Từ kết quả phân tích thăm dò ban đầu trên các loài cá trong các ao nuôi: cá chép 3 con, mrigal 4 con, cá rói 12 con, cá diếc 6 con, mè giống 12 con, trê 3 con, rôphi 2 con cho thấy không phát hiện thấy ấu trùng metacercaria, chỉ ở cá trắm cỏ kiểm tra 3 con có một con nhiễm metacercaria. Thêm nữa cá thả nuôi trong ao, rôhu, mè trắng là đối t−ợng nuôi chính. Do vậy nghiên cứu cảm nhiễm ấu trùng metacercaria chúng tôi chỉ tiến hành trên 2 đối t−ợng mè trắng và rôhu.
Mẫu thu để nghiên cứu ấu trùng metacercaria
Các phần của cơ thể cá đ−ợc thu để nghiên cứu mức độ cảm nhiễm ấu trùng
metacercaria là: mang, cơ và vây là những địa điểm đ−ợc đánh giá có tỷ lệ nhiễm metacercaria cao nhất. Khối l−ợng mẫu của các phần đã thu của cơ thể cá đ−ợc thu, đ−ợc trình bày trong bảng 4.7
Bảng 4.7: Khối l−ợng mẫu đ−ợc phân tích trong quá trình kiểm tra
Khối l−ợng mang (gr) Khối l−ợng cơ (gr) Khối l−ợng vây (gr) Loài cá
Min Max x ± Sx Min Max x ± Sx Min Max x ± Sx Mè trắng 2,0 10,4 4,9±2,3 7,0 34,1 13,9±7,7 0,8 9,2 3,5±2,3 Rôhu 1,7 6,1 3,6±0,7 5,2 19,1 11,3±2,4 2,0 4,4 2,9±0,8
4.2.1. Thành phần giống loài
(1) Danh mục những loại metacercaria đ−ợc tìm thấy
Quan kiểm tra đã phát hiện đ−ợc 6 loài metacercaria ký sinh chủ yếu ở các cơ quan: mang, cơ, vây của mè trắng và rôhu. Danh sách tên sán lá, tỷ lệ nhiễm, cuờng độ nhiễm và cơ quan ký sinh đ−ợc tìm thấy trên hai đối t−ợng nuôi mè trắng và rôhu đ−ợc trình bày theo bảng 4.8.
Bảng 4.8: Thành phần loài và mức độ nhiễm ấu trùng metacercaria
trong cá mè trắng và rôhu tại xã Nghĩa Lạc - Nghĩa H−ng - Nam Định
C−ờng độ nhiễm
TT Tên sán lá Vật chủ C. quan
ký sinh
Tỷ lệ
nhiễm % Min. Max. TB
vây 32,0 1 16 3,7 Mè trắng cơ 4,0 0,1 0,7 0,3 vây 10,0 1 5 2,8 1 Haplorchis taichui Nishigori, 1924 Rôhu cơ 6,9 0,1 0,3 0,2 mang 6,7 1 12 7 vây 10,7 1 40 14 Mè trắng cơ 6,7 0,1 0,3 0,2 mang 4,6 1 5 1,8 vây 7,7 1 8 2,8 2 H. pumilio Looss, 1899 Rôhu cơ 6,9 0,1 0,2 0,1 mang 5,3 1 1 1 vây 14,7 1 30 10,3 Mè trắng cơ 1,3 0,1 0,1 0,1 vây 6,9 1 7 1,9 3 H. yokogawai Kasuta, 1932 Rôhu mang 0,8 1 1 1 vây 9,3 1 10 2,6 Mè trắng cơ 2,3 0,1 0,3 0,2 vây 8,5 1 5 2,7 4 Procerovum sp Rôhu cơ 1,3 0,1 0,1 0,1 vây 5,3 1 2 1,5 Mè trắng cơ 1,3 0,1 0,1 0,1 vây 3,1 1 2 1,3 5 Exorchis sp Rôhu cơ 2,3 0,1 0,3 0,2 Mè trắng mang 10,7 1 50 14 6 Centrocestus formosanus
Nishigori, 1924 Rôhu mang 7,7 1 14 2,8
Ghi chú: C−ờng độ nhiễm trên mang, vây: ấu trùng/mang hoặc vây C−ờng độ nhiễm trên cơ: ấu trùng/gam thịt cơ
(2) Vị trí phân loại
Qua kiểm tra đã phát hiện đ−ợc 6 loài ấu trùng metacercaria đ−ợc định loại thuộc 2 bộ, 3 họ, 3 phân họ, 4 giống, 6 loài. Vị trí phân loại nh− sau:
Ngành Platthelminthes Schneider, 1873 Lớp Trematoda Rudolphi, 1808
Phân lớp Prosostomata Odhner, 1905
Bộ Fasciolata Skrjanbin et Schulz, 1937 Phân bộ Heterophyata Morosov, 1955 Họ Galactosomidae Morosov, 1950 Phân họ Haptorechirae Looss, 1899
Giống Haplorchis Looss, 1899
Loài Haplorchis taichui Nishigori, 1924 Loài Haplorchis pumilo Looss, 1899
Loài Haplorchis yokogawai Katsuta, 1932
Giốn Procerovumonji et Nishio, 1924
Loài Procervum sp.
Họ Cryptogonimidae (Ward, 1917) Ciurea, 1971 Phân họ Exorchiinae Yamaguti, 1938
Giống Exorchis Kobayashi, 1915
Loài Exorchis sp.
Bộ Opisthorchiida La Rue, 1957
Phân bộ Heterophyata Morosov, 1955 Họ Heterophyidae Odhner, 1914
Phân họ Centrocestinae Looss, 1899
Giống Centrocestus Looss, 1899
4.2.2. Vởt chủ, nơi tìm thấy và mức độ nhiễm của các loài ấu trùng
metacercaria
(1) Loài Haplorchis taichui Nishigori, 1924
ắ Vật chủ: mè trắng, rôhu ắ Nơi tìm thấy: cơ, vây
ắ Hình thái: hình elip kích cỡ 0,19 - 0,22 x 0,16 - 0,19 mm, hình bóng chày, túi sinh dục với 11-16 móc hình que, tuyến bài tiết hình chữ O, chiếm phần lớn cơ thể phía sau.
Hình 4.3: A - Hình dạng và B - Túi sinh dục Haplochis taichui Nishigori, 1924 ắ Mức độ cảm nhiễm
Trong quá trình kiểm tra không thấy H. taichui trên mang cá mè và cá rôhu, tỷ lệ nhiễm trên vây cá mè (32%) lớn hơn rôhu (10%) nh−ng tỷ lệ nhiễm trên cơ cá rôhu (6,9%) lớn hơn cơ mè trắng (4,0%). C−ờng độ nhiễm trung bình trên cơ cá mè là 0,3 ấu trùng/gam cao hơn rôhu 0,2 ấu trùng/gam và ở vây mè trắng 3,7 ấu trùng/cá thể nhiễm cũng lớn hơn cá rôhu 2,8 ấu trùng/cá thể (hình 4.4 và bảng 4.8).
0 10 20 30 40 Vây mè trắng Vây rôhu Cơ mè trắng Cơ rôhu
Hình 4.4: Mức độ cảm nhiễm Haplorchis taichui Nishigori, 1924
(2) Loài Haplorchis pumilio Looss, 1899
ắ Vật chủ: mè trắng, rôhu ắ Nơi tìm thấy: mang, cơ, vây
ắ Hình thái: hình elíp, kích cỡ 0,16 - 0,19 x 0,14 - 0,16 mm, 36 - 42 răng nhỏ xếp thành 1-2 hàng quanh vòi sinh dục bụng hoàn chỉnh, tuyến bài tiết hình chữ O và chiếm phần lớp cơ thể phía sau.
Hình 4.5: A - Túi sinh dục và B - Răng Haplorchis pumilo Looss, 1899
Tỷ lệ nhiễm (%)
Min Max TB
C−ờng độ nhiễm
ắ Mức độ cảm nhiễm
Mức độ cảm nhiễm của loài H. pumilio trên mang, cơ, vây ký sinh trên cá mè trắng và rôhu đ−ợc trình bày qua hình 4.6 và bảng 4.8. Loài H. pumilio
nhiễm trên cả 3 cơ quan kiểm tra của mè trắng và rôhu là mang, vây, cơ. Tỷ lệ nhiễm trên vây cao nhất ở mè trắng 10,7%, rôhu 7,7%, thấp nhất trên mang và cơ mè trắng (6,7%), ở mang rôhu 4,6%. C−ờng độ nhiễm trung bình trên 3 cơ quan kiểm tra (mang, cơ, vây) cá mè trắng th−ờng lớn hơn ở rôhu.
0 10 20 30 40 Mang mè trắng Mang rôhu Vây mè trắng Vây rôhu Cơ mè trắng Cơ rôhu
Hình 4.6: Mức độ cảm nhiễm Haplorchis pumilo Looss, 1899
(3) Loài Haplorchis yokogawai Katsuta, 1932
ắ Vật chủ: mè trắng, rôhu ắ Nơi tìm thấy: mang, vây, cơ
ắ Hình thái: hình elíp hoặc tròn, kích cỡ 0,17 - 0,24 x 0,15 - 0,23 mm, hệ sinh dục hoàn chỉnh có hình chữ U với 70-74 răng nhỏ, tuyến nội tiết hình chữ O và chiếm phần lớn cơ thể.
Tỷ lệ nhiễm (%)
Min Max TB
Hình 4.7: Haplorchis yokogawai Katsuta, 1932 ắ Mức độ cảm nhiễm:
Tỷ lệ cảm nhiễm ở vây là lớn nhất với rôhu 6,9% và mè trắng 14,7%. (Hình 4.8 và bảng 4.8) Kết quả kiểm tra cho thấy H. yokogawai ký sinh trên mang, vây của cá mè trắng và rôhu nh−ng trên cơ chỉ phát hiện ở mè trắng; có tỷ lệ nhiễm là 1,3%, trong khi cá rôhu không phát hiện thấy trong cơ.
0 5 10 15 20 25
30 Mang mè trắngMang rôhu
vây mè trắng vây rôhu Cơ mè trắng
Hình 4.8: Mức độ cảm nhiễm Haplorchis yokogawi Katsuta, 1932
Tỷ lệ nhiễm (%)
Min Max TB
(4) Loài Procervum sp.
ắ Vật chủ: mè trắng, rôhu ắ Nơi tìm thấy: vây, cơ
ắ Hình thái: bào nang hình elíp, kích th−ớc 0,24 - 0,26 x 0,18 - 0,20 mm, có giác bám giao phối (gonotyl); có một tinh hoàn; túi bài tiết hình chữ O và chiếm phần lớn phía sau cơ thể.
Nguồn: Bùi Quang Tề, 2004
Hình 4.9: A- Hình dạng và B - Gonotyl của Procervum sp. ắ Mức độ cảm nhiễm 0 2 4 6 8
10 Vây mè trắngVây rôhu
Cơ mè trắng Cơ rôhu
Hình 4.10: Mức độ cảm nhiễm của Procervum sp.
Tỷ lệ nhiễm (%)
Min Max TB
C−ờng độ nhiễm
Theo hình 4.10 (bảng 4.8 ) loài Procerovum sp. chỉ phát hiện thấy ký sinh trên vây và cơ cá mè trắng và rôhu. Tỷ lệ nhiễm trên vây mè trắng là 9,3%, vây rôhu 8,5%. C−ờng độ trung bình lớn nhất trên vây rôhu là 2,7 ấu trùng/cá thể. Nguyễn Thị Lê (2001) đã phát hiện sán lá tr−ởng thành của Procerovum sp. ký sinh ở gà và vịt, nuôi ở Phú Xuyên - Hà Tây. Bùi Quang Tề gặp Procerovum trên cơ và vây cá mè trắng, sặc b−ớm.
(5) Exorchis sp.
ắ Vật chủ: mè trắng, rôhu ắ Nơi tìm thấy: mang
ắ Hình thái: hình elíp, kích cỡ 0,18 - 0,2 x 0,13 - 0,15 mm, thành rất mỏng và trong, hai điểm mắt ở 2 bên hầu, giác bụng nhỏ hơn giác miệng, tuyến bài tiết hình chữ V.
Hình 4.12: Exorchis sp. ắ Mức độ cảm nhiễm
Theo hình 4.13 và bảng 4.8 loài Exorchis sp ký sinh trên vây, cơ của cá mè trắng và rôhu. Tỷ lệ nhiễm vây lớn nhất ở mè trắng (5,7%) lớn hơn rôhu (3,1%) nh−ng tỷ lệ nhiễm trong cơ rôhu (2,3%) lớn hơn cơ cá mè (1,3%). C−ờng độ nhiễm vây cá mè là 1,5 ấu trùng/cá thể lớn hơn vây rôhu 1,3 ấu trùng/ cá thể.
0 2 4 6 Vây mè trắng Vây rôhu Cơ mè trắng Cơ rôhu Hình 4.13: Mức độ cảm nhiễm Exorchis sp.
(5) Loài Centrocestus formsanus Nishigori, 1924
ắ Vật chủ: mè trắng, rôhu ắ Nơi tìm thấy: mang
ắ Hình thái: Hình elíp dài, kích cỡ 0,15 - 0,20 x 0,10 - 0,12 mm, có khoảng 32 răng vòng tròn quanh giác miệng xếp 2 hàng, tuyến bài tiết hình chữ X
Nguồn: Bùi Quang Tề, 2001
Hỡnh 4.14: A - ấu trùng nằm trong bào nang, B - ấu trùng của Centrocestus formsanus (Nishigori, 1924) ra khỏi bào nang
Tỷ lệ nhiễm (%) Min Max TB C−ờng độ nhiễm A B B
ắ Mức độ cảm nhiễm
Kết quả điều tra cho thấy chỉ phát hiện thấy Centrocestus ký sinh trong mang mè trắng và rôhu. Tỷ lệ nhiễm lớn nhất trên mang mè trắng (10,7%), rôhu (7,7%). C−ờng độ nhiễm trung bình mè trắng là 14 ấu trùng/cá kiểm kiểm tra nhiễm, lớn hơn cá rôhu là 2,8 ấu trùng/cá kiểm tra nhiễm (hình 4.15 và bảng 4.8).
0 20 40 60 Mang mè trắng Mang rôhu
Hình 4.15: Mức độ cảm nhiễm Centrocestus formsanus Nishigori, 1924
Trong 6 loài sán lá song chủ ở giai đoạn ấu trùng- metacercaria đã tìm thấy tại xã Nghĩa Lạc - Nghĩa H−ng - Nam Định thì loài Centocestus formsanus có tỷ lệ nhiễm cao trong mang cá mè trắng và rôhu. Theo Bùi Quang Tề, ấu trùng
metacercaria của Centrocestus formosanus ký sinh ở mang của 13 loài cá gặp ở cả ba miền Việt Nam; tỷ lệ nhiễm khá cao, cá trắm cỏ nhiễm 93,33% và chúng gây bệnh làm cho trắm cỏ giống chết hàng loạt. Tuy loài ấu trùng này không ảnh h−ởng tới sức khỏe con ng−ời nhiều nh−ng ảnh h−ởng tới cá nuôi, nếu tỷ lệ nhiễm cao trên cá có thể dẫn đến cá chết.
Tỷ lệ nhiễm (%)
Min Max TB
4.3. Mức độ nhiễm ấu trùng metacercaria trên các loài cá thu mẫu ở xã Nghĩa Lạc - huyện Nghĩa H−ng - tỉnh Nam Định
Trong quá trình kiểm tra th−ờng phát hiện thấy 3 loài Haplorchis taichui, H. pumilio, H. yokogawai ở giai đoạn ấu trựng metacercaria có tỷ lệ nhiễm lớn và tồn tại trên 3 cơ quan là mang, cơ, vây của 2 đối t−ợng nuôi chính là cỏ mè trắng và rôhu tại xã Nghĩa Lạc - huyện Nghĩa H−ng - tỉnh Nam Định. Theo Yu và ctv 1994, [48] giống Haplorchis là những loài sán lá song chủ có liên quan đến sức khỏe cộng đồng, là nguyên nhân gây nhiễm sán lá vào con ng−ời. Việc lây nhiễm những loài trên liên quan đến vấn đề về an toàn và chất l−ợng thức ăn.
Haplorchis taichui có thể đ−ợc lây nhiễm từ phân của gia cầm và những loài động vật có vú ở Đài Loan và phổ biến ở cộng đồng ng−ời châu á. Loài sán lá H. pumilio đã đ−ợc phân lập từ chim và động vật có vú ở Ai Cập, hiện tại nó đã đ−ợc tìm thấy ở châu á [48]. Loài H. yokogawai cũng đã đ−ợc miêu tả ở Đài Loan, một số n−ớc Đông nam á, Australia và Ai Cập [48]. Vì vậy chúng tôi sẽ thảo luận và phân tích về tỷ lệ nhiễm giống Haplorchis trong cá của vùng điều tra.
4.3.1. So sánh mức độ nhiễm ấu trùng metacercaria trên các cơ quan khác nhau của cá nhau của cá
(1) Mức độ nhiễm Haplorchis taichui, H. pumilio và H. yokogawai trên vây, mang, cơ của cá mè trắng
Theo hình 4.16 (bảng 4.8) tỷ lệ nhiễm của 3 loài sán lá Haplochis taichui, H. pumilio và H. yokogawai trên vây lớn hơn trên mang và cơ cá. Trong đó loài H. taichui nhiễm trên vây là 32,0%, c−ờng độ nhiễm trung bình là 3,7 ấu trùng/cá thể; trên cơ là 4,0%, c−ờng độ nhiễm trung bình là 0,3 ấu trùng/gam. Loài này mức độ nhiễm cao nhất so với các ấu trùng loài sán khác và chúng chủ yếu ký
sinh trên vây và cơ. Kết quả này t−ơng tự với nghiên cứu của Bùi Quang Tề
metacercaria trên cá mè trắng, trắm cỏ, chép, rô đồng.
Loài H. pumilio ký sinh trên cả 3 phần vây, mang, cơ, Theo hình 4.16 và bảng 4.8 tỷ lệ nhiễm cao nhất ở vây (10,7%), tiếp đến là mang và cơ (6,7%). Tỷ lệ nhiễm H. pumilio ở vây thấp hơn loài H. taichui nh−ng c−ờng độ nhiễm trùng bình rất cao: 14 ấu trùng/cá thể, gấp hơn 3 lần (14/3,7). So sánh với kết quả nghiên cứu của Bùi Quang Tề tôi đã phát hiện thêm ấu trùng của sán lá
H.pumilio ký sinh trên mang cá mè trắng với tỷ lệ nhiễm 6,7%, c−ờng độ nhiễm 7,0 ấu trùng/cá thể.
Loài H. yokogawai phát hiện trên cả 3 phần vây, mang, cơ. Loài H. yokogawai có tỷ lệ nhiễm trên vây cao nhất (14,7%), thấp nhất trên cơ (1,3%) (hình 4.16- bảng 4.8). Cũng theo Bùi Quang Tề H. yokogawai ký sinh trên vây và cơ cá mè trắng, trắm cỏ. Kết quả của tôi cho thấy loài này còn có khả năng ký sinh trên mang cá có tỷ lệ nhiễm tới 5,3%.
32 10,7 14,7 6,7 5,3 4 6,7 1,3 0 5 10 15 20 25 30 35
Vây Mang Cơ
Haplochis taichui H. pumilio
H. yokogawai
Hình 4.16: Tỷ lệ nhiễm ấu trùng metacercariaH. taichui, H. Pumilio, H. yokogawai ở cá mè trắng
Nhận xét: ba loài sán lá Haplochis taichui, H. pumilio và H. yokogawai ở giai đoạn ấu trùng metacercaria ký sinh trên cả 3 bộ phận mang, vây, cơ, nh−ng mức độ nhiễm trên vây là cao nhất. Tỷ lệ nhiễm trên vây lần l−ợt theo 3 loài sán là 32,0%; 10,7% và 14,7%. C−ờng độ nhiễm trên vây nh− sau 3,7; 14 và 10,3 ấu trùng/cá thể.
(2) Mức độ nhiễm Haplochis taichui, H. pumilio và H. yokogawai trên vây, mang, cơ của cá rôhu
Mức độ nhiễm của 3 loài H. taichui, H. pumolio và H. yokogawai đ−ợc trình bày theo hình 4.17 và bảng 4.8.
Loài H. taichui theo kết quả kiểm tra chỉ phát hiện ấu trùng ký sinh trên vây có tỷ lệ nhiễm 10% và cơ 6,9%. C−ờng độ nhiễm trên vây 2,8 ấu trùng/cá thể, cơ 0,2 ấu trùng/gam. Không phát hiện ấu trùng ký sinh trên mang cá rôhu.
Loài H. pumilio ký sinh trên cả ba phần mang, vây, cơ. Tỷ lệ nhiễm cao nhất là trên vây (7,7%) và thấp nhất là ở mang (4,6%). C−ờng độ nhiễm trên mang 1,8 ấu trùng/cá thể, trên vây 2,8 ấu trùng/cá thể, trên cơ 0,1 ấu trùng/gam cơ. H. pumilio không chỉ ký sinh trên vây, cơ mà nó còn ký sinh trên mang cá rôhu. Loài H. yokogawai ký sinh trên 2 cơ quan vây, mang: tỷ lệ nhiễm trên vây 6,9%, trên mang tỷ lệ nhiễm thấp 0,8%, không phát hiện ấu trùng ký sinh trên cơ. C−ờng độ nhiễm trên vây 1,9 ấu trùng/cá thể lớn gần gấp 2 lần trên cơ 1 ấu trùng/cá thể. Điều này có thể gải thích: ấu trùng cercaria khi thoát ra vật chủ thứ nhất bơi tự do trong n−ớc, do phần vây tiếp xúc với môi tr−ờng ngoài là n−ớc nhiều hơn nên tỷ lệ nhiễm cũng nh− c−ờng độ nhiễm th−ờng cao hơn mang.
10 7.7 6.9 4.6 0.8 6.9 6.9 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 H. taichuiH. pumilio H. yokogawai
Hình 4.17: Tỷ lệ nhiễm ấu trùng metacercaria H. taichui, H. pumilio, H.
yokogawai ở cá rôhu
Nhận xét: T−ơng tự nh− cá mè trắng ba loài sán lá Haplochis taichui, H. pumilio và H. yokogawai ở giai đoạn ấu trùng metacercaria ký sinh trên cả ba bộ phận mang, vây, cơ, nh−ng mức độ nhiễm trên vây là cao nhất. Tỷ lệ nhiễm trên vây lần l−ợt theo 3 loài sán là 10,0%; 7,7% và 6,9%. C−ờng độ nhiễm trên vây th−ờng cao nhất so với mang và cơ.
(3) So sánh mức độ nhiễm ấu trùng metacercaria giữa cá mè trắng và cá rôhu
Mức độ nhiễm của 3 loài H. taichui, H. pumilio và H. yokogawai trên 2 loài cá của 3 phần cơ, mang, vây đ−ợc so sánh trên hình 4.18.
Trong quá trình kiểm tra đã phát hiện đ−ợc 6 loại ấu trùng metacecaria của