Chương 2 NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3.5.3.Kiểm tra hiệu lực:
Có thể tiến hành 1 trong 2 cách sau:
a. Phương pháp 1
Miễn dịch cho 10 gà 1 tuần tuổi, mỗi con 1 liều vắcxin qui ựịnh theo ựường nhỏ mắt hoặc nhỏ mũi. 10 gà ựối chứng cùng lứa tuổi, cùng nguồn gốc ựược nuôi cách ly. Sau 3 Ờ 4 tuần, tất cả số gà trên ựược thử thách cường ựộc bằng virút IB chủng M41, mỗi con 1 liều tương ựương 103,0 Ờ 103,5 EID50. Sau khi thử thách cường ựộc, có thể ựánh giá kết quả theo hai hương pháp:
Phương pháp gây nhiễm trên trứng
Sau 4 - 5 ngày thử thách cường ựộc, dùng tăm bông ngoáy dịch xuất tiết từ khắ quản của mỗi gà cho vào 3 ml môi trường nước thịt có bổ sung kháng sinh. Mỗi gà lấy một mẫu. Các mẫu trên ựược kiểm tra sự có mặt của virút IB bằng cách: Mỗi mẫu gây nhiễm vào xoang niệu nang của 5 quả trứng gà có phôi ấp 9 - 11 ngày tuổi, mỗi quả 0, 2 ml. Ấp tiếp ở 370C, theo dõi sự phát triển của phôi từ 6 - 8 ngày, ghi lại những số lượng trứng bị chết thai. Sau 6 - 8 ngày gây nhiễm, những quả còn sống ựược ựánh giá bệnh tắch ựặc trưng của virút IB khi gây nhiễm trên trứng.
đánh giá: Nếu 1 trứng trong số 5 quả gây nhiễm bị chết thai hoặc có bệnh tắch ựặc trưng thì ựược coi là sự có mặt của virút IB trong mẫu gây nhiễm.
Phương pháp kiểm tra sự hoạt ựộng lông rung của các vòng khắ quản
Sau 6 ngày công cường ựộc, toàn bộ số gà ựược giết chết và thu hoạch lấy khắ quản của chúng. Lấy một phần khắ quản ựem kiểm tra và ựánh giá nhu ựộng lông rung khắ quản. Sự ựánh giá ựược sắp xếp theo hệ thống như sau:
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ36
ổ : Mất một phần nhu ựộng lông rung.
- : Không có nhu ựộng lông rung khắ quản.
Trong trường hợp ổ, lấy thêm một phần khác của khắ quản ựể xác nhận lại kết quả này.
Tỷ lệ bảo hộ chống lại chủng cường ựộc M41 ựược tắnh toán theo công thức sau: Tỷ lệ bảo hộ (%) = C B A 1/2 )*100 ( + . Trong ựó: A: Tổng số gà ựược ựánh giá + B: Tổng số gà ựược ựánh giá ổ C: Tổng số gà của lô thắ nghiệm.
Vắcxin ựược xem là ựạt tiêu chuẩn hiệu lực khi ắt nhất 90% số gà ựã sử dụng vắcxin không có mặt của virút IB trong khắ quản và ≥ 80% số gà ựối chứng cường ựộc có mặt của virút IB trong khắ quản.
− Phương pháp 2:
+ Chuẩn ựộ xác ựịnh hiệu giá virút IB có trong vắcxin. Mỗi liều vắcxin phải có không ắt hơn 103,5EID50.