Nguồn nấm bệnh ñược nhân sinh khối từ 10 - 15 ngày trên môi trường PDA ở nhiệt ñộ 280C trước khi tiến hành lây bệnh.
ðất dùng trong thí nghiệm ñược khử trùng ở 1210C trong 45 phút trước khi cho vào xô nhựa kích thước 20 x 25 cm.
Trồng cây ñiều con gieo trong bầu vào xô nhựa, 1 cây/1 xô. 20 cây/1 công thức.
Khi cây ra ñọt mới có 15 – 20 lá tiến hành lây bệnh nhân tạo trên cây ñiều con bằng hai phương pháp:
Phương pháp 1: áp thạch có nguồn nấm bệnh (C.gloeosporioides) lên lá, nách lá.
Phương pháp 2: phun dung dịch bào tử nấm (C.gloeosporioides) lên toàn bộ cây ñiều con . Mật ñộ bào tử 1 x 108 bào tử/1 ml, bổ xung thêm Tween 80, nồng ñộ 0,1% tăng cường ñộ bám dính.
Duy trì nhiệt ñộ, ẩm ñộ trong buồng lây bệnh nhân tạo.
Ghi nhận thời gian và triệu chứng bệnh xuất hiện và phân lập trở lại trên môi trường. So sánh với triệu chứng, ñặc ñiểm hình thái của nấm gây bệnh ban ñầu.
2.4.2.2. Nghiên cứu ñặc ñiểm sinh học của nấm C. gloeosporioides gây bệnh thán thư thán thư
Nguồn nấm phân lập từ cây ñiều bị bệnh, làm thuần nấm bằng phương pháp bắt ñơn bào tử (Burgess, 1994) và bảo quản trên giấy thấm trong ñiều kiện khô chân không, giữ ở nhiệt ñộ - 200C ñể phục vụ cho các thí nghiệm sinh học. Trước khi làm thí nghiệm, nấm C. gloeosporioides ñược cấy lại trên môi trường PDA. Các ñĩa petri ñặt trong tủñịnh ôn, nhiệt ñộ 280C.
Phương pháp tiến hành: Cấy nấm bằng phương pháp ñục lỗ, ñường kính tản nấm 0,5 cm.
Môi trường sử dụng cho các thí nghiệm: PDA.
ðĩa Petri thí nghiệm sau khi cấy nấm ñược ñặt trong tủñịnh ôn ở nhiệt ñộ 280C.
- Thí nghiệm ảnh hưởng của môi trường dinh dưỡng ñến sinh trưởng của nấm bệnh