- Pipet, pipetman
c.Cách tiến hμnh:
Rót đầy mẫu vμo chai BOD có dung tích 300 ml, tránh bọt bám trên thμnh chai, đậy nút loại bỏ mẫu thừa. ủ 5 ngμy, t−ới n−ớc cất lên nắp bình vμo mỗi buổi sáng để tránh bọt khí, sau đó phủ lên bình bằng giấy báo. Buồng ủ có nhiệt độ 200C.
* Xác định DO5:
- Cho 2 ml dung dịch Mix I vμ 2 ml dung dịch Mix II vμo mẫu sau khi ủ 5 ngμy rồi đậy nút vμ
lắc mạnh để phản ứng xảy ra hoμn toμn.
- Đợi kết tủa lắng yên, cho thêm 2 ml H2SO4 98% rồi lắc mạnh để hòa tan hết kết tủa. - Dùng ống đong lấy 203 ml mẫu sau khi cho hóa chất.
- Chuẩn độ bằng dung dịch Na2S2O3 0,025N tới lúc mẫu chuyển sang mμu vμng chanh thì cho thêm 1 - 3 giọt hồ tinh bột, sau đó lắc nhẹ vμ chuẩn độ tiếp cho đến khi mẫu bắt đầu mất mμu.
- Ghi lại thể tích Na2S2O3 (ml) đã dùng, thể tích nμy đúng bằng nồng độ DO5 (mg/l). - Tiến hμnh song song với một mẫu n−ớc cất có sục khí bão hòa.
* Xác định DO0:
Xác định giống DO5 nh−ng lμm trên mẫu vừa lấy về không ủ (xác định ngay sau khi chuẩn bị mẫu xong).
Công thức tính:
BOD5(mg/l) = D00– DO5 P
Chú ý: cứ 1 ml dung dịch Na2S2O3.H2O 0,025N t−ơng ứng 0,2 mg DO nên mỗi ml chuẩn độ t−ơng ứng 1 mg DO/l khi mẫu n−ớc ban đầu lμ 203 ml (1ml O2 = 0,7*1mg O2/l).
Trong đó:
DO0: nồng độ DO của hỗn hợp mẫu vμ dung dịch cấy tr−ớc khi ủ. DO5: nồng độ DO của hỗn hợp mẫu vμ dung dịch cấy sau khi ủ 5 ngμy. P: V1/V2.
V1: thể tích mẫu.
V2: thể tích mẫu vμ dung dịch cấy.
2.4.3 Ph−ơng pháp vi sinh
2.4.3.1 Ph−ơng pháp định l−ợng vi sinh vật bằng ph−ơng pháp đếm số khuẩn lạc trên thạch đĩa [7, 21, 22,30] [7, 21, 22,30]