ống đựng máu đ1 có chất chống đông, lắc nhẹ cho máu và chất chống đông đ−ợc trộn đều. Lấy xong, chúng tôi cho máu vào bình bảo quản có đá khô gửi đến phòng xét nghiệm, dùng máy ABX Micros 60 để đọc kết quả.
3.3.2. Ph−ơng pháp xác định các chó có khả năng cho máu lẫn nhau
Để xác định khả năng cho máu, chúng tôi tiến hành thử phản ứng ng−ng kết giữa máu của con cho và máu của con nhận hoặc thử phản ứng ng−ng kết giữa huyết thanh con nhận với máu con cho và ng−ợc lại giữa máu con cho với huyết thanh con nhận.
* Cách tiến hành
- Thử phản ứng ng−ng kết giữa máu con cho với máu con nhận: Nhỏ 2- 3 giọt máu của con cho với 2-3 giọt máu của con nhận lên trên phiến kính, lấy đũa thuỷ tinh trộn đều rồi quan sát.
- Thử phản ứng ng−ng kết giữa máu với huyết thanh:
Phản ứng chính: Trộn đều 2-3 giọt huyết thanh của con nhận máu với 2-3 giọt máu của con cho máu lên phiến kính, dùng đũa thuỷ tinh trộn đều rồi quan sát.
Phản ứng phụ: Trộn đều 2-3 giọt huyết thanh của con cho với 2-3 giọt máu của con nhận lên phiến kính, dùng đũa thuỷ tinh trộn đều rồi quan sát.
Nếu có ng−ng kết thì hồng cầu tập trung thành từng đám. Nếu không ng−ng kết thì hồng cầu phân bố đều. Trong tr−ờng hợp không ng−ng kết thì có thể truyền máu đ−ợc, nếu phản ứng chính ng−ng kết thì nhất định không đ−ợc truyền máu, nếu phản ứng chính không ng−ng kết mà phản ứng phụ ng−ng kết vẫn có thể truyền máu nh−ng chỉ đ−ợc phép truyền với l−ợng máu ít, theo dõi chặt chẽ hơn khi truyền máu.
3.3.4. Kĩ thuật lấy máu.
Tr−ớc khi lấy máu chúng tôi tiến hành kiểm tra, tuyển chọn những con chó có các chỉ tiêu lâm sàng và phi lâm sàng đạt tiêu chuẩn là chó khoẻ mạnh. Nếu đạt yêu cầu chúng tôi tiến hành cố định chó hoặc giữ chó ở t− thế thoải mái và chặt chẽ.
*Vị trí lấy máu:
- Tĩnh mạch cổ
- Tĩnh mạch khoeo: chân tr−ớc lấy mặt trong, chân sau lấy ở mặt ngoài. - Tĩnh mạch bàn
* Dụng cụ lấy máu:
- Bông, cồn 700, kéo cong, băng dính… - Bàn, dây cố định chó
- Túi lấy máu: Máu lấy ra đ−ợc đựng trong túi đựng máu của nhân y đ1 có sẵn chất chống đông, vô trùng, không gây sốt: 35ml Anticoagulant Citrate Phosphate Dextrose Adenine Solution, bao gồm :
Citric Acid (monohydrate) 114mg Sodium Citrate (dihydrate) 921mg (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Monobasic Sodium Phosphate (dihydrate) 87,9mg Dextrose (anhydrous) 1,02g
Mỗi túi dùng để lấy 250ml máu
* Địa điểm lấy máu:
- Thoáng mát, yên tĩnh, đủ ánh sáng, đảm bảo vô khuẩn
* Kĩ thuật lấy máu:
- Dùng kéo cắt lông cắt lông xung quanh tĩnh mạch định lấy. - Buộc dây garo phần trên của tĩnh mạch.
- Dùng bông cồn sát trùng phần da trên tĩnh mạch xung quanh vị trí định lấy máu.
- Cầm kim mặt vát h−ớng lên trên đâm chếch một góc 300 so với mặt da. Đ−a kim lấy máu trích qua da cạnh tĩnh mạch, sau đó nhẹ nhàng đ−a mũi kim cắm vào tĩnh mạch tạo thành góc giữa tĩnh mạch và đ−ờng thẳng của kim một góc 45 0. Khi kim đ1 vào đúng tĩnh mạch thì máu sẽ chảy vào dây dẫn máu, lập tức quay mũi kim gần nh− song song với tĩnh mạch.
- Cố định kim ở vị trí lấy máu bằng băng dính.
- Khi máu chảy vào túi lấy máu, nhẹ nhàng lắc túi máu để đảo đều máu với chất chống đông, cứ đảo nhẹ nhàng nh− vậy cho tới khi lấy đủ l−ợng máu cần lấy.
- Khi đ1 lấy đủ, nhẹ nhàng rút kim ra, cho máu ở phần dây dẫn chảy hết vào túi máu rồi lấy lắp kim đậy chặt lại. Đồng thời khi rút kim phải dùng bông cồn, miết chặt tay sang ngang vài phút tại vị trí lấy máu để cầm máu.
- Sau khi lấy máu, để chó nằm yên trên bàn truyền một lúc rồi cho xuống.
3.3.5. Kĩ thuật bảo quản máu
Máu lấy ra từ con chó đủ tiêu chuẩn về các chỉ tiêu lâm sàng và phi lâm sàng. Kĩ thuật lấy máu đảm bảo vô khuẩn. Chúng tôI tiến hành bảo quản các túi máu đ1 lấy ở điều kiện nhiệt độ 1-50C.
Mẫu máu đó đ−ợc định kì kiểm tra sau những khoảng thời gian nhất định 1 tuần, 2 tuần, 3 tuần, 4 tuần, 5 tuần :
- Về mặt cảm quan: khi mới lấy ra có phân biệt rõ 2 lớp không, màu sắc có t−ơi không, có bị vón cục không?
- Kiểm tra công thức máu toàn phần bằng máy tự động ABX Micros 60 về các chỉ tiêu; hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, hematocrit, hemoglobulin….
3.3.6. Kĩ thuật truyền máu
Tr−ớc khi tiến hành truyền máu, chúng tôi tiến hành kiểm tra con chó cần truyền một số chỉ tiêu lâm sàng và phi lâm sàng. Đồng thời tiến hành thử phản ứng chéo giữa con cho và con nhận máu hay giữa mẫu máu bảo quản và máu hay huyết thanh của con nhận máu. Nếu không có hiện t−ợng ng−ng kết có thể tiến hành truyền máu.
* Chuẩn bị dụng cụ truyền
- Dụng cụ phảI đảm bảo vô khuẩn:
Dây truyền máu phải có bầu lọc, kim đúng kích cỡ 1 chai Ringer lactate
1 cọc truyền tĩnh mạch, quang treo
Dung dịch sát khuẩn, kéo cong, băng dính, bông…
Túi máu đảm bảo chất l−ợng về cảm quan và công thức máu toàn phần. * Địa điểm truyền:
Thoáng mát, yên tĩnh, đủ ánh sáng, vô khuẩn.
* Kĩ thuật truyền máu:
Cố định chó cần truyền máu lên bàn truyền và tiến hành truyền máu. Dùng kéo cắt lông cắt lông xung quanh tĩnh mạch định truyền
Dùng dây garo phía trên tĩnh mạch. Sát trùng bông cồn lên vị trí định truyền. Nhẹ nhàng đ−a kim truyền máu vào ven t−ơng tự nh− khi lấy máu, khi kim đ1 vào đúng ven, nhẹ nhàng tháo dây garo ra và mở khoá cho n−ớc sinh lý chảy vào, dùng băng cố định kim truyền lại, n−ớc sinh lý vẫn chảy ổn định, lúc này ta khoá van chuyển dây truyền có bầu lọc từ chai n−ớc sinh lý sang túi đựng máu, mở van cho máu chảy với vận tốc 20 giọt/ phút, sau khoảng 10-20
phút , con vật không có phản ứng gì thì tăng dần tốc độ lên khoảng 40-60 giọt/phút. Trong quá trình truyền theo dõi chặt chẽ các chỉ tiêu lâm sàng. Nếu có phản ứng thì tiến hành xử lý. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Truyền xong cho chó nằm yên 1 lúc Thu dọn dụng cụ, rửa, hấp
* Cách tính tốc độ truyền
Số giọt/phút= Tổng số dịch truyền x giọt/ml Tổng số phút
3.3.7. Ph−ơng pháp xử lý số liệu
Toàn bộ số liệu thu đ−ợc trong quá trình nghiên cứu đ−ợc tập hợp và xử lý theo ph−ơng pháp thống kê sinh học trên máy tính theo ch−ơng trình Excell.
phần IV
Kết quả nghiên cứu và thảo luận
4.1. Kết quả thử phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính
Khi ng−ng kết nguyên có trên bề mặt hồng cầu (có tác dụng nh− một kháng nguyên) của con chó cho máu gặp ng−ng kết tố t−ơng ứng có trong huyết thanh của con chó nhận máu (có tác dụng nh− một kháng thể) sẽ xảy ra hiện t−ợng ng−ng kết hồng cầu. Vì thế khi ch−a đủ điều kiện xác định nhóm máu của chó, để tìm cặp cho máu phù hợp, tr−ớc khi truyền máu, chúng tôi tiến hành thử phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính theo ph−ơng pháp cặp đôi.
4.1.1. Thử phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính của chó cùng giống.
Chúng tôi đ1 thử phản ứng ng−ng kết giữa máu của con nhận với huyết thanh của con cho và ng−ợc lại của 40 chó cùng giống gồm: 10 chó thuộc giống Bergie, 10 chó thuộc giống Rottweiler, 10 chó thuộc giống Phú Quốc và 10 chó thuộc giống Chó tạp. Kết quả đ−ợc trình bày ở bảng 4.1
Bảng 4.1: Kết quả thử phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính của chó cùng giống
Giống chó Số mẫu thử Số mẫu
ng−ng kết Tỷ lệ mẫu ng−ng kết (%) Tỷ lệ mẫu không ng−ng kết (%) Bergie (n=10) 90 0 0 100 Rơttweiler (n=10) 90 0 0 100 Phú Quốc (n=10) 90 0 0 100 Chó tạp (n=10) 90 0 0 100 Tổng 360 0 0 100
ảnh1: phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính của chó cùng giống
Qua bảng 4.1 cho thấy: Khi thử phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính giữa máu của chó cho với huyết thanh của chó nhận cùng giống và ng−ợc lại, trong 90 mẫu thử phản ứng của chó Bergie, số mẫu ng−ng kết là 0. T−ơng tự, số mẫu thử phản ứng của chó Rottweiler là 90, của chó Phú Quốc là 90, của chó tạp là 90 đều không xuất hiện mẫu ng−ng kết. Trong tổng số 360 mẫu thử phản ứng ng−ng kết cùng giống không có mẫu nào ng−ng kết, tỷ lệ mẫu ng−ng kết là 0%, tỷ lệ mẫu không ng−ng kết là 100%
4.1.2. Thử phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính của chó khác giống giống
Chúng tôi cũng tiến hành ghép cặp các chó khác giống với nhau và thử phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính giữa các chó khác giống đó. Chúng tôI chọn mỗi giống 5 con và tiến hành thử phản ứng ng−ng kết với 3 giống còn lại, mỗi giống 3 con. Kết quả thử phản ứng ng−ng kết giữa máu con chó cho máu với huyết thanh con chó nhận máu và ng−ợc lại đ−ợc trình bày ở bảng 4.2.
Bảng 4.2: Kết quả thử phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính của các chó khác giống Giống chó Cho máu (n=5) Nhận máu (3 giống còn lại) Số mẫu thử Số mẫu ng−ng kết Tỷ lệ mẫu ng−ng kết (%) Tỷ lệ mẫu không ng−ng kết (%) Bergie ni=3 90 0 0 100 Rottweiler ni=3 90 0 0 100 Phú Quốc ni=3 90 0 0 100 Chó tạp ni=3 90 0 0 100 Tổng 36 360 0 0 100
ảnh 2: Phản ứng ng−ng kết máu trên phiến kính của chó khác giống
Qua bảng 4.2 cho thấy: Trong tổng số 360 mẫu thử phản ứng ng−ng kết giữa máu của chó cho máu và huyết thanh của chó nhận máu khác giống và ng−ợc lại, chúng tôi không phát hiện thấy mẫu nào ng−ng kết, tỷ lệ mẫu ng−ng kết là 0% hay tỷ lệ mẫu không ng−ng kết là 100%.
Kết quả ở bảng 4.1 và 4.2 cho thấy trong tổng số 720 mẫu thử phản ứng ng−ng kết giữa máu và huyết thanh của chó cùng giống và khác giống không có mẫu nào có hiện t−ợng ng−ng kết d−ơng tính, cả 720 mẫu đều ng−ng kết âm tính, tỷ lệ mẫu ng−ng kết âm tính là 100%. Chúng tôi nhận xét thấy: không có sự khác nhau khi thử phản ứng ng−ng kết máu và huyết thanh giữa chó cùng giống và chó khác giống. Theo kết quả thông báo của Callan MB, Jone LT, Giger U 1995 và PGS. TS Nguyễn Văn Thanh 2008 khi thử phản ứng ng−ng kết giữa máu chó cho và huyết thanh chó nhận máu lần đầu tiên đ1 không xảy ra hiện t−ợng ng−ng kết [7]. Nh− vây, nhận xét của chúng tôi hoàn toàn phù hợp với kết quả thông báo của các tác giả này.
4.2. Kết quả thử nghiệm truyền máu 4.2.1. Chọn chó cho máu 4.2.1. Chọn chó cho máu
Để chọn đ−ợc chó cho máu hoàn toàn khoẻ mạnh, chúng tôI tiến hành kiểm tra chó về các chỉ tiêu lâm sàng và phi lâm sàng
4.2.1.1. Kiểm tra các chỉ tiêu lâm sàng
B−ớc đầu, để tuyển chọn đ−ợc chó cho máu khỏe mạnh, chúng tôi tiến hành kiểm tra các chỉ tiêu lâm sàng: thân nhiệt, tần số hô hấp, tần số mạch đập của 12 chó đ−ợc chọn có thân hình khoẻ mạnh, tính tình điềm đạm, trong độ tuổi từ 1- 6 tuổi, trọng l−ợng >=20kg. Kết quả đ−ợc trình bày ở bảng 4.3
Bảng 4.3: Kết quả kiểm tra các chỉ tiêu lâm sàng Các chỉ tiêu lâm sàng
STT
Thân nhiệt (0C) Tần số hô hấp (lần/phút) Tần số mạch đập (lần/phút) 1 38,6 39 90 2 40,0 47 102 3 38,4 40 99 4 38.4 38 120 5 38,5 34 103 6 39,3 30 115 7 39,0 37 125 8 38,8 37 96 9 39,2 39 96 10 38,8 35 112 11 38,6 38 117 12 40,2 55 123
Kết quả bảng 4.3 cho thấy trong 12 chó đ−ợc chọn, kiểm tra có chó số 2 có thân nhiệt 40,00C cao hơn bình th−ờng và chó số 12 có thân nhiệt 40,20C và tần số hô hấp 550C cao hơn bình th−ờng không đủ tiêu chuẩn làm chó cho máu. Vậy, trong 12 chó đ−ợc chọn đó chỉ có 10 chó đủ tiêu chuẩn hiến máu. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
4.2.1.2. Kiểm tra các chỉ tiêu phi lâm sàng
B−ớc hai, để tuyển chọn đ−ợc chó cho máu đủ tiêu chuẩn, chúng tôi tiến hành kiểm tra tiếp 10 chó (đ1 đạt tiêu chuẩn kiểm tra các chỉ tiêu lâm sàng) về các chỉ tiêu phi lâm sàng: số l−ợng hồng cầu, bạch cầu, tiểu cầu, hàm l−ợng huyết sắc tố, hematocrit bằng máy tự động ABX Micross 60. Kết quả đ−ợc trình bày ở bảng 4.4
Bảng 4.4: Kết quả các chỉ tiêu phi lâm sàng Các chỉ tiêu phi lâm sàng
STT Hồng cầu (1012/lit) Bạch cầu (109/lit) Tiểu cầu (109/lit) Huyết sắc tố (gr/lit) Hematocrit (lit/lit) 1 5,15 11,0 200 14,0 0,4 2 5,99 13,2 206 10,2 0,35 3 5,51 11,6 128 11,0 0,36 4 6,74 7,6 148 14,3 0,45 5 8,11 9,0 130 14,0 0,48 6 6,45 10,5 271 12,0 0,40 7 5,28 10,1 173 11,2 0,35 8 6,29 11,6 192 12,1 0,39 9 5,11 6,5 186 10,7 0,33 10 5,86 9,4 171 10,1 0,32
Qua bảng 4.4 cho thấy kết quả kiểm tra các chỉ tiêu phi lâm sàng của 10 chó đ−ợc chọn (đ1 qua kiểm tra các chỉ tiêu lâm sàng đạt tiêu chuẩn) đều đạt tiêu chuẩn là chó cho máu khoẻ mạnh. Nh− vậy, cả 10 chó đó đều là những chó đủ điều kiện hiến máu.
4.2.2. Kết quả thử nghiệm truyền máu
Tr−ớc khi truyền máu chúng tôi phải tiến hành thử phản ứng ng−ng kết giữa máu của con chó cho máu với huyết thanh của chó nhận máu. Theo kết quả ở phần 4.1 thì ở những chó lần đầu tiên nhận máu không xảy ra phản ứng ng−ng kết. Do đó, đối với những chó lần đầu tiên nhận máu có thể bỏ qua việc thử phản ứng ng−ng kết, còn những chó đ1 đ−ợc truyền máu hay ch−a rõ đ1 đ−ợc truyền máu hay ch−a chúng tôi vẫn phải tiến hành thử phản ứng ng−ng kết.
Kết hợp với việc tuyển chọn những chó cho máu đạt tiêu chuẩn, chúng