III. VẬT LIỆU NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIấN CỨ U
4.4.2. Khảo sỏt tớnh gõy bệnh của vi khuẩn trờn cõy ký chủ
Vi khuẩn gõy bệnh thối nhũn Ewinia carotova là loại vi khuẩn xõm nhiễm mang tớnh thụủộng, khụng cú khả năng xõm nhiễm trực tiếp qua biểu bỡ và bề mặt
mụ thực vật cũn nguyờn vẹn, chỳng xõm nhập chủ yếu vào cõy trồng thụng qua lỗ
hở tự nhiờn của cõy như khớ khổng thủy khổng, bỡ khổng của củ và quả qua cỏc vết thương sõy sỏt trong quỏ trỡnh chăm súc tỉa tỏn và một phần do tuyến trựng và cụn trựng.
Trờn thế giới, người ta sử dụng nhiều phương phỏp khỏc nhau ủể dỏnh giỏ tớnh nhiễm bệnh của vi khuẩn của một số cõy trồng, như phương phỏp sỏt thương rễ, tiờm trực tiếp vào củ quả, phương phỏp nhỳng rễ và phương phỏp nhiễm hạt ở
mật ủộ vi khuẩn 108 - 109 CFU/ml.
Trong thớ nghiệm của ủề tài chỳng tụi tiến hành khảo sỏt tớnh gõy bệnh của cỏc dũng vi khuẩn phõn lập bằng phương phỏp sỏt thương rễ, cắm tăm và tiờm trực tiếp vào củ quả.
Vi khuẩn gõy bệnh thối nhũn Ewinia carotova cú phổ ký chủ rất rộng, gõy bệnh trờn cỏc loại cõy trồng khỏc nhau. Thớ nghiệm chỳng tụi tiến hành trong chậu vại, mỗi cụng thức 3 lần nhắc mỗi lần 5 cõy (riờng cõy tỏi mỗi chậu tiển hành trồng 5 cõy) với nồng ủộ vi khuẩn là 108 CFU/ml.
Bảng 4.14. Kết quả lõy bệnh nhõn tạo của vi khuẩn gõy thối nhũn trờn giống hành tớa bằng phương phỏp sỏt thương rễ và tưới dịch vi khuẩn.
(nhiệt ủộ 28 – 300C).
Phương phỏp sỏt thương rễ Phương phỏp tưới dịch vi khuẩn MPL TSCL TSCN TL PB (%) TSCN TLPB (%) TKTD (Ngày) HT1 15 13 86,67 10 66,67 5 – 7 ngày HT2 15 12 80,00 11 73,33 6 – 7 ngày HT3 15 15 100 13 86,67 6 – 8 ngày TT1 15 11 73,33 12 80,00 4 – 5 ngày TT2 15 12 80,00 9 60,00 5 – 6 ngày ðC 15 0 0 0 0 0
Ghi chỳ: MPL: Mẫu phõn lập TSCL: Tổng số cõy lõy TSCN: Tổng số cõy nhiễm TLPB: Tỷ lệ phỏt bệnh (%) TKTD: Thời kỳ tiềm dục (ngày) HT1: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng hành Hiệp Hũa – Kinh Mụn HT2: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng hành Kim Xuyờn – Kim Thành HT3: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng hành Thăng Long – Kinh Mụn TT1: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng Tỏi Cộng Hũa- Kim Thành TT2: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng Tỏi Kim Xuyờn – Kim Thành Qua bảng 4.14 chỳng tụi thấy rằng thời gian tiềm dục và khảng năng nhiễm bệnh của giống hành tớa là khỏc nhau rừ rệt. Trong tất cả cỏc isolate vi khuẩn ủó ủược phõn lập ủược ủem lõy bệnh nhõn tạo thỡ dũng vi khuẩn phõn lập từ cõy hành cú ủộc tớnh cao hơn so với cỏc isolate vi khuẩn ủược phõn lập từ cõy tỏi (thời gian tiềm dục trung bỡnh từ 6 – 8 ngày), isolate vi khuẩn phõn lập từ cõy tỏi (thời gian tiềm dục 4 – 5 ngày).
Qua hai phương phỏp sỏt thương rễ, tưới dịch vi khuẩn khả năng gõy bệnh của isolate vi khuẩn HT3 gõy bệnh trờn cõy hành cao nhất với tỷ lệ bệnh lần lượt là100%, 86,67% isolate vi khuẩn TT2 ủươc phõn lập từ cõy tỏi cho tỷ lệ bệnh thấp nhất thấp với tỷ lệ bệnh lần lượt là 80,00%, 60,00%.
Cỏc mẫu phõn lập từ cỏc cõy ký chủ ,thời gian lõy bệnh trờn cỏc cõy hành khỏc nhau nờn mức ủộ gõy hại trờn cỏc cõy là khỏc nhau. Tất cả cỏc mẫu phõn lập
Bảng 4.15. Kết quả lõy bệnh nhõn tạo của vi khuẩn gõy thối nhũn trờn cõy tỏi bằng phương phỏp sỏt thương rễ, tưới dịch vi khuẩn ( nhiệt ủộ 28 – 300C).
Phương phỏp sỏt thương rễ Phương phỏp tưới dịch vi khuẩn MPL TSCL TSCN TL PB (%) TSCN TLPB (%) TKTD (Ngày) HT1 25 20 80,00 15 60,00 6 – 8 ngày HT2 25 18 72,00 17 68,00 5 – 7 ngày HT3 25 22 88,00 20 80,00 7 – 8 ngày TT1 25 23 92,00 21 84,00 5 – 6 ngày TT2 25 21 84,00 18 72,00 4 – 5 ngày ðC 25 0 0 0 0 0 Ghi chỳ: MPL: Mẫu phõn lập TSCL: Tổng số cõy lõy TSCN: Tổng số cõy nhiễm TLPB: Tỷ lệ phỏt bệnh (%) TKTD: Thời kỳ tiềm dục (ngày) HT1: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng hành Hiệp Hũa – Kinh Mụn HT2: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng hành Kim Xuyờn – Kim Thành HT3: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng hành Thăng Long – Kinh Mụn TT1: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng Tỏi Cộng Hũa- Kim Thành
TT2: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng Tỏi Kim Xuyờn – Kim Thành Qua bảng 4.15 chỳng tụi thấy rằng thời gian tiềm dục cỏc dũng vi khuẩn ủó ủược phõn lập ủược ủem lõy bệnh nhõn tạo thỡ dũng vi khuẩn phõn lập từ cõy hành cú ủộc tớnh cao hơn so với cỏc dũng vi khuẩn ủược phõn lập từ cõy tỏi (thời gian tiềm dục trung bỡnh từ 7 – 8 ngày), dũng vi khuẩn phõn lập từ cõy tỏi (thời gian tiềm dục 4 – 5 ngày).
Sau khi tiến hành lõy bệnh cho cõy hành thụng qua hai phương phỏp như sỏt thương rễ, tưới dịch vi khuẩn. Isolate vi khuẩn TT1 gõy bệnh trờn cõy tỏi cao nhất với tỷ lệ là 92%, 84%, isolate vi khuẩn HT2 tỷ lệ bệnh thấp nhất làn lượt là là 80%và 60%.
Vi khuẩn Ewinia carotova gõy bệnh thối nhũn thuộc nhúm ủa thực, trờn nhiều loại cõy trồng khỏc nhau. Chỳng tụi tiến hành lõy bệnh nhõn tạo cỏc dũng vi khuẩn ủó ủược phõn lập trờn cõy cà chua ủể khảo sỏt khả năng gõy bệnh của chỳng.
Bảng 4.16. Kết quả lõy bệnh nhõn tạo của vi khuẩn gõy thối nhũn trờn giống cà chua DV987 bằng phương phỏp sỏt thương rễ, tiờm trực tiếp bệnh lờn quả và phương phỏp cắm tăm ( nhiệt ủộ 28 – 300C).
Phương phỏp sỏt thương rễ Phương phỏp cắm tăm MPL TSCL TSCN TL PB (%) TSCN TLPB (%) TKTD (Ngày) HT1 15 12 80,00 12 80,00 8 -10 ngày HT2 15 11 73,33 13 86,67 7 – 9 ngày HT3 15 13 86,67 14 93,33 10 – 12ngày TT1 15 12 80,00 13 86,67 8 – 12 ngày TT2 15 10 66,67 11 73,33 7 – 9 ngày ðC 15 0 0 0 0 0 Ghi chỳ: MPL: Mẫu phõn lập TSCL: Tổng số cõy lõy TSCN: Tổng số cõy nhiễm TLPB: Tỷ lệ phỏt bệnh (%) TKTD: Thời kỳ tiềm dục (ngày) HT1: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng hành Hiệp Hũa – Kinh Mụn
HT2: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng hành Kim Xuyờn – Kim Thành HT3: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng hành Thăng Long – Kinh Mụn TT1: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng Tỏi Cộng Hũa- Kim Thành TT2: Mẫu phõn lập lấy từ vựng trồng Tỏi Kim Xuyờn – Kim Thành Qua bảng 4.16 chỳng tụi thấy rằng thời gian tiềm dục và khảng năng nhiễm bệnh của cõy cà là khỏc nhau. Trong tất cả cỏc isolatevi khuẩn ủó ủược phõn lập ủược ủem lõy bệnh nhõn tạo thỡ isolate vi khuẩn phõn lập từ cõy hành cú ủộc tớnh cao hơn so với cỏc dũng vi khuẩn ủược phõn lập từ cõy tỏi (thời gian tiềm dục trung bỡnh từ 10 – 12 ngày), isolate vi khuẩn phõn lập từ
cõy tỏi (thời gian tiềm dục 7 – 9 ngày).
Qua hai phương phỏp lõy bệnh nhõn tạo trờn cõy cà chua như phương phỏp sỏt thương rễ, cắm tăm tỷ lệ bệnh thối nhũn vi khuẩn gõy bệnh khỏc nhau. Dũng vi khuẩn HT3 tỷ lệ bệnh cao nhất 86,67%, 93,33% dũng TT2 tỷ
lệ bệnh thấp nhất là 66,67%, 73,33%.
Qua quỏ trỡnh lõy bệnh nhõn tạo trờn cỏc loại cõy ký chủ như hành, khi cú cỏc tiến hành cỏc biện phỏp như sỏt thương rễ, tiờm trực tiếp và cắm tăm TKTD và TLB cao hơn so với ủối chứng. Do ủú cỏc biện phỏp chăm súc cõy hành, cõy tỏi và cõy cà chua của người dõn và sự phỏ hoại của cụn trựng là tỏc nhõn gõy vết thương cơ giới tạo ủiều kiện thuận lợi cho sự xõm nhập phỏt triển của bệnh. Vỡ vậy trong sản xuất thỡ việc chăm súc hợp lý kết hợp với phun thuốc phũng trừ cụn trựng chớch hỳt, cắn phỏ là một biện phỏp hữu hiệu làm giảm tỏc hại của bệnh.
4.4.3. Khảo sỏt hiệu lực của một số thuốc trong phũng chống vi khuẩn ngoài sản xuất
Vi khuẩn gõy thối nhũn là loài ủa thực, phỏ hủy xõm nhiễm nhiều lọai cõy trồng khỏc nhau. Do ủú trong quỏ trỡnh sản xuất cần phải chỳ ý kết hợp nhiều biện phỏp nhằm hạn chế tỷ lệ bệnh thấp nhất ủảm bảo năng suất cho cõy trồng. Trong thớ
nghiệm của ủề tài chỳng tụi tiến hành khảo sỏt hiệu lực của một số loại thuốc trong quỏ trỡnh phũng trừ bệnh thối nhũn.
Thớ nghiệm ủược bố trớ theo khối ngẫu nhiờn ủầy ủủ với 5 cụng thức 3 lần nhắc.
Bảng 4.17. Hiệu quả phũng trừ bệnh thối nhũn hành tại huyện HTX Hiệp Hũa huyện Kinh Mụn vụủụng xuõn năm 2009 – 2010
Ghi chỳ:CT1: Benlat C 2% CT4: Phõn VSV 20 kg/sào
CT2: Newkasuran 16,6 BTN 2% CT5: ðối chứng khụng phun thuốc CT3: Boocdo 2%
Qua bảng 4.17 cỏc cụng thức phũng trừ bệnh khỏc nhau tỷ lệ bệnh gõy hại của cỏc cụng thức là khỏc nhau. Cỏc cụng thức xử lớ thuốc bún phõn vi sinh ủều cú tỷ lệ bệnh thấp hơn so với cụng thức ủối chứng.
Giai ủoạn cõy con: Bệnh thối nhũn vi khuẩn phỏt sinh gõy hại nhẹ ở cỏc cụng thức. Cụng tỷ lệ bệnh thối nhũn thấp nhất so với CT5 và với tỷ lệ bệnh là 1,25%, ðHH của thuốc là 71,49%. Sau ủú ủến CT1 tỷ lệ bệnh là 1,57% và ðHH của thuốc là 64,16% CT3 và CT4 tỷ lệ bệnh thối nhũn gõy hại cao hơn và với tỷ lệ
Giai ủoạn Tỷ lệ bệnh (%) Hiệu lực của thuốc (%) STT Cụng thức Cõy con Xuống củ Trước thu Cõy con Xuống củ Trước thu Năng suất hành (kg/sào) 1 CT1 1,57 3,23 4,37 64,16 50,12 39,60 502,8 2 CT2 1,25 3,01 4,10 71,49 54,42 43,52 535,92 3 CT3 2,46 4,60 5,75 44,20 30,40 20,68 490,32 4 CT4 3,24 5,04 6,50 26,20 23,82 14,43 497,28 5 CT5 4,41 6,61 7,25 0,00 0,00 0,00 450,96 LSD0,05 0,19 0,25 0,27 3,00 3.08 1,71 CV% 3,9 3,00 2,60 3,9 6,2 3,80
lần lượt là 2,46%, 3,24% với ủộ hữu hiệu lần lượt là 44,207%, 26,20% so với CT5 tỷ lệ bệnh là 4,41%.
Giai ủoạn xuống củ: Giai ủoạn này bệnh thối nhũn phỏt sinh phỏt triển gõy hại nặng hơn so với giai ủoạn cõy con. CT 2 tỷ lệ bệnh thối nhũn thấp nhất so với CT 5 và với tỷ lệ bệnh là 3,01%, ðHH của thuốc 54,42%. Sau ủú ủến CT 1 tỷ lệ
bệnh là 3,23% và ðHH của thuốc là 50,12%, CT 3 và CT 4 tỷ lệ bệnh thối nhũn gõy hại cao hơn và với tỷ lệ lần lượt là 4,60%, 5,04% với ðHH lần lượt là 30,40%, 23,83%. CT 5 tỷ lệ bệnh là 6,61%.
Giai ủoạn trước thu: Bệnh thối nhũn vẫn phỏt sinh phỏt triển gõy hại trờn cõy hành. Giai ủoạn này bệnh phỏt sinh gõy hại năng hơn so với giai ủoạn xuống củ, CT 2 tỷ lệ bệnh thấp nhất so với CT 5 và với tỷ lệ bệnh là 4,10% với ðHH là 43,52%. Sau ủú ủến CT 1 tỷ lệ bệnh là 4,37% và ðHH của thuốc là 39,60%. CT 3 và CT 4 tỷ lệ bệnh thối nhũn gõy hại cao hơn và với tỷ lệ lần lượt là 5,75%, 6,50% với ðHH lần lượt là 20,68%, 14,43%. CT 5 tỷ lệ bệnh là 7,25%.
Trong quỏ trỡnh khảo sỏt hiệu lực của một số thuốc phũng trừ bờnh thối nhũn ngoài ủồng ruộng ủều cú hiệu quả trong phũng trừ và làm cho năng suất cõy hành cao hơn so với cụng thức ủối chứng.
Thớ nghiệm phũng trừ bệnh thối nhũn vi khuẩn gõy hại cõy hành trờn ủồng ruộng bằng thuốc húa học và phõn sinh thỡ qua xử lý thụng kờ cho thấy giữa cỏc cụng thức cú sự sai khỏc cú ý nghĩa. Ở cỏc cụng thức thớ nghiệm ủều cho năng suất cao hơn so với cụng thức ủối chứng. Trong ủú cụng thức phun thuốc Newkasuran 16,6 BTN 2 % mang lại năng suất cao nhất 535,92kg/sào. Cụng thứủối chứng cho cho năng suất thấp nhất 450,96kg/sào.
Bảng 4.18. Hiệu quả phũng trừ bệnh thối nhũn tỏi tại huyện HTX Cộng Hũa huyện Kim Thành vụủụng xuõn năm 2009
Ghi chỳ:CT1: Benlat C 2% CT4: Phõn VSV 20kg/sào
CT2: Newkasuran 16,6 BTN 2% CT5: ðối chứng khụng phun thuốc CT3: Boocdo 2%
Qua bảng 4.18 sau khi tiến hành xử lý thuốc húa học và phõn vi sinh tỷ lệ
bệnh ở cỏc cụng thứ thớ nghiệm thấp hơn so với cụng thức ủối chứng. Và tỷ lệ bệnh gõy hại trờn cõy tỏi thấp hơn so với cõy hành.
Giai ủoạn cõy con: Bờnh thối nhũn gõy hại tỏi khụng xuất hiện ở giai ủoạn cõy con ủối với CT 1,2,3. Bệnh chỉ xuất hiện gõy hại ở CT 4 với tỷ lệ bờnh thấp 1,32%, ðHH của thuốc là 44,69%. CT 5 cú tỷ lệ bệnh là 2,30%.
Giai ủoạn xuống củ: Bệnh phỏt sinh gõy hại nhẹở tất cả cỏc cụng thức. CT 2 cú tỷ lệ bệnh thấp nhất với tỷ lệ bệnh là: 1,20%, ðHH là 51,11%. Sau ủú ủến CT 1 tỷ lệ bệnh là 1,38% và ðHH của thuốc là 48,40%. CT 3 và CT 4 tỷ lệ bệnh thối nhũn gõy hại cao hơn và với tỷ lệ lần lượt là 1,52%, 1,60%. CT 5 tỷ lệ bệnh là 2,54%.
Giai ủoạn Tỷ lệ bệnh (%) Hiệu lực của thuốc (%) STT
Cụng thức Cõy con Xuống củ Trước thu Cõy con Xuống củ Trước thu Năng suất tỏi (kg/sào) 1 CT 1 0,00 1,38 1,54 100 48,40 53,78 219,36 2 CT 2 0,00 1,20 1,25 100 51,11 58,24 220,32 3 CT 3 0,00 1,52 1,68 100 43,31 48,52 204,72 4 CT 4 1,32 1,60 3,12 46,49 40,00 12,00 202,32 5 CT 5 2,30 2,54 3,40 0 0 0 197,76 LSD0,05 0,86 0,223 0,243 1,05 4,9 3,77 CV% 6,3 7,2 5,9 0,8 7,1 5,80
Giai ủoạn trước thu: Bệnh phỏt sinh gõy hại trờn cõy tỏi cao hơn so với giai
ủoạn xuống củ và cõy con. CT 2 cú tỷ lệ bệnh thấp nhất với tỷ lệ bệnh là: 1,25%,
ðHH là 58,24%. Sau ủú ủến CT 1 tỷ lệ bệnh là 1,68% và ðHH của thuốc là 53,78%. CT 3 và CT 4 tỷ lệ bệnh thối nhũn gõy hại cao hơn và với tỷ lệ lần lượt là 1,68%, 3,12%. ðHH tương ứng là 48,52% và 12%. CT 5 tỷ lệ bệnh là 3,34%.
Cỏc cụng thức thớ nghiệm khỏc nhau thỡ cho năng suất tỏi khỏc nhau. Trong quỏ trỡnh khảo sỏt hiệu lực của thuốc húa học và phõn vi sinh ủối bệnh thúi nhũn hại tỏi thỡ cụng thức Newkasuran 16,6 BTN 2% cho năng suất cao nhất với năng suất là 220,32 kg/sào. Cụng thứủối chứng cho năng suất thấp nhất với năng suất là 197,76 kg/sào. Qua xử lý thống kờ năng suất của cõy tỏi sau khi xử lý thuốc cú sự sai khỏc cú ý nghĩa.
Qua bảng 4.17, 4.18 cho thấy cỏc cụng thức dựng thuốc húa học hay phõn VSV ủều ảnh hưởng ủến hiệu quả phũng trừ bệnh thối nhũn hành tỏi do vi khuẩn gõy ra. Trong 5 cụng thức thớ nghiệm thử hiệu lực của thuốc ủối với bệnh thối nhũn hại hành và tỏi. Cụng thức xử lý Newkasuran 16,6 BTN 2% hiệu quả phũng trừ
bệnh tụt nhất so với 4 cụng thức, sau ủú ủến cụng thức phun Benlat C 2%.
Trong quỏ trỡnh khảo sỏt hiệu lực của một số thuốc phũng trừ bờnh thối nhũn ngoài ủồng ruộng ủều cú hiệu quả trong phũng trừ và năng suất hành tỏi cao hơn so với cụng thức ủối chứng. Cỏc cụng thức khỏc nhau cho năng suất khỏc nhau.