- Tác dụng của methadone đối với cơ thể [25]
1.4.2 Phương pháp chiết lỏng-lỏng [10][19] [22]
Nguyên tắc chung
Dựa trên sự phân bố của các chất hoà tan giữa hai pha lỏng không trộn
lẫn, thƣờng là dung môi hữu cơ và nƣớc. Hệ số phân bố K đƣợc mô tả:
KD = [A]s [A]n [A]s-nồng độ chất A trong pha hữu cơ. [A]n-nồng độ chất A trong pha nƣớc.
Để tăng tốc độ phân bố giữa hai pha phải tiến hành lắc hỗn hợp. Khi lắc hai pha sẽ phân tán vào nhau, tốc độ lắc có liên quan nhiều đến tốc độ cân bằng phân bố. Khi lắc càng mạnh, hạt chất lỏng sẽ càng nhỏ, sự va chạm tiếp xúc lớn, quá trình phân bố giữa hai pha sẽ diễn ra nhanh hơn. Thông thƣờng quá trình lắc diễn ra khoảng 5 phút là đạt trạng thái cân bằng. Tốc độ lắc tối ƣu cần kiểm định qua thực tế, cần chọn dung môi có tỷ trọng khác nƣớc nhiều để quá trình tách lớp giữa hai pha đƣợc diễn ra nhanh chóng [7].
Dung môi hữu cơ: Có rất nhiều cách để phân loại dung môi hữu cơ, những yêu cầu cơ bản nhất đối với việc chọn dung môi hay hệ dung môi chiết là: - Độ chọn lọc: Dung môi chiết chỉ chọn lọc một chất hay một nhóm chất nhất định. Độ chọn lọc dựa vào tính chất của dung môi, tính chất của cấu tử cần tách và điều kiện chiết (nhƣ pH môi trƣờng).
- Áp suất hơi dung môi: Các dung môi có áp suất hơi bão hoà ở nhiệt độ càng thấp càng tốt (nhiệt độ sôi lớn hơn 500
c).
- Khối lƣợng riêng khác nƣớc nhiều để khi chiết phân lớp nhanh, ít độc, rẻ, tinh khiết và khan nƣớc.
Áp dụng phương pháp chiết lỏng-lỏng với nhóm ma tuý Opiat
Hiện nay để xác định Morphine, sản phẩm chuyển hoá là 6-MAM và thuốc duy trì Methadone trong mẫu nƣớc tiểu, ngƣời ta thƣờng dùng phƣơng
Phƣơng pháp này có những ƣu điểm nổi trội nhƣ: Dễ thực hiện, đã đƣợc ứng dụng phổ biến và rất có hiệu quả trong lĩnh vực tách chiết phân tích và làm giầu các chất phân tích phục vụ cho việc xác định lƣợng vết của chúng trong mẫu. Loại bỏ đƣợc các chất ảnh hƣởng, nhất là chất nền của mẫu, thích hợp cho phân tích lƣợng vết.
Nhƣ đã trình bày ở trên, một phần lớn các chất ma tuý nhóm opiat đƣợc bài trừ qua đƣờng nƣớc tiểu có liên kết với axit glucuronic. Khi tách chiết phải cắt bỏ liên kết này bằng cách cách thuỷ phân trong môi trƣờng axit hoặc kiềm, nếu không khi chiết chỉ tách đƣợc các hợp chất tự do. Lƣợng dung môi, loại dung môi và pH mẫu phải đƣợc lựa chọn thích hợp thì mới bảo đảm cho hiệu suất chiết đƣợc tốt nhất. nên trong quá trình chiết pH mẫu phải đƣợc điều chỉnh sao cho ở pH đó các chất tồn tại dƣới dạng phân tử thì hiệu quả chiết sẽ tốt. Morphine, 6-MAM, Methadone về mặt cấu trúc hoá học có chức amin bậc ba nên có tính base, dung dịch làm xanh giấy quỳ, khi có mặt của base mạnh sẽ bị kết tủa. Nếu base thừa sẽ hoà tan tủa do có mặt của chức phenol (morphine, 6-MAM). Mặt khác về cấu tạo có amin bậc ba nên dễ kết hợp với proton để tạo nên nitơ bậc bốn. Vì có cả chức phenol và amin bậc ba nên morphine, 6-MAM là chất lƣỡng tính có thể cho hoặc nhận proton. Dựa vào hai hằng số cân bằng, các tác giả đã xác định đƣợc pH thích hợp khoảng 8-9. Mặt khác do có hai nhóm chức nêu trên, nên phân tử phân cực hơn vì vậy để tăng hiệu suất chiết, thƣờng dùng hỗn hợp dung môi có hằng số điện môi khoảng 10 (phân cực hơn chloroform).
Nƣớc tiểu có rất nhiều tạp chất, chúng cũng bị chiết gây ảnh hƣởng cho việc phát hiện. Có thể dùng dung môi và pH thích hợp để chiết loại bỏ tạp chất trƣớc khi chiết mẫu ma tuý. Khi chiết Morphine, 6-MAM và Methadone từ nƣớc tiểu, có thể loại bỏ tạp chất trƣớc khi chiết bằng cách chiết ở pH axit với dung môi không phân cực n-hexan, ether dầu hoả, sau đó chuyển môi trƣờng kiềm để chiết ma tuý.
Sau khi tham khảo và nghiên cứu hai kỹ thuật chiết pha rắn và chiết lỏng- lỏng chúng tôi thấy rằng chiết pha rắn tuy có nhiều ƣu điểm nổi bật đƣợc lựa chọn cho các đối tƣợng mẫu, nhƣng đối với mẫu có chứa Morphine, 6-MAM và Methadone trong nƣớc tiểu thì không thuận lợi vì nƣớc tiểu là một đối tƣợng rất phức tạp, có rất nhiều các chất và hợp chất hữu cơ đƣợc đào thải trong quá trình bài tiết của cơ thể vì vậy quá trình chiết đƣợc dự đoán là sẽ
không chọn lọc đối với đối tƣợng mẫu phân tích. Hơn nữa, phƣơng pháp chiết pha rắn có quy trình phức tạp hơn ở chỗ phải qua nhiều bƣớc với các dung môi khác nhau. Trong khi đó, phƣơng pháp chiết lỏng-lỏng đƣợc lựa chọn nhƣ là một giải pháp tốt bởi vì những ƣu điểm riêng của phƣơng pháp đã đƣợc trình bày ở trên.