Bước 1: Thu nhận mẫu và ghi nhận các thơng tin liên quan đến mẫu mơ. Các thơng tin này gồm:
- Thời gian lấy mẫu (ngày giờ).
- Thời gian tiến hành thao tác tại phịng thí nghiệm. - Thời gian kết thúc thí nghiệm.
Bước 2: Tiến hành chiếu UV khử trùng tủ cấy, dụng cụ và hố chất.
Bước 3: Tiến hành xử lý mẫu.
Bước 4: Thu nhận mơ mục tiêu, cắt nhỏ và tiến hành xử lý tiếp theo các phương pháp nuơi khác nhau.
Bước 5: Tiến hành nuơi tế bào trong tủ ấm CO2 ở 36,5oC, 5%CO2, 95% khơng khí lọc vơ trùng.
Bước 6: Quan sát mẫu theo các mức thời gian: 0 giờ, 24 giờ, 48 giờ,… Ghi nhận các sự kiện diễn ra trong tiến trình thí nghiệm như : liều lượng mơi
trường sử dụng cĩ thích hợp hay khơng; kỳ hạn thay mơi trường; điều kiện vơ trùng; khả năng và tốc độ tế bào mọc ở mỗi phương pháp, khả năng và tốc độ tế bào mọc trên ba loại mơi trường, ghi nhận kết quả bằng hình ảnh. Quan sát tế bào mục tiêu, ghi nhận bằng hình ảnh trong mỗi lần quan sát.
Bước 7: Cấy chuyền tế bào nuơi sơ cấp ở chai nuơi đạt mật độ cao (tế bào mọc bám trên 80% diện tích bề mặt) lên ba loại mơi trường AMNIOMAX, DMEM, EMEM. Quan sát mẫu cấy chuyền theo các mức thời gian: 24 giờ, 48 giờ,… và cứ cách 24 giờ quan sát một lần. Đếm mật độ tế bào bám đáy trên quan trường 10X, ghi nhận hình ảnh tế bào mục tiêu trong mỗi lần quan sát được trên cả ba mơi trường.
Bước 8: Nhận xét, đánh giá kếtb quả thu được.