- Thermonuclease cụa S aureus: cũng như tât cạ các vi sinh vaơt khác S aureus đeău có theơ toơng hợp DNAse ngối bào, như có đieơm khác bieơt so với tât cạ các loài vi sinh vaơt khác,
18.Thử nghieơm leđn men – oxyhoá ( Thử nghieơm Hugh&Leifson)
Nguyeđn taĩc: Xác định vi sinh vaơt trao đoơi carbonhydrate baỉng quá trình oxyhoá hay quá trình leđn men.
Cơ sở sinh hoá: Vi sinh vaơt sữ dúng carbonhydrate trong quá trình trao đoơi chât thođng qua hai quá trình: oxy hoá và leđn men. Moơt sô vi sinh vaơt chư có theơ sữ dúng carbonhydrate trong đieơu kieơn hiêu khí, trong khi đó moơt sô vi sinh vaơt khác có theơ trao đoơi cơ chât này trong cạ hai đieău kieơn hiêu khí và kỵ khí. Đađy được gĩi là vi sinh vaơt kỵ khí tuỳ nghi.
Leđn men là moơt quá trình kỵ khí, vi khuaơn leđn men là những vi khuaơn kỵ khí tuỳ nghi. Quá trình leđn men glucose sẽ chia phađn tử này thành hai đường triose (đường 3C). Sạn phaơn cuôi cùng cụa con đường leđn men phú thuoơc vào từng loài vi sinh vaơt và phú thuoơc vào đieău kieơn mođi trường. Tuy vaơy đieơm côt yêu cụa con đường leđn men là phađn tử glucose bị phosphoryl hoá ở bước đaău tieđn đeơ thành glucose-6-phoshate. Quá trình leđn men caăn moơt chât nhaơn đieơn tử cuôi cùng là moơt hợp chât hữu cơ. Glucose tham giam trong quá trình leđn men thường được trao đoơi theo con đường Embden-Meyerhof, cũng có trường hợp trao đoơi theo con đường Entner- Doudoroff và con đường theo hường trao đoơi pentose.
+++
Phức hợp màu đỏ hoăng
1 mol glucose Glucose – 6 - phosphate
Cách Embden - Meyerhof
Cách Embden - Meyerhof
Fructose – 6 - Phosphate Fructose 1, 6 – di phosphate 2 mol Glyceraldehyde 3 - Phosphat
2 mol acid pyruvic 6-phosphogluconic acid Cách Entner-Doudoroff 2-keto-3-deoxy-6-phosphogluconic acid Glyceraldehyde 3 - Phosphat Cách Pentose Shunt Ribulose – 5 - Phosphate + CO2 Phosphoryl hoá
39
Sơ đoă các con đường leđn men
Oxy hoá là quá trình chư dieơn ra trong đieău kieơn có oxy. Trong quá trình này phađn tử glucose khođng bị chia thành hai triose như tređn, thay vào đó chúng oxy hoá nhóm chức aldehyde (-CHO) đeơ táo thành acid gluconic. Khác với quá trình leđn men, quá trình oxy hoá khođng bị phosphoryl hoá ở giai đốn đaău cụa quá trình phađn giại glucose. Đoăng thời trong quá trình oxy hoá chât nhaơn đieơn tử cuôi cùng khođng phại là phađn tử hữu cơ mà có theơ là các chât vođ cơ như oxy phađn tử nitrat hay sulphate. Quá trình leđn men thường táo mođi trường acid cao hơn trong quá trình oxy hoá.
Con đường oxyhoá glucose
Phương pháp thực hieơn: Cây đađm sađu vi sinh vaơt thử nghieơm vào hai ông nghieơm mođi trường Hugh &Leifson có chứa 2-5 g agar/ lít. Moơt trong hai ông được phụ leđn beă maịt 1ml daău khoáng hai parafine lỏng vođ trùng đeơ ngaín cạn sự tiêp xúc với oxy khođng khí. Uû cạ hai ông trong cùng đieău kieơn khoạng 24-48 giờ.
Phạn ứng leđn men khi cạ hai ông đeău bi acid hoá đeău ở tređn maịt và phaăn sađu cụa mođi trường.
Phạn ứng oxy hoá khi ông kỵ khí bị acid hoá, ông hiêu khí khođng bị acid hoá tređn maịt mà chư có acid ở phaăn đáy ông.