ạ địa ựiểm nghiên cứu : đề tài ựược tiến hành nghiên cứu tại :
Trường đại học Nông nghiệp Ờ Hà Nội (tiến hành các thắ nghiệm trong phòng, ựiều kiện chậu vại và ngoài ựồng ruộng)
Xã Cổ Bi-Gia Lâm- Hà Nội và xã Ngọc Loan Ờ Văn Lâm Ờ Hưng Yên (điều tra diễn biến bệnh lở cổ rễ, héo rũ gốc mốc trắng tại một số xã trồng nhiều cà chua).
b. Thời gian nghiên cứu : đề tài ựược tiến hành trong vụ xuân 2010 từ tháng 1-
6/2010
c. Vật liệu nghiên cứu:
Vật liệu và dụng cụ ngoài nhà lưới : đất trồng, chậu, vại, khay Các dụng cụ phục vụ công tác ựiều tra : Dao, kéo, túi nilon
Giống cà chua : ựược lấy từ Trung tâm sản xuất rau sạch đHNNHN Nguồn nấm bệnh ựược phân lập từ các cây cà chua bị nhiễm bệnh lở cổ rễ và héo rũ gốc mốc trắng
Dụng cụ nghiên cứu trong phòng thắ nghiệm : Tủ cấy, ựĩa petri, que cấy, ựèn cồn, panh, dao, nồi hấp, tủ sấy, tủ ựịnh ôn, bếp ựiện.
Dịch chiết từ tỏi, hạt xoan, gừng bằng ethanol
Nguồn nấm ựối kháng Trichoderma viride, thuốc hoá học Nativo 750 WG
Các hoá chất trong phòng thắ nghiệm : Agar, ựường glucose, KH2PO4,
NaOH, HCl, cồn (70, 900), nước cất.
Các môi trường nuôi cấy nấm:
+ Môi trường WA (Water agar) :
Công dụng:Là môi trường sử dụng ựể phân lập nấm ban ựầu từ mô cây bệnh. Thành phần: Nước cất: 1000 ml, agar: 20 g.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ...16
điều chế: Thạch ựược hoà tan trong nước, ựun sôi và hấp vô trùng trong
ựiều kiện 1210C (1.5 atm), trong thời gian 45 phút. Môi trường sau khi hấp ựể
nguội ựến 50-550C rồi chia ra các ựĩa petrị
+ Môi trường PGA (Potato glucose agar):
Công dụng: ựược sử dụng ựể nuôi cấy nấm phân lập ựược từ môi trường WA làm thuần nấm.
Thành phần môi trường: Khoai tây: 200 g, glucose: 20 g, agar: 20 g, nước cất: 1000 ml.
điều chế: Khoai tây không cần gọt vỏ, rửa sạch, cắt thành miếng vuông, ựun với 1000 ml nước cất. để khoai sôi trong vòng 10-20 phút, sau ựó lọc qua vải mỏng lấy dung dịch trong và loại bỏ phần bã. Dung dịch thu ựược bổ sung nước cất cho ựủ 1000 ml, cho glucose, agar vào khuấy cho tan ựều, ựun sôi
lăn tăn rồi hấp trong ựiều kiện 1210C (1.5 atm) trong thời gian 45 phút sau ựó
ựể nguội ựến 50-550C rồi chia ra các ựĩa petri ựã ựược sấy khử trùng ở 1600C
trong 2 giờ.
+ Môi trường trấu cám:
Công dụng: để nhân sinh khối nấm: Rhizoctonia solani, Sclerotium
rolfsii, Trichoderma viride.
Thành phần: Trấu: 10 g, cám: 10 g, nước cất: 10 ml (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
điều chế: cho hỗn hợp trên vào túi nilon và trộn ựều rồi ựem hấp 2 lần ở
nhiệt ựộ 1210C (1,5 atm) trong 45 phút. Hỗn hợp sau khi ựược hấp xong ựể
nguội, cấy nấm thuần vào môi trường, sau 1 tuần dùng ựể lây bệnh nhân tạọ