2.6.2.1. Xác định hàm lượng kẽm trong đất và lá theo TCVN 4575-88 (Phương pháp xác định hàm lượng kẽm trong nước thải) [28] cĩ sự cải biến phù hợp.
- Lấy mẫu lá:
Mẫu lá theo từng cơng thức riêng biệt. Trên mỗi ơ thí nghiệm, chọn ngẫu nhiên 3 cây, mỗi cây hái 2 cặp lá bánh tẻ (cặp lá thứ 3-4 tính từ đầu mút ngọn).
Đem phơi khơ lá rồi xử lý diệt men ở nhiệt độ cao trên 100oC trong 3 phút, sau đĩ sấy khơ ở nhiệt độ 70oC cho đến khi lượng nước khơng thay đổi. Trộn đều rồi cân 1 gam để lấy mẫu đại diện cho ơ.
Đưa mẫu vào chén sứ chịu nhiệt và nung mẫu lá ở nhiệt độ 450oC trong 4 giờ để đốt cháy hồn tồn các chất hữu cơ (tro hĩa hồn tồn mẫu) [27].
- Lấy mẫu đất:
Lấy mẫu đất theo từng cơng thức riêng biệt. Mỗi ơ lấy 5 điểm theo 2 đường chéo gĩc lấy mẫu đại diện cho ơ. Mẫu được lấy bằng khoan chuyên dụng ở độ sâu: 0 – 30 cm.
Đem phơi rồi sấy khơ mẫu ở 105oC trong 4 giờ. Trộn đều và lấy 1 gam đất (đã qua rây 0,20mm) để lấy mẫu đại diện cho ơ.
Đưa mẫu vào chén sứ chịu nhiệt và nung mẫu đất ở nhiệt độ 450oC trong 4 giờ để đốt cháy hồn tồn các chất hữu cơ (tro hĩa hồn tồn mẫu) [27].
Lấy tồn bộ lượng mẫu đã được vơ cơ hĩa cho vào bình tam giác rồi nhỏ vào mỗi bình 5ml HCl 1N để cơng phá mẫu (phải chắc chắn rằng mẫu được ngấm vào trong dung dịch một cách tuyệt đối), sau đĩ pha lỗng đến 100ml bằng nước cất , thêm 20ml dung dịch đệm axit axetat, 3ml natri thiosunfat (0,2%) và nhỏ vào 0.3ml dung dịch Dithizon (0,001%). Lắc hỗn hợp cẩn thận, nếu cĩ kẽm sẽ xuất hiện màu tím đỏ.
Đo tồn bộ lượng mẫu ở bước sĩng 520nm để xác định chỉ số ABS, từ đĩ xác định được hàm lượng kẽm trong đất và trong lá theo phương trình tương quan sau:
y = -4E.0,8x2 + 7E. 0,5x – 0,0687
(phương trình do chúng tơi lập)
Trong đĩ y là chỉ số ABS
x là nồng độ kẽm (ppm)
2.6.2.2. Phân tích ảnh hưởng của phân bĩn Zn đến hàm lượng diệp lục a, b & diệp lục tổng số bằng phương pháp quang phổ hấp thụ. Đo hàm lượng diệp lục bằng phương pháp quang phổ hấp phụ tại Trung tâm nghiên cứu đất, phân bĩn và mơi trường Tây nguyên.
Loại máy: Labomed, inC Hãng: Spectro 22RS Lấy mẫu thí nghiệm và phân tích:
- Trên mỗi ơ thí nghiệm: lấy cặp lá thứ 4 từ ngồi vào trên những cành mang quả, mỗi ơ chọn 3 cây, mỗi cây lấy 2 lá đối diện ở tầng giữa của cây. Lấy mẫu từ 7 giờ 30 phút tới 10 giờ sáng và ngày hơm trước khơng cĩ mưa. Tiếp theo là loại bỏ gân lá, nghiền nhỏ, trộn đều cân lấy 0.5 gam rồi đem ngâm trong 40ml dung dịch acetone 80%, đậy nút kín; sau 4h, chiết dung dịch; thêm 20ml dung dịch acetone 80% ngâm tiếp trong 10h, chiết lấy dung dịch; thêm 20 ml acetone 80% ngâm tiếp trong 1 giờ, nếu mẫu chưa hết màu xanh, cịn ngâm tiếp đến khi hết màu xanh, gộp chung các dung dịch chiết từ mẫu, thêm acetone 80% vừa đủ 100ml.
- Hàm lượng sắc tố trong dung dịch được tính theo cơng thức của Siglec- Egle: Ca = 11,78 D664 - 2,29 D647 Cb = 20,05 D647 - 4,77 D664 Diệp lục tổng số = dla + dlb Đơn vị tính: mg diệp lục/1g lá [1].
2.6.2.3. Phân tích ảnh hưởng của phân bĩn Zn đến tình hình sinh trưởng của vườn cây: Trên mỗi ơ cơ sở, chọn 3 cây cĩ độ đồng đều về: giống, năng suất và tốc độ sinh trưởng và theo dõi các chỉ tiêu sau:
- Đếm số lượng cành: Chia tán cây thành 8 phần bằng nhau, đếm tất cả các cành hữu hiệu (những cành cho quả năm sau) ở 2 phía đối diện rồi tính chung cho tồn cây.
- Đo chiều dài, đường kính cành và đếm số cặp lá: Trên những cây đã định vị, mỗi cây chọn 5 cành sinh trưởng bình thường, ở giữa tán, lấy bốn hướng đối diện rồi đánh dấu, sau thời gian 8 tháng bắt đầu đếm số cặp lá tăng thêm, đo chiều dài cành tăng thêm và do đường kính cành [21].
2.6.2.4. Phân tích ảnh hưởng của phân bĩn Zn đến tỉ lệ rụng quả và sự biến dạng của lá non.
- Tỉ lệ quả rụng: Khi quả cà phê to bằng hạt đậu xanh , đếm số quả trên chùm và sau đĩ đếm lại một lần trước lúc thu hoạch. Tính tỉ lệ rụng quả so với ban đầu.
Số quả đợt trước – Số quả đợt sau
Tỷ lệ rụng quả (%) = --- x 100 Số quả đợt trước
- Tỉ lệ cây cĩ lá bị biến dạng: Đếm tất cả các cây cĩ lá bị biến dạng rồi so với tổng số cây cĩ trong ơ thí nghiệm, từ đĩ suy ra tỉ lệ %.
Số cây cĩ lá biến dạng
Tỷ lệ cây cĩ lá biến dạng = --- x 100 Tổng số cây trong ơ thí nghiệm
2.6.2.5. Phân tích ảnh hưởng của phân bĩn Zn đến năng suất (năng suất quả tươi, nhân, tỉ lệ quả tươi/ nhân) và phẩm cấp hạt của cà phê vối
- Năng suất quả tươi: thu hoạch tất cả các cây trong ơ, cân xác định năng suất quả tươi.
- Tỉ lệ tươi/ nhân: Cân lấy một lượng nhất định quả cà phê tươi vừa thu hoạch đem phơi hoặc sấy khơ đến độ ẩm 13% sau đĩ xát tách vỏ và cân lượng cà phê nhân, tính tỉ lệ tươi/nhân; Năng suất tươi cân ngay sau khi thu hoạch và cân xác định năng suất cà phê nhân sau khi phơi khơ đã tách vỏ.
- Phẩm cấp hạt: tỷ lệ (%) hạt trên sàng được phân loại qua kích thước sàng theo TCVN 4807:2001 (ISO 4150: 1991). Sàng được sử dụng trong nghiên cứu là bộ sàng chuẩn (7 chiếc). Đổ mẫu nhân (khoảng 300 gam) vào ngăn sàng trên cùng, cho vào máy lắc hoạt động với tần số 60 vịng/phút, lắc 3 phút, lấy cà phê trên từng sàng cân và tính tỉ lệ phần trăm so với tổng lượng mẫu đem sàng đồng thời xác định hạng cà phê ở mỗi cơng thức [3].
2.6.2.6. Sơ bộ tính hiệu quả kinh tế của việc sử dụng phân kẽm
Lãi rịng = Thu trội – Đầu tư trội
- Thu trội là giá trị của năng suất gia tăng (giá trị sản phẩm vượt) do phân bĩn so với đối chứng.
- Đầu tư trội là giá trị phân bĩn đầu tư thêm so với đối chứng (bao gồm cả chi phí phân và chi phí thu hoạch chế biến trội cho phần năng suất tăng lên do phân bĩn).
Tính VCR (Value/Cost) = Giá trị của năng suất gia tăng do phân bĩn so với đối chứng/ Giá trị phân bĩn đầu tư thêm so với cơng thức đối chứng (bao gồm cả chi phí phân và chi phí thu hoạch chế biến trội cho phần năng suất tăng lên do phân bĩn) [37].