Phõn lập giỏm ủịnh nấm bệnh dựa theo Lester, W. Burgess và cs., 2001
[15], Nguyễn Văn Tuất, 1997 [26]; Nguyễn Văn Tuất, 2002 [28]; H.L. Barnett và Barry B. Hunter 1998 [35]; Lester, W. Burgess và cs., 2008 [66].
* Mụi trường WA (Water Agar)
Thành phần: Agar 20 gam, nước cất 1000ml.
Cụng dụng: là mụi trường sử dụng ủể phõn lập nấm ban ủầu từ mụ cõy bệnh, do nghốo dinh dưỡng nờn ớt bị lẫn tạp.
* Mụi trường PSA (Potato Sacaro Agar)
Thành phần: Khoai tõy 250 gam, ủường Sacaro 20 gam, Agar 20 gam, nước cất 1000 ml.
Trường ðại học Nụng nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nụng nghiệp ………48 Cụng dụng: Mụi trường PGA dựng ủể cấy truyền nấm sau khi ủó phõn lập nấm từ mụi trường WẠ
* Mụi trường PGA (Potato Glucose Agar)
Thành phần: Khoai tõy 250 gam, ủường Gluco 20 gam, Agar 20 gam, nước cất 1000 ml.
Cụng dụng: Mụi trường PGA dựng ủể cấy truyền nấm sau khi ủó phõn lập nấm từ mụi trường WẠ
- Lấy mẫu bệnh: Lấy bộ phận bị bệnh, ủối với những bệnh do nấm
Rhizoctonia, Sclerotium rolfsii lấy cả cõy và giữ cho mẫu tươi, mẫu lấy cú cả phần khỏe, mẫu chớm bị bệnh và mẫu nhiễm bệnh nặng dựa vào triệu chứng vết bệnh.
- Phõn lập: Lấy cỏc mẫu bệnh cú triệu chứng ủiển hỡnh, rửa sạch dưới vũi nước, khử trựng bề mặt mụ bệnh bằng cồn Ethanol 70% trong vũng 1 - 2 phỳt, rửa lại bằng nước cất vụ trựng, dựng giấy thấm vụ trựng thấm khụ mụ bệnh, cắt mụ bệnh thành cỏc mẩu nhỏ (2mm) ủặt trờn mụi trường WA 2% quan sỏt sự phỏt triển của nấm hàng ngàỵ Khi sợi nấm phỏt triển 1-2 cm dựng que cấy, ủĩa khử trựng cắt phần ủỉnh sợi nấm cấy truyền sang mụi trường PSA, hay mụi trường PGA, nấm sau khi cấy lờn ủĩa mụi trường ủược ủặt trong ủiều kiện 12 giờ sỏng xen kẽ 12 giờ tối [26].
- Giỏm ủịnh: Chỳng tụi dựng kớnh hiển vi ủể quan sỏt xỏc ủịnh nấm bệnh dựa vào ủặc ủiểm hỡnh thỏi, tài liệu phõn loại quốc tế: Lester, W. Burgess và cs., 2001 [15], Vũ Triệu Mõn và Lờ Lương Tề, 2001 [17], Barnett H.L. và Barry B. Hunter 1998 [35], CABI 2006 [37] ủến [50], Lester, W. Burgess và cs., 2008 [66].