Để khảo sát hoạt tính amylase của bốn chủng Bacillus.sp. Chúng tôi tiến hành nuôi cấy các chủng này trong những môi trường tối ưu sinh amylase khác nhau, ở các điều kiện (nhiệt độ, pH, thời gian) tối ưu khác nhau (phụ lục 1). Sau khi nuôi cấy, chúng tôi tiến hành ly tâm thu dịch nổi để khảo sát hoạt tính amylase của bốn chúng đó bằng phương pháp Bernfield và kết quả được chỉ ra ở hình 3.1.
Hình3.1 Kết quả khảo sát hoạt tính amylase của Bacillus.sp
(B.amyloliquefaciens N1, B.subtilis DC5, B.amyloliquefaciens T9, B.subtilis C10)
Kết quả cho thấy trong 4 chủng Bacillus thì hoạt tính amylase của
Bacillus amyloliquefaciens N1 là mạnh nhất và Bacillus subtilis C10 là yếu nhất.
Trong khi đó, hoạt tính amylase của hai chủng Bacillus subtilis DC5 và Bacillus
amyloliquefaciens T9 là tương đương nhau (sự khác nhau khơng có ý nghĩa về
mặt tốn học). Tính khả dụng của các loại enzyme của Bacillus là rất lớn và ngày càng có nhiều cơng trình nghiên cứu sâu rộng hơn về chúng. Như nghiên
cứu của Per Einar Granum và cộng sự (1978)[31] đã tìm ra điều kiện ni cấy tối ưu để thu enzyme amlyase lớn nhất từ chủng Bacillus amyloliquefaciens phân lập từ bột hành khô là ở 600C sau 30 giờ ni cấy trong mơi trường có pH bằng 5,5 chứa 1% agar; 0,5% tinh bột hòa tan; 0,2% (NH4)2SO4; 0,05% MgSO4.7H2O và 0,05% CaCl2 và được lắc 200 vịng/phút. Đồng thời ơng cũng chỉ ra rằng hoạt tính amylase của chủng B.amyloliquefacines trong điều kiện tốt nhất để sinh enzyme amylase là 6,9 (U/ml). Điều này cho thấy, hoạt lực amylase của chủng này tương đương với B.subtilis DC5 và B.amylolifaciens T9, yếu hơn
B.amyloliquefaciens N1 và mạnh hơn B.subtilis C10. Ngoài ra, Mohsen Fathi
Najaw và cộng sự ( 2005)[30] đã phân lập được chủng Bacillus subtilis AX20 từ đất của chợ Shivage thuộc Pune, Ấn Độ và họ đã xác định được hoạt tính amylase của nó trong mơi trường tối ưu để sinh amylase là 28 (U/ml), hoạt tính amylase của chủng AX20 cao hơn hẳn bốn chủng Bacillus mà chúng tôi đang khảo sát. Trong một nghiên cứu khác của A. Behal và cộng sự (2006)[16] cho biết điều kiện tối ưu để sinh enzyme amylase kiềm tính ngoại bào của chủng
Bacillus sp. AB04 được phân lập từ đất ở Jalandhar Distt.Punjab (Ấn Độ) là tinh
bột hòa tan 1%, cao nấm 0.5% , MgSO4.7H2O 0.05% và K2HP04 0.1%, pH của môi trường là 7.0. Nuôi cấy được thực hiện bằng cách ủ các bình tam giác trong máy lắc ở 400C,150 vòng/phút, 24h.