II. Phương
5. Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng của nồng độ nguyên liệu đến khả năng lên
men lặp lại 3 lần.
• Môi trường PG: là môi trường lỏng dùng để nhân giống nấm men. Thành phần giống môi trường PGA nhưng không thêm agar.
• Nấm men mới phân lập và nấm men Saccharomyces cerevisiae được nuôi trong môi trường PG ở 300C trên máy lắc (150 vòng/phút) trong 24h.
• Cho 9ml dịch quả xoài chỉnh độ Brix 2% vào mỗi chai Durham, sau đó đem khử trùng ở 1210C trong 15 phút, để nguội.
• Cho thêm 3ml dung dịch nấm men vào chai Durham có dịch nước xoài, ủở nhiệt độ phòng.
Chỉ tiêu theo dõi:
• Đo chiều cao trung bình cột khí CO2 trong các ống ở các thời điểm 12h, 18h, 30h, 54h, 60h…. Dòng nấm men nào có cột khí CO2 cao nhất ở cùng thời điểm lên men thì biểu hiện sự lên men mạnh nhất.
• Chọn ra dòng nấm men cho khả năng lên men dịch xoài tốt nhất.
Luận văn tốt nghiệp đại học Chuyên ngành Công nghệ Sinh học
SVTH: Lê Hoàng Thông 19 Công nghệ Sinh học K31
5. Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng của nồng độ nguyên liệu đến khả năng lên mencủa các dòng nấm men của các dòng nấm men
Mục đích: Chọn ra dòng nấm men và độ pha loãng nguyên liệu để nấm men lên men dịch xoài tốt nhất.
Chuẩn bị: Nuôi 5 dòng nấm men trong môi trường PG trên máy lắc (150 vòng/phút, 300C) trong 24h.
Bố trí thí nghiệm: tiến hành lên men trong bình tam giác, mỗi bình 150ml dịch lên men với 2 nhân tố, lặp lại 2 lần.
• Nhân tố dòng nấm men (5 dòng): Y09006, Y09007, Y09008, Y09009 và dòng nấm men thị trường.
• Nhân tốđộ pha loãng nguyên liệu (3 mức độ): 20%, 35% và 50%. Tiến hành:
• Xoài chín bóc vỏ bỏ hột, xay nhuyễn và pha loãng ở các nồng độ 20%, 35% và 50%.
• Điều chỉnh dịch xoài đến 250 Brix bằng đường tinh luyện.
men đã được nuôi vào như bố trí thí nghiệm.
Bảng 5: Bố trí thí nghiệm của thí nghiệm 4
Nghiệm thức Nấm men % NL Nghiệm thức Nấm men % NL 1 Y09006 20 9 Y09008 50 2 Y09006 35 10 Y09009 20 3 Y09006 50 11 Y09009 35 4 Y09007 20 12 Y09009 50 5 Y09007 35 13 TT 20 6 Y09007 50 14 TT 35 7 Y09008 20 15 TT 50 8 Y09008 35
Các chỉ tiêu theo dõi:
• Nồng độ chất khô hòa tan sau khi lên men: được đo bằng Brix kế • pH: đo trước khi lên men và sau khi thành phẩm bằng pH kế.
• Nồng độ rượu: rượu sau khi lên men tiến hành chưng cất sau đó đo nồng độ rượu bằng rượu kế.
Luận văn tốt nghiệp đại học Chuyên ngành Công nghệ Sinh học
SVTH: Lê Hoàng Thông 20 Công nghệ Sinh học K31