3. đỐI TƯỢN G NỘI DUN G PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.5.2. Phương pháp nghiên cứu ốc ký chủ trung gian
3.5.2.1. Phương pháp thu mẫu ốc
để xác ựịnh ựược thành phần, số lượng các loài ốc chúng tôi tiến hành tìm và ựếm số lượng ốc bằng phương pháp thủ công.
Có thể dùng vợt hoặc dùng tay thu mẫu ốc tuỳ thuộc ựiều kiện thuỷ vực. đối với thuỷ vực là ao, hồ, mương hoặc ruộng sâu thì tốt nhất là dùng vợt thu mẫu ốc. Mẫu ốc ựược thu dọc bờ ao, hồ, mương bằng cách ựưa vợt xuống ựáy, sau ựó nhấc lên sàng qua trong nước ựể loại bớt bùn, dùng tay nhặt bớt rác trong vợt rồi thu mẫu ốc. đối với thuỷ vực là nơi nước nông (mương, ruộng lúa) thì dùng tay thu mẫu ốc là tốt nhất.
Mẫu ốc thu ựược ựựng trong lọ nhựa có ghi nhãn rồi chuyển về phòng thắ nghiệm của Bộ môn Ký Sinh Trùng - Khoa Thú Y - Trường đại học Nông Nghiệp - Hà Nội ựể xét nghiệm. Nếu xét nghiệm ngay sau ựó thì lọ ựựng mẫu ốc không ựổ nước, nếu ốc xét nghiệm sau ựó vài ngày thì nên cho vài ml nước vào lọ ựựng mẫu vì ốc ựựng trong lọ có nước có thể sống ựến một tuần.
3.5.2.2. Phương pháp ựịnh loại ốc
Mẫu sau khi thu thập ở các thuỷ vực khác nhau ựược ựịnh loại theo khoá ựịnh loại của đặng Ngọc Thanh, Thái Trần Bái và Phạm Văn Miên, 1980 [28].
3.5.2.3. Phương pháp xét nghiệm ốc
- Phương pháp mổ: Mổ ốc theo phương pháp Batcher [26]: Dùng kéo mổ ốc lấy những mảnh vỏ ra, bộc lộ rõ tuyến gan, tuỵ. Tách riêng tuyến gan, tuỵ ốc; sau ựó ép lên hai phiến kắnh có nhỏ thêm giọt nước cất, soi trên kắnh hiển
vi tìm Cercaria ở vật kắnh 10. Quan sát ựặc ựiểm hình thái, cấu tạo, so sánh
với mẫu Cercaria ựã dược ựịnh loại.
Ưu ựiểm của phương pháp này là có thể nhận biết ựược các giai ựoạn phát
triển từ Redia ựến Cercaria non trong cơ thể ốc; phát hiện ựược Cercaria
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ nông nghiệp ... 33
- Phương pháp ựể Cercaria chui ra tự do: đặt từng cá thể ốc vào một cốc
nhỏ có ựổ nước sao cho ngập ốc. Sau ựó ựể ắt nhất 4 tiếng, dùng pipet hút nước ra soi kắnh hiển vi, chụp ảnh và ựo, vẽ.
3.5.2.4. Phương pháp ựịnh loại Cercaria
Khi phát hiện ấu trùng sán lá trong ốc, có thể chụp ảnh, ựo kắch thước
và vẽ, sau ựó ựịnh loại Cercaria theo phương pháp của Phạm Ngọc Doanh và
Nguyễn Thị Lê (2005) [5].