- Giai đoạn chuẩn độ.
2.4.3. Phương pháp định lượng NH3 bằng cách cất kéo hơi nước
Nguyên lý: Đẩy muối amoni ra thể tự do bằng một chất kiềm mạnh hơn amoniac,
nhưng không mạnh lắm để tránh ảnh hưởng đến thực phẩm, thí dụ như Mg(OH)2, Na2CO3, Ba(OH)2. Dùng hơi nước kéo amoniac đã được giải phóng ra thể tự do, sang bình chuẩn độ và định lượng bằng H2SO4 0,1N với phenolphtalein làm chỉ thị màu.
Phản ứng :
2NH4Cl + Ba(OH)2 BaCl2 + 2NH3 + 2H2O
2NH3 + H2SO4 (NH4)2SO4
Dụng cụ, vật liệu, thuốc thử : - Dung dịch Ba(OH)2 bão hoà. - Thuốc thử phenolphtalein. - Dung dịch H2SO4 0,1N. - Dung dịch Na(OH) 0,1N.
- Các dụng cụ, vật liệu thơng thường trong phịng thí nghiệm như pipet, buret, bình nón…
Dụng cụ cất amoniac bao gồm:
- Bình cầu đựng nước và đun sơi làm nguồn sinh hơi nước. - Bình cầu đựng thực phẩm định lượng.
- Ống sinh hàn. - Bình chuẩn độ Tiến hành thử :
GVHD: ThS. Hoàng Đức An Khóa luận tốt nghiệp
cho thật kỹ để loại amoniac nếu có. Cho nước cất vào bình cầu lớn đến 2 phần 3 thể tích, 5 giọt chỉ thị màu và H2SO4 0,1N từng giọt một, cho đến khi có phản ứng acid. Nếu nước cất có amoniac hoặc muối amoni, sẽ kết hợp với H2SO4 thành amonisunfat bền vững… Nước trong bình cầu là nguồn nước để sinh hơi nước, nên khi đun sôi NH3 cũng không bị tách khỏi (NH4)2SO4 và hơi nước sẽ không chứa amoniac, sau đó cho nước cất vào bình cầu nhỏ đến hơn một nửa, lắp nguồn nước lạnh vào ống sinh hàn, đun sơi cả 2 bình và cất kéo hơi nước cho đến khi hơi nước chảy ra trung tính. Kết thúc giai đoạn rửa máy cất đạm.
Cân hoặc hút chính xác một lượng P(g) thực phẩm cho vào bình cầu lớn với nước trung tính đã cất kéo hơi nước để rửa máy ở trên, một vài giọt chỉ thị màu phenolphtalein. Cho dung dịch Ba(OH)2 bão hồ vào tới khi có phản ứng kiềm rõ rệt (màu hồng tím). Đun sơi, hơi nước bốc lên ở bình cầu lớn qua bình đựng thực phẩm ở bình nhỏ kéo NH3 theo khi qua ống sinh hàn sẽ đọng lại, rơi xuống bình chuẩn độ đã đựng sẵn nước trung tính, chỉ thị màu và N(ml) H2SO4 0,1N.
Cất cho đến khi hơi nước bay ra khơng cịn NH3 nữa (thử với giấy quỳ không cho phản ứng kiềm). Hơi NH3 bay ra kết hợp với H2SO4 thành (NH4)2SO4. H2SO4 thừa sẽ được chuẩn độ bằng Na(OH) 0,1N.
Chú ý: Lượng H2SO4 trong bình chuẩn độ bao giờ cũng phải nhiều hơn NH3, nếu thấy màu trong bình chuẩn chuyển thành màu tím là thiếu H2SO4, phải cho thêm H2SO4 0,1N và nhớ lượng cho thêm để sau này tính kết quả.
Tính kết quả:
Hàm lượng NH3 trong 100g thực phẩm:
hoặc trong 1000ml thực phẩm: Trong đó:
N: số ml H2SO4 0,1N cho vào bình chuẩn độ.
1,7 (N – n) .100 P.100 1,7 (N – n) .100
GVHD: ThS. Hoàng Đức An Khóa luận tốt nghiệp
n: số ml NaOH 0,1N dùng để chuẩn độ H2SO4 thừa. P: số g thực phẩm dùng để định lượng.
V: số ml thực phẩm hút để định lượng.