- ðð i iề ều utt rr aa tt ỡ ỡn nh hh hỡ ỡn nh hb bệ ện nh hh hộ ộo ox xa ann hv vi ik kh hu uẩ ẩn n( (R R ss oo lla ann aa cc ee aar ru um m) ) tt rr ờ ờn nm mộ ột ts số ốc y t
3. .4.4 2 2 N Nh hữ ữn ng gn ng gh hi iờ ờn nc cứ ứu ut tr ro on ng gp ph hũ ũn ng gt th hớ ớn ng gh hi iệ ệ mm
4.3.2. Ảnh hưởng của mụi trường nuụi cấy ủến sự phỏt triển của cỏc dũng vi khuẩn phõn lập
khuẩn phõn lập
ðể nghiờn cứu ảnh hưởng của mụi trường dinh dưỡng ủến sự phỏt triển của khuẩn lạc của cỏc dũng vi khuẩn phõn lập. Chỳng tụi chọn ủại diện cỏc dũng vi khuẩn gõy hại trờn cỏc cõy trồng ủó ủược phõn lập ủể nghiờn cứu: dũng vi khuẩn ủược phõn lập trờn cà chua (Gia Viễn, Ninh Bỡnh), cà phỏo (Hưng Hà, Thỏi Bỡnh), khoai tõy (Tõn Lạc, Hũa Bỡnh), lạc (Ba Vỡ, Hà Tõy), mướp ủắng (Kim Bụi, Hũa Bỡnh), thuốc lỏ (Ba Vỡ, Hà Tõy), ớt (Thuận Thành, Bắc Ninh). Mụi trường chỳng tụi sử dụng là mụi trường SPA và mụi trường TZC.
Chỳng tụi nhận thấy, cỏc dũng vi khuẩn R. solanacearum phõn lập ủược từ 7 cõy ký chủ ủều phỏt triển tốt trờn 2 mụi trường (bảng 4.13 và ủồ thị 4.7).
Bảng 4.13. Ảnh hưởng của mụi trường dinh dưỡng ủến sự phỏt triển của khuẩn lạc của cỏc dũng vi khuẩn phõn lập
ðường kớnh khuẩn lạc trờn cỏc mụi trường nuụi cấy (mm) Sau 24 giờ nuụi cấy Sau 48 giờ nuụi cấy Sau 72 giờ nuụi cấy Mẫu
phõn
lập SPA TZC SPA TZC SPA TZC
CC3 1,84±0,07 1,83±0,11 4,97±0,08 4,95±0,08 6,53±0,08 6,510,09 CP 1,66±0,10 1,52±0,08 4,83±0,07 4,82±0,07 6,47±0,10 6,45±0,10 KT1 1,91±0,11 1,88±0,09 4,99±0,07 4,97±0,09 6,54±0,08 6,49±0,09 L 1,86±0,09 1,85±0,07 4,93±0,05 4,91±0,08 6,51±0,09 6,48±0,09 Mð 1,87±0,10 1,85±0,06 5,00±0,06 4,97±0,08 6,54±0,08 6,49±0,08 TL 1,69±0,08 1,54±0,08 4,84±0,07 4,82±0,07 6,48±0,06 6,45±0,09
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ………58 O1 1,69±0,08 1,76±0,07 4,86±0,07 4,86±0,10 6,47±0,09 6,43±0,10 4.7 4.75 4.8 4.85 4.9 4.95 5 5.05 SPA TZC Môi tr−ờng (mm) CC3 CP KT1 L MD TL O1
Đồ thị 4.7. Ảnh hưởng của mụi trường TZC và mụi trường SPA ủến sự phỏt triển của khuẩn lạc của cỏc dũng vi khuẩn sau 48 giờ nuụi cấy
Kết quả nghiờn cứu ảnh hưởng của mụi trường dinh dưỡng ủến sự phỏt triển của khuẩn lạc của cỏc dũng vi khuẩn phõn lập ủược cho thấy, cỏc dũng vi khuẩn phõn lập trờn cỏc cõy cà chua, cà phỏo, khoai tõy, lạc, mướp ủắng, thuốc lỏ, ớt ủều phỏt triển rất tốt trờn 2 mụi trường SPA và TZC. Trờn mụi trường SPA, khuẩn lạc trũn, nhẵn búng lồi lờn trờn bề mặt mụi trường. Trờn mụi trường TZC, khuẩn lạc trũn, hoặc hỡnh dạng khụng ủều, nhày, rỡa màu trắng trong, tõm phớt hồng.
Trong cỏc dũng vi khuẩn phõn lập ủược chỳng tụi nhận thấy cỏc dũng vi khuẩn phõn lập từ cà chua, khoai tõy, lạc, mướp ủắng phỏt triển mạnh hơn so với cỏc dũng vi khuẩn phõn lập từ cỏc cõy trồng thuốc lỏ, cà phỏo, ớt trờn cả 2 mụi trường. Sau 48 giờ nuụi cấy, dũng vi khuẩn phõn lập trờn cà chua ủược 4,97 mm trờn mụi trường SPA, 4,95 mm trờn mụi trường TZC; dũng vi khuẩn phõn lập
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ………59
trờn khoai tõy ủược 4,99 mm trờn mụi trường SPA, 4,97 mm trờn mụi trường TZC; dũng vi khuẩn phõn lập trờn mướp ủắng ủược 5,00 mm trờn mụi trường SPA, 4,97mm trờn mụi trường TZC. Sự phỏt triển của khuẩn lạc trờn cỏc mụi trường là khỏc nhau ủược quyết ủịnh bởi hệ men của vi khuẩn. Trờn mụi trường mà cú cỏc hợp chất dễ phõn giải thỡ vi khuẩn sẽ phỏt triển tốt hơn. Vỡ vậy, mụi trường TZC thường ủược sử dụng ủể phõn lập vi khuẩn, cũn mụi trường SPA dựng ủể nhõn sinh khối vi khuẩn. Theo kết quả theo dừi sự phỏt triển của vi khuẩn trờn 2 mụi trường SPA và TZC sau 24, 48, 72 giờ nuụi cấy chỳng tụi nhận thấy ủường kớnh khuẩn lạc vi khuẩn tăng mạnh từ 24 ủến 48 giờ ủầu nuụi cấy, sau ủú tốc ủộ phỏt triển ủường kớnh khuẩn lạc giảm dần từ 48 ủến 72 giờ sau nuụi cấỵ Nguyờn nhõn là do từ 24 ủến 48 giờ là giai ủoạn vi khuẩn phỏt triển theo cấp số nhõn, lỳc này tế bào vi khuẩn phõn chia cực nhanh, nhưng từ 48 ủến 72 giờ trở ủi, do cỏc chất dinh dưỡng giảm và cú sự tớch tụ của một số chất ức chế trong quỏ trỡnh sử dụng chất dinh dưỡng vi khuẩn tạo ra trong mụi trường nờn tốc ủộ phỏt triển của vi khuẩn chậm dần lạị Dũng vi khuẩn trờn khoai tõy trờn mụi trường SPA và TZC sau 24, 48 và 72 giờ nuụi cấy tăng kớch thước lần lượt là trờn SPA từ 1 -24 giờ là 1,91mm, từ 24 - 48 giờ là 3,08 mm, từ 48 – 72 giờ là 1,55. Trờn mụi trường TZC từ 1 – 24 giờ là 1,88, từ 24 – 48 giờ là 3,09, từ 48 – 72 giờ là 1,52.
Nhiệt ủộ cũng là một trong những yếu tố ảnh hưởng rất lớn ủến sự phõn bố cũng như sự phỏt sinh, phỏt triển gõy hại của bệnh hộo xanh vi khuẩn. Vỡ vậy, chỳng tụi ủó tiến hành nghiờn cứu ảnh hưởng của nhiệt ủộ ủến sự phỏt sinh, phỏt triển của cỏc dũng vi khuẩn phõn lập.