trưởng của khoai lang nuôi cấy mô
Đốt thân từ cây khoai lang in vitro sau 30 ngày nuôi cấy ñược sử dụng trong thí nghiệm (ảnh 2.9; 2.10).
Mẫu ñược cấy trên 65 ml môi trường chứa trong bình tam giác. Thí nghiệm sử dụng môi trường tối ưu từ nội dung 2.3 (2mg/l BA + 1mg/l
Kinetin) có bổ sung 5 nồng ñộ chitosan khác nhau: 0; 10; 20; 30; 50 ppm. pH của môi trường ñược ñiều chỉnh về 5.8 bằng KOH 1N và HCl 1N, sau ñó
môi trường ñược hấp khử trùng ở 121oC trong thời gian 20 phút. Bình tam giác chứa mẫu ñược nuôi trong phòng nuôi cây dưới thời gian chiếu
sáng là 10 giờ/ngày, nhiệt ñộ phòng 25 ± 2oC, ñộ ẩm phòng 60 ± 5%. Bố trí thí nghiệm:
Ảnh 2.7. Chồi ngọn cây khoai lang 30 ngày tuổi ñược chọn làm
mẫu cấy
Ảnh 2.8. Các chồi ngọn ñược cấy vào bình tam giác
NT BA (mg/l) Kinetin (mg/l) Chitosan oligomer ppm/l C0 C10 C20 C30 C50 2 2 2 2 2 1 1 1 1 1 0 10 20 30 50
Thí nghiệm gồm 5 nghiệm thức ñược bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với 1 yếu tố. Mỗi nghiệm thức có 4 bình, với 4 mẫu/bình, ñược lặp lại 3 lần. Chỉ tiêu theo dõi sau 30 ngày nuôi cấy:
- % mẫu bật chồi - Chiều cao chồi (mm)
- Số lá - Khối lượng chồi tươi (g) - Khối lượng chồi khô (g) - Số rể
- Chiều dài rễ (mm) - Khối lượng rễ tươi (g) - Khối lượng rễ khô (g).
Ảnh 2.9 Cây khoai lang in vitro 30 ngày tuổi và các vị trí ñốt thân ñược chọn ñể
thu nhận mẫu cấy
Ảnh 2.10 Các ñốt thân ñược thu nhận và cấy vào bình tam giác
Đốt thân
Đốt thân
Đốt thân