Các tác giả Byung Jooon Ahn, Yuong Hee Juong, Kathryn K.Kamo, 2004 ựó nghiên cứu chuyển gen bằng sung bắn gen cho huyền phù tế bào của hoa Easter lily, Lilium longiflorum và ựưa ra kết luận: Sử dụng hạt vàng cho sự biểu hiện của gen uidA cao hơn so với hạt bằng tungsten. Tiền xử lý dung dịch huyền phù tế bào trước 3 giờ bằng osmoticum (0,125M) cho hiệu quả
biểu hiện của uidA tăng 1,5 lần. Sử dụng áp lực 1550psi, khoảng cách 6cm có kết quả tốt nhất so với các áp lực 1100, 1200, 1800psi. Sự biểu hiện tạm thời của uidA xuất hiện ở 493 tế bào/ựĩa Petri. để chuyển gen bền vững, huyền phù tế bào của Limium longiflorum ựược bắn với plasmid bao gồm cucumber mosaic virus ( CMV) replicase ựược ựiều khiển bởi Act 1 promoter và gen bar ựó ựược ựiều khiển bởi CaMV promoter. 10 cây tái sinh ựó ựược phân tắch bởi PCR, 2 trong 10 cây ựó ựược khẳng ựịnh chuyển gen nhờ lai Southern. 2 cây chuyển gen ựược chuyển ựộc lập trong ựó có 1 cây mang gen bar, 1 cây mang cả hai gen bao gồm CMV replicase và bar gen. Các cây này
ựó ựược xác ựịnh là có khả năng kháng PPT ở nồng ựộ 1000mg/l ở giai ựoạn nở hoa chứng tỏ gen bar ựó ựược biểu hiện ở toàn bộ là khi ựược ựiều khiển bởi CaMV 35S promoter.
Các tác giả Y. Hoshi, M.Kondo, S.Mori, Y.Adachi, M.Nakano, H.Kobayashi, 2004 ựã nghiên cứu hệ thống tạo cây chuyển gen nhờ vi khuẩn
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệpẦẦẦ 28
kháng Hyg từ hơn 200 callus bằng cách làm tổn thương callus với giấy giáp trước khi ựồng nuôi cấy callus ựược ựồng nuôi cấy trên môi trường MS không có NH4NO3 sử dụng Hyg trong môi trường chọn lọc. Các dòng tái sinh kháng Hyg tạo chồi sau ựó phát triển thành cây khi chuyển sang môi trường MS không bổ sung chất ựiều tiết sinh trưởng. Tất cả các cây ựược kết luận chuyển gen nhờ GUS histochemical assay và phân tắch inverse PCR.
Sakae SUZUKI và Masaru NAKANO, 2002 cũng công bố kết quả
nghiên cứu chuyển gen nhờ vi khuẩn A.tumefaciens cho 3 giống cây thuộc họ
Liliace, Lilium formosanum, Agapanthus praecox ssp. Orientalis và Muscarri armeniacum. Kết quả nghiên cứu ựã không thu ựược mô chuyển gen trên giống Lilium formosanum mặc dù có sự biểu hiện tạm thời của gen gus trong callus trong quá trình ựồng nuôi cấy. Tuy nhiên, ựó thu ựược một số cụm tế
bào có kháng hygromycin của giống Agapanthus praecox ssp. Orientalis và Muscarri armeniacum trên môi trường có bổ sung hygromycin. Callus kháng hygromycin ựã tái sinh tạo cây hoàn chỉnh qua phôi soma, hầu hết trong số
chúng ựược xác ựịnh là cây chuyển gen dựa trên phép thử GUS histochemical assay và phân tắch PCR. Bằng lai Southern ựó phát hiện ựược 1- 5 copy của gen trong bộ gen của cây chuyển gen của 2 giống trong ựó hầu hết là có 1 hoặc 2 copy. Hệ thống chuyển gen vào Muscarri armeniacum và Agapanthus
praecox ssp. Orientalis có thể là một công cụ ựể phát triển trong nghiên cứu về sinh học phân tử.
Công trình nghiên cứu của các tác giả A.Mercuri, L.de Benedetti, S. Bruna, R. Begliano, C.Bianchini, G.Foglia,T.Schiva cho thấy có thể chuyển gen cho Limium longiflorum Thunb giống Ộ Snow QueenỢ. Callus phát sinh phôi xuất phát từ vũi nhụy và cuống ựó ựược cấy và ựồng nuôi cấy trong 7 ngày với huyền phù của vi khuẩn Agrobacterium LBA4404 mang binary
vecto pBin19 bao gồm nptII gen ựược ựiều khiển bởi nos promoter và các
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệpẦẦẦ 29
B và C ựược cắt từ Agrobacterium rhizogenes pRi 1855. Các chồi chuyển gen
ựó ựược tái sinh trên môi trường chọn lọc và dễ dàng nhân nhanh, ra rễ và chuyển ra ựất. Có sự ựa dạng về kiểu hỡnh của cỏc dũng chuyển gen. A. Lipsky, A.Cohen, R.Barg, S. Shabtai, Y. Salts, V. Gaba, K.Kamo, A.Gera và A.Watad cũng ựó tạo ựược cây chuyển gen bền vững cho Lilium longiflorum
Thunb. Callus xuất phát từ vảy củ có ựộ ựồng ựều thấp sau 6 tháng cấy chuyển. Nghiên cứu chuyển gen ựó ựược thực hiện bằng sử dụng thiết bị bắn gen Finer-type bombardment trên callus có 3 hoặc 10 tháng ựược duy trì trong mụi trường lỏng ở ựiều kiện bong tối. Các hạt vàng ựược bọc với plasmid pUBQ3genGUS bao gồm gen uidA ựược ựiều khiển bởi UBQ3 promoter. Callus nuôi cấy trên môi trường lỏng cho phép thu ựược cây chuyển gen bền vững cao hơn từ 50-70 lần so với môi trường ựặc. đó thu
ựược 10 cây chuyển gen bền vững của Lilium longiflorum Thunb. Cv. Snow Queen. Gần ựây nhất, các tác giảựó sản xuất ựược hang trăm cây chuyển gen khác nhau sử dụng pCAMBIA2301 bao gồm gen rol B dưới sựựiều khiển của Lat 52 promoter ựể chống lại sự phát triển của phấn hoa. Gen gus ựó ựược biểu hiện rất mạnh trong các cây chuyển gen. Các phân tắch về gen của những cây này ựang ựược tiến hành.