Sau khi lựa chọn được thời gian trích ly là 24h/lần chiết, chúng tôi tiếp tục tiến hành nghiên cứu để xác định được số lần trích ly thích hợp
Kết quả đánh giá hàm lượng alkaloid TS và DNJ được trong quá trình chiết được chỉ ra trong bảng 4.8
Bảng 4.8. Ảnh hưởng số lần trích ly đến hàm lượng alkaloid TS và DNJ thu được trong lá dâu
Công thức CT1 CT2 CT3 CT4
Hiệu suất thu hồi
alkaloid(%) 62,26 80,47 80,76 81,06 Hàm lượng DNJ(%) 0,014 b 0,017a 0,018a 0,018a CV(%) 3,707 3,707 3,707 3,707
Từ bảng 4.8 cho chúng tôi thấy nếu chỉ chiết suất 1 lần thì chưa thể chiết được tối đa lượng alkaloid có trong lá dâu, dù cho kéo dài thêm thời gian chiết xuất gấp đôi thì hầu như cũng không làm tăng đáng kể lượng alkaloid toàn phần thu được, nguyên nhân là do khả năng hoà tan của chất chiết trong dung môi chỉ có giới hạn nên việc kéo dài thời gian chiết hơn nữa cũng không làm tăng hiệu suất chiết.
Do vậy để thu được hàm lượng akaloid TS tối đa có trong lá dâu thì cần thiết phải lặp lại quá trình chiết một số lần nữa. Kết quả cho thấy khi chiết xuất thêm lần 2 thì hàm lượng tăng cao, điều này khẳng định việc chiết xuất lần 2 là rất cần thiết. Khi lặp lại quá trình chiết suất đến lần thứ 3, 4 thì hàm lượng alkaloid TS thu được trong sản phẩm cũng chỉ tăng lên rất ít, trong khi đó chiết 3, 4 lần sẽ làm tăng thêm thời gian chiết lên và mất thêm một lượng dung môi nữa, thêm vào đó năng lượng để cô thu dịch đặc cũng sẽ hao tốn đáng kể. Từ kết quả này có thể thấy rằng với ý nghĩa kinh tế thì việc dừng quá trình chiết xuất sau lần chiết thứ 2 là hợp lý nhất, hiệu suất chiết cũng đã đạt đến mức gần như tối đa mà lại không gây nên lãng phí về dung môi và năng lượng.
Như vậy, chúng tôi chọn số lần chiết thích hợp là 2 lần, mỗi lần trong 24 giờ với lượng dung môi lần đầu là theo tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu là 10:1, lần sau do khối nguyên liệu đã ngấm dung môi nên chỉ dùng lượng dung môi bằng 60% lần 1.
Từ các kết quả khảo sát trên chúng tôi đã chọn các điều kiện chiết xuất alkaloid từ lá dâu như sau:
- Phương pháp trích ly: Ngấm kiệt
- Dung môi: Cồn 30%V có 1% axit axetic - Nhiệt độ chiết: Nhiệt độ phòng
- Số lần chiết: Hai lần, mỗi lần trong 24 giờ
- Tỷ lệ dung môi/ nguyên liệu = 10:1 ở lần chiết 1, lần 2 bằng 60% lần 1