Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 46
2.4.1. Thu thập thông tin qua tài liệu của cán bộ kỹ thuật thú y, chăn nuôi tại các cơ sở nghiên cứu.Tài liệu theo hồ sơ nhập khẩu của Trạm kiểm dịch ựộng vật Nội Bài,Trung tâm chẩn ựoán thú y Trung ương.
2.4.2. điều tra, nghiên cứu các bệnh truyền nhiễm trên ựàn gà nhập khẩu tại một số cơ sở.
2.4.3. Xác ựịnh tỉ lệ mắc CRD, Salmonellosis, Newcastle, Gumboro, hội chứng giảm ựẻ, cúm gia cầm thông qua triệu trứng lâm sàng, dịch tễ và mổ khám.
Σ số con mắc bệnh Tỉ lệ mắc bệnh (%) =
Σ số con mổ khám
x 100
2.4.4. Nghiên cứu, xác ựịnh hiệu giá kháng thể trung bình và sự có mặt của virut cúm gia cầm chủng H5N1.
* Phản ứng RT- PCR
- Chiết tách RMA bằng TRIZOL
+ Cho 0,75 ml TRIZOL LS vangen (hoặc 1 ml TRIZOL reagent)+ 0,25 ml dịch bệnh phẩm vào ống 1,5 ml lắc ựều ựểở nhiệt ựộ phòng 5 phút
+ Thêm 0,2ml chlozojozm vào mỗi ống, lắc mạnh trong 15 giây ựể ở nhiệt
ựộ phòng 5 phút
+ Ly tâm ống ở tốc ựộ 12000g trong 15 phút ở 40C
+ Chuyển phần nước (khoảng 500ml) sang ống microtube mới.
+ Thêm 0,5 ml Isopropanol và lắc ựều ựể 5- 10 phút ở nhiệt ựộ phòng. + Ly tâm ống ở tốc ựộ 10000g trong 5 phút ở 40C. Bỏ dung dịch trong ống
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 47
+ Rửa ARN ựóng ở ựáy ống băng cồn 80% lắc mạnh và li tâm với tốc ựộ
10.000g trong 5 phút ở 40C.
+ Bỏ dung dịch trong ống và làm khô ARN 10 phút ở nhiệt ựộ phòng và hoà tan lại với 30ml nước cất không có R nase hoặc nước cất ựã ựược xử lý DEPC.
- Tiến hành phản ứng RT- PCR
- Chú ý khi dùng PCR phải có mẫu ựối chứng dương và ựối chứng âm ựi kèm mẫu ựối chứng âm tắnh có thể là nước cất sạch)
- đọc kết quả
+ Mẫu dương tắnh: xuất hiện vạch giống với mẫu ựối chứng dương tắnh + Mẫu âm tắnh: không có vạch
- đánh giá kết quả: Có Virut cúm hoặc virut cúm thuộc subtyp nào dựa vào prime chạy mẫu.
* Phân lập virut trên phôi gà
Phân lập virut từ dịch ổ nhớp, dịch hầu họng, bệnh phẩm bằng cách tiêm vào túi niệu phôi gà 9 Ờ 11 ngày tuổi
- Tiêm tuyền trên phôi gà
+ đặt trứng lên khung, xoay buồng hơi lên phắa trên + Sát trùng vỏ trứng và ựục lỗ trên buồng hơi.
+ Dùng syringer tiêm truyền bệnh phẩm theo lỗ ựã ựục vào túi niêụ lượng 0,1 Ờ 0,2 ml huyễn dịch/trứng. Mỗi mẫu bệnh phẩm tiêm 3 trứng.
+ gắn lỗ tiêm bằng keo gắn vỏ trứng hoặc parafin + ấp trứng 370C trong 7 ngày
- Thu hoạch nước trứng.
+ Cất trứng vào tủ lạnh 40C trong 4 giờ hoặc ựể trong tủ âm -200C trong 30 phút dùng panh nẹp hoặc kéo nhỏ mở nắp trứng phắa buồng hơi.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 48 + Bảo quản nước trứng ựã thu hoạch ựược trong tủ âm Ờ 700C
+ Mẫu ựã phân lập ựược kiểm tra bằng phản ứng HA. Nếu âm tắnh có thể
cấy chuyển trên phôi gà thêm 2- 3 lần - Phản ứng ngưng két hồng cầu (HA)
Phản ứng HA dùng ựể chuẩn ựộ kháng nguyên chuẩn H5 và kháng nguyên (là virut) phân lập từ bệnh phẩm, dùng ựĩa làm phản ứng ngưng kết ựóng chữ
Vgồm 12 cột và 8 hàng. + Tiến hành phản ứng
Cho 25 ộl PBS (pH 7,2) vào tất cả các giếng.
Cho 25 ộl kháng nguyên chuẩn hoặc kháng nguyên phân lập vào các giếng từ A1 Ờ H1
Pha loãng bậc 2 kháng nguyên kiểm tra chuyển 25 ộl từ giếng 1 ựến giếng 11 rồi bỏựi 25 ộl.
Cột 12 dòng ựối chứng chỉ chứa 25 ộl PBS và 25 ộl hồng cầu gà 1%. Cho 25 ộl hông càu gà 1% vào các giếng phản ứng.
Lắc nhẹ tay hoặc bằng máy, ựể ở nhiệt ựộ trong phòng 30 phút, ựọc kết quả
phản ứng (-) hồng cầu lắng ựều dưới ựáy.
Phản ứng (+): xảy ra hiện tượng ngưng kết, hồng cầu ngưng kết thành cụm lấm tấm xung quanh giếng.
đọc hiệu giá ngưng kết: Hiệu giá ngưng kết kháng nguyên ựược ựánh giá ở ựộ pha loãng cao nhất còn có phản ứng ngưng kết xảy ra.
- Phản ứng HI Nguyên liệu
+ Kháng nguyên chuẩn kháng nguyên là virut cúm subtyp V5 chuẩn pha kháng nguyên H5 cho phản ứng HI là 4 ựơn vị HA/25ộl.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 49
+ Hồng cầu: Hỗn dịch hồng cầu 1% ựược chuẩn bị từ hồng cầu gà trống trưởng thành không có kháng thể cúm và Newcastle ựược lấy máu ở tĩnh mạch cánh bằng seringer 5 ml có chứa 1 ml Natri Citrat 5%.
Rửa hồng cầu: Cho PBS (pH 7,2) vào ống ly tâm chứa hồng cầu lắc nhẹ. Ly tâm 1000-1500 vòng/ phút trong 10 phút. đổ bỏ huyết tương ở trên cho PBS rửa hồng cầu tiếp 2-3 lần ựến khi dung dịch ở phắa trên trong là ựược.
Pha hồng cầu 0,5%: đổ bỏ nước trong ở trên lấy 1 ml hồng cầu cho vào 99 ml PBS lắc ựều. Bảo quản ở 40C, 4-5 ngày.
+ Huyết thanh: huyết thanh làm phản ứng ựược chắt từ mẫu máu bảo quản
ở 4-80C
- Phản ứng ngăn trở ngưng két hồng cầu HI.
Nhỏ 25 ộl PBS vào các giấy ựóng chữ V của ựĩa 96 giếng nhỏ tiếp 25 ộl huyết thanh vào giếng ựầu tiên.
Pha loãng huyết thanh: theo cơ sở 2 bằng cách chuyển 25 ộl huyết thanh từ giếng 1 sang giếng 2 và tuần tựựến giếng 11 rồi bỏựi 25 ộl cuối cùng.
Nhỏ 25 ộl kháng nguyên 4HA ựã chuẩn bị vào các giếng từ giếng 1 ựến giếng 11. Thêm 25 ộl PBS vào hàng ựối chứng hồng cầu(giếng 12)
Lắc ựĩa và ủở nhịêt ựộ phòng 30 phút
Nhỏ 25 ộl dung dịch hồng cầu 1% vào tất cả các giếng của ựĩa lắc ựều ựể ựĩa ở nhiệt ựộ phòng 40 phút
đọc kết quả: Phản ứng (+) dương tắnh nếu hồng cầu lắng xuống ựáy. Hiệu giá HI của mẫu ựược tắnh ởựộ pha loãng huyết thanh cao nhất còn có hiện tượng ức chế
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 50
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Kết quả nghiên cứu ựiều tra tình hình nhập khẩu, sự phân bổ các loại gà tại ba cơ sở chăn nuôi:
Bảng 3.1: Tình hình nhập khẩu gà giống bố mẹ qua cửa khẩu Nội Bài nuôi tại ba cơ sở chăn nuôi: Phúc thịnh - Lạc Vệ - Lương Mỹ:
Năm giống gà 2005 2006 2007 Tổng số 3 năm ISA trắng 15688 0 0 15688 ISA màu 15255 11982 6708 33945 Hyline 8470 0 0 8470 Goldline 0 13890 9945 23835 Hubbar 31200 16002 7203 54405 Lương phượng 34847 12470 12027 59344 SASSO 1634 0 0 1634 Babcock 9936 6844 38343 55123 ROSS 308 43624 49884 65224 158732 Redbro 0 0 22448 22448 Tổng số 160654 111072 161898 433624 Qua bảng trên chúng tôi nhận thấy xu thế số lượng gà giống nhập khẩu theo chiều hướng tăng dần, ựiều này cho thấy các cơ sở chăn nuôi ngày càng mở
rộng quy mô chăn nuôi và khẳng ựịnh nhu cầu của thị trường Việt nam ựòi hỏi ngày càng lớn về chất lượng, số lượng con giống. Tổng số gia cầm nhập khẩu về nuôi tại ba cơ sở nghiên cứu là 433624 con.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 51
để minh họa thêm số liệu gà giống bố mẹ nhập khẩu trong 3 năm 2005- 2006-2007, chúng tôi thể hiện qua biểu ựồ sau:
160654 111072 161898 0 20000 40000 60000 80000 100000 120000 140000 160000 180000 Năm 2005 Năm 2006 Năm 2007 S Ô L Ư Ơ N G G À G IÔ N G N K
Bảng 3.2: Sự phân bổ các giống gà nhập khẩu trong 3 năm (2005-2006-2007) tại ba cơ sở chăn nuôi.
Nghiên cứu sự phân bổ giống gà nhập khẩu vào nuôi tại các cơ sở Phúc thịnh - Lạc vệ - Lương Mỹ, chúng tôi có bảng sau:
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 52 Cơ sở chăn nuôi giống gà Phúc Thịnh Lạc Vệ Lương Mỹ Tổng số 3 cơ sở ISA trắng 8692 6996 0 15688 ISA màu 0 20477 13468 33945 Hyline 8470 0 0 8470 Goldline 23835 0 0 23835 Hubbar 46397 0 8008 54405 Lương phượng 0 59344 0 59344 SASSO 1634 0 0 1634 Babcock 0 4659 50464 55123 ROSS 308 16750 51014 90968 158732 Redbro 0 22448 0 22448 Tổng số 105778 164938 162908 433624 Trong ba năm 2005 Ờ 2006 Ờ 2007, số lượng gà giống nhập khẩu về Việt nam là rất phong phú, có tới 10 giống gia cầm nhập khẩu với nhiều chủng loại như: ISA trắng, ISA màu,...
Tổng số lượng trong 3 năm là 433624 con gà giống bố mẹ, trong ựó Công ty Cổ
phần Phúc thịnh là: 105778 con; Xắ nghiệp Giống gia cầm Lạc vệ là: 164938 con; Công ty Cổ phần Lương mỹ là: 162908 con.
Bảng 3.3. Phân bổ tỷ lệ các loại gà nhập khẩu so với tổng số gà nhập khẩu của 3 cơ sở từ năm 2005-2007.
Nghiên cứu ựiều tra tình hình nhập khẩu gà giống của 3 cơ sở, chúng tôi có bảng số lịêu sau:
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 53 Phúc thịnh Lạc vệ Lương Mỹ Loại gà Tổng số gà trong 3 năm Tỷ lệ %/tổng ựàn Tổng số gà trong 3 năm Tỷ lệ %/tổng ựàn Tổng số gà trong 3 năm Tỷ lệ %/tổng ựàn ISA trắng 8692 8,21 6996 4,24 0 0 ISA màu 0 0 20477 12,41 13468 8,26 Hyline 8470 8,0 0 0 0 0 Goldline 23835 22,53 0 0 0 0 Hubbar 46397 43,86 0 0 8008 4,91 Lương phượng 0 0 59344 35,97 0 0 SASSO 1634 1,54 0 0 0 0 Babcock 0 0 4659 2.82 50464 30,97 ROSS 308 16750 15,83 51014 30,92 90968 55,84 Redbro 0 0 22448 13,6 0 0 Tổng số 105778 100 164938 100 162908 100 Theo bảng trên chúng tôi nhận thấy:
- đối với Công ty Cổ phần Phúc thịnh, tỷ lệ phần trăm của các giống gà trên tổng ựàn trong 3 năm như sau:
+ Giống gà ISA trắng là 8,21% + Giống gà Hyline là 8,00% + Giống gà Goldline là 22,53% + Giống gà Hubbar là 43,86% + Giống gà SASSO là 1,54% + Giống gà ROSS 308 là 15,83% - đối với Xắ nghiệp Giống gia cầm Lạc Vệ, tỷ lệ phần trăm của các giống gà trên tổng ựàn trong 3 năm như sau:
+ Giống gà ISA trắng là 4,24% + Giống gà ISA màu là 12,41% + Giống gà Lương phượng là 35,97% + Giống gà Babcock là 2,82%
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 54 + Giống gà ROSS 308 là 30,92%
+ Giống gà Redbro là 13,6%
- đối với Công ty Cổ phần Lương Mỹ, tỷ lệ phần trăm của các giống gà trên tổng
ựàn trong 3 năm như sau:
+ Giống gà ISA màu là 8,26% + Giống gà Hubbar là 4,91% + Giống gà Babcock là 30,97% + Giống gà ROSS 308 là 55,84%
Bảng 3.4. Nguồn gốc các giống gà bố mẹ nhập khẩu vào Việt nam nuôi tại ba cơ sở Phúc Thịnh - Lạc vệ - Lương Mỹ trong ba năm (2005 - 2006- 2007).
Nước
giống gà
Pháp Anh Hà Lan Úc Trung
quốc ISA trắng 8692 6996 0 0 0 ISA màu 20477 7436 6032 0 0 Lương phượng 0 0 0 0 59344 Hubbar 54405 0 0 0 0 SASSO 1634 0 0 0 0 ROSS 308 37208 107718 0 13806 0 Redbro 22448 0 0 0 0 Goldline 8040 5850 9945 0 0 Hyline 0 8470 0 0 0 Babcock 48279 0 6844 0 0 Tổng số 201183 136470 22821 13806 59344
Trong quá trình ựiều tra nghiên cứu, chúng tôi nhận thấy trong số lượng giống nhập khẩu vào Việt nam có ựến 10 loại khác nhau, nhưng nguồn gốc xuất hàng
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 55
chỉ tập trung vào một số nước có nền chăn nuôi tiến tiến. Qua bảng thu thập trên cho thấy số liệu nguồn gốc thể hiện như sau:
- Số lượng gà giống bố mẹ nhập từ Pháp nuôi tại ba cơ sở chăn nuôi Phúc thịnh - Lạc vệ - Lương Mỹ là: 201183 con.
- Số lượng gà giống bố mẹ nhập từ Anh là: 136470 con. - Số lượng gà giống bố mẹ nhập từ Hà lan là: 22821 con. - Số lượng gà giống bố mẹ nhập từ Úc là: 13806 con
- Số lượng gà giống bố mẹ nhập từ Trung quốc là: 59344 con.
để minh họa thêm bảng số liệu trên, chúng tôi lập biểu ựồ sau:
3.2. Kết quả ựiều tra nghiên cứu tại Công ty Cổ phần Phúc thịnh:
3.2.1 Cơ cấu ựàn gà giống nhập khẩu tại Công ty Cổ phần Phúc thịnh:
Công ty Cổ phần Phúc thịnh ựược thành lập dựa trên cơ sở chăn nuôi là Xắ nghiệp gà Phúc thịnh. Nằm trên ựịa bàn huyện đông anh Thành phố Hà nội, Công ty là nơi sản xuất con giống và thức ăn chăn nuôi lớn, cung cấp con giống và thức
ăn chăn nuôi phục vụ cho người chăn nuôi trên ựịa bàn và trên cả nước.
201183 136470 22821 13806 59344 0 50000 100000 150000 200000 250000
Pháp Anh Hà lan Úc Trung Quôc
S Ô L Ư Ơ N G G À G IÔ N G N K
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 56
Công ty ựã áp dụng nhiều tiến bộ khoa học vào sản xuất, nhập khẩu gà giống tốt, cao sản vào Việt nam và ựã phổ biến ở thị trường trong nước, các giống gà thường ựược nuôi tại Công ty là ISA hyline, goldline, Hubbar, SASSO, ROSS 308ẦCác ựàn gà nhập khẩu ựược nuôi trong những chuồng nuôi thoáng mát, sạch sẽ, nguồn nước dồi dào, có hệ thống ựiện ựầy ựủ. Thức ăn ựược sản xuất trên dây truyền sản xuất của Công ty và ựược tắnh toán cân ựối, phù hợp với từng giai
ựoạn phát triển của ựàn gà.
Do Công ty nằm trên ựịa bàn thành phố Hà nội, nơi có nhu cầu về con giống tốt, chất lượng thịt gà thương phẩm phải cao, ựảm bảo sạch bệnh ựể phục vụ cho người tiêu dùng của thủựô. Công ty ựã chọn một số giống tốt phù hợp cho việc sản xuất thịt, trứng cho người tiêu dùng. Kết quả thu thập số liệu về tình hình chăn nuôi của Công ty ựược thể hiện ở bảng 3.5.
Theo kết quả ựiều tra của Bảng 3.5 cho thấy số lượng gà bố mẹ nuôi tại Công ty trong năm 2005 là 47500 con, năm 2007 là 25552 con, ựiều này cho thấy số lượng gà có chiều hướng giảm ựi. điều này giải thắch là Công ty ựang cơ cấu lại ựàn gia cầm lựa chọn thử nghiệm một số giống mới, do vậy giống ISA trắng và Hyline không thấy xuất hiện trong cơ cấu ựàn nuôi tại Công ty trong năm 2007. Các giống mới như Goldline, Hubbar, ROSS 308 ựược ựưa vào số lượng tương ựối lớn, trong ựó Goldline là 9945 con chiếm tỷ lệ 38,92%, Hubbar là 7203 con chiếm tỷ lệ 28,18%, ROSS là 8404 con chiếm tỷ lệ 32,9%.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ẦẦẦ 57
Bảng 3.5. Kết quả ựiều tra cơ cấu ựàn gà bố mẹ nuôi tại Công ty Cổ phần Phúc Thịnh trong 3 năm (2005-2006-2007)
2005 2006 2007
Năm Giống
Số lượng Tỷ lệ % Số lượng Tỷ lệ % lượng Số Tỷ lệ %
Tổng số (con) Tỷ lệ trung bình (%) ISA trắng 8692 18.29 0 0 0 0 8692 8.21