a. Kiểm tra thuần khiết:
Mỗi lô giống ñều phải không có sự tạp nhiễm vi khuẩn, nấm, mycoplasma và những virút khác.
b. Kiểm tra ñộc lực của giống:
Vắcxin ñược sử dụng ñể bảo vệ ñàn gà chống lại sự giảm ñẻ nên kiểm tra ñộ dài miễn dịch. Với phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu gà (HI) thì gà miễn dịch
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………20
cần phải có hiệu giá kháng thể ≥ 6 log2 kéo dài ít nhất ñến 60 tuần tuổi. Các phản ứng huyết thanh học nên ñược làm với những tần xuất thường xuyên ñủ ñể chỉ ra rằng hiệu giá kháng thể không phải do sự thúc ñẩy của các virút IB ngoại lai.
Vắcxin ñược sử dụng ñể bảo vệ ñàn gà giò và gà nuôi chống lại bệnh ở thể hô hấp cũng nên kiểm tra tương tự về thời gian ñáp ứng miễn dịch. Trường hợp gà giò ñược kiểm tra hiệu giá kháng thể ñến thời ñiểm giết thịt, còn ñàn gà tiếp tục nuôi ñược kiểm tra hiệu giá kháng thể ñến thời ñiểm sử dụng vắcxin tiếp theo (thường 16 – 18 tuần tuổi).
c. Kiểm tra an toàn:
Giống virút nên ñược kiểm tra ñể phát hiện bất kỳ một khả năng nào làm tăng cường ñộc lực trở lại của virút. Giống virút vắcxin ñược kiểm tra an toàn giống như mục sản xuất vắcxin.
d. Kiểm tra hiệu quả:
ðể chứng minh hiệu quả của virút giống, virút giống gốc và virút giống sản xuất sau 5 lần cấy chuyển từ giống gốc ñược kiểm tra hiệu quả bảo hộ.
ðối với vắcxin nhược ñộc: Sử dụng tối thiểu 10 gà sạch bệnh 3 – 4 tuần tuổi, sử dụng vắcxin theo ñường nhỏ mắt hoặc nhỏ mũi mỗi con 1 liều vắcxin. 10 gà ñối chứng cùng nguồn gốc, cùng lứa tuổi không sử dụng vắcxin, ñược nuôi cách ly làm ñối chứng. Sau 3 – 4 tuần, công thử thách cường ñộc cả hai nhóm gà với liều 103,0 – 103,5 EID50 chủng M-41 theo ñường nhỏ mũi hoặc nhỏ mắt. 4 – 5 ngày sau khi thử thách cường ñộc, dùng tăm bông ngoáy dịch khí quản cho vào 3 ml dung dịch nước thịt có bổ sung kháng sinh. Mỗi dung dịch ñược kiểm tra bằng cách: gây nhiễm vào 5 trứng gà có phôi ấp 9 – 11 ngày tuổi, mỗi quả 0,2 ml. Một kiểm tra thay thế là lấy mẫu của những gà giết ở thời ñiểm 4 – 6 ngày sau khi thử thách cường ñộc và kiểm tra vi thể vòng khí quản về nhu ñộng của lông rung. Nếu có chủng cường ñộc tồn tại nó sẽ chỉ ra sự mất nhu ñộng của lông rung trên diện rộng.
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………21
− Ít nhất 90% số gà ñã sử dụng vắcxin không xác ñịnh sự có mặt của virút IB
trong khí quản.
− Trong khi ñó ≥ 80% số gà ñối chứng (không sử dụng vắcxin) ñã xác ñịnh ñược sự có mặt của virút.
ðối với vắcxin vô họat sử dụng bảo vệñàn gà ñẻ: Sử dụng 30 gà sạch bệnh chủng vắcxin với liều khuyến cáo ở lứa tuổi cho phép sớm nhất. Nếu ñàn gà ñó ñã ñược miễn dịch sơ cấp với một loại vắcxin nhược ñộc, thì bố trí thí nghiệm thêm một nhóm gà chỉ có miễn dịch sơ cấp với vắcxin nhược ñộc. Trong cả hai trường hợp, miễn dịch sơ cấp này không ñược tiến hành muộn hơn 3 tuần tuổi. Vắcxin vô họat ñược sử dụng ở thời ñiểm 4 – 6 tuần sau khi có miễn dịch sơ cấp với vắcxin nhược ñộc. Một nhóm 30 gà khác không sử dụng vắcxin làm ñối chứng. Tất cả các nhóm ñược nuôi cách ly cho ñến thời ñiểm 4 tuần trước khi ñạt sản lượng trứng cao nhất, sau ñó cho nuôi cùng nhau. Trứng của từng cá thể ñược theo dõi ghi chép ñầy ñủ. Tất cả số gà trên ñược công cường ñộc bằng chủng cường ñộc. Sản lượng trứng ñược ghi chép cụ thể ñến 4 tuần sau khi công cường ñộc. Sự công cường ñộc làm sản lượng trứng giảm một cách rõ rệt sau 3 tuần.
Vắcxin ñạt tiêu chuẩn khi:
− Nhóm ñối chứng có sự giảm sản lượng trứng ít nhất là 67%.
− Nhóm ñã có miễn dịch sơ cấp bằng vắcxin nhược ñộc sau ñó sử dụng vắcxin vô
họat sản lượng trứng bình thường.
− Nhóm chỉ sử dụng miễn dịch sơ cấp không sử dụng vắcxin vô họat sản lượng
trứng ở mức trung gian giữa hai nhóm trên.
− 4 tuần sau khi công cường ñộc, huyết thanh của toàn bộ số gà trên ñược kiểm tra
kháng thể, không có ñáp ứng miễn dịch ở nhóm ñối chứng.
Vắcxin IB vô họat sử dụng bảo vệñàn gà chống lại thể bệnh ñường hô hấp: Sử dụng 20 gà sạch bệnh 4 tuần tuổi sử dụng vắcxin theo liều khuyến cáo, 20 gà ñối chứng cùng nguồn gốc và lứa tuổi ñược nuôi ở các ñiều kiện như nhau. Sau 4 tuần sử dụng vắcxin, kiểm tra hiệu giá kháng thể của gà và tiến hành thử thách với liều
Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………22
cường ñộc 103CID50. Sau khi thử thách cường ñộc 4 – 7 ngày, giết gà thu hoạch khí quản kiểm tra nhu ñộng lông rung khí quản.
Vắcxin ñạt tiêu chuẩn khi:
− Ít nhất 80% số gà ñối chứng không sử dụng vắcxin bị phá hủy lông rung khí
quản hoàn toàn (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
− Ít nhất 80% số gà ñã sử dụng vắcxin không bị ảnh hưởng.
Ở nhiều quốc gia, virút IB thường ñược sử dụng kết hợp với virút gây bệnh Newcastle, virút gây bệnh Gumboro, Reovirus và virút gây hội chứng giảm ñẻ của gà (EDS76) ñể chế tạo các loại vắcxin ña giá. Hiệu quả của các thành phần trong các vắcxin ña giá này phải ñược thiết lập riêng cho từng loại sau ñó mới kết hợp chúng lại với nhau.