vitro
Hiện nay, trên thế giới các mô hình gây thiếu oxy và glucose (OGD) có thời gian tiến hành khác nhau tùy thuộc vào mục đích nghiên cứu. Một nghiên cứu sử dụng lát cắt hồi hải mã để đánh giá tổn thương não, bảo vệ và sửa chữa thần kinh đã so sánh tương quan giữa thời gian tiến hành OGD với phần trăm hấp thụ PI của tế bào [33]. Thời gian tiến hành gây thiếu oxy và glucose là từ 0 – 125 phút, kết quả cho thấy: tại thời điểm 60 phút, mức độ hấp thụ PI gần như đạt cực đại và sau 75 phút thì mức độ hấp thụ PI gần như không tăng lên nữa. Tuy nhiên để xác định khoảng thời gian tối ưu, phù hợp với các thiết bị và điều kiện thực hành tại phòng thí nghiệm, chúng tôi đã tiến hành gây mô hình thiếu oxy và glucose đối với tế bào hồi hải mã nuôi cấy trong các khoảng thời gian là 30 phút, 60 phút và 90 phút để đánh giá và lựa chọn thời gian phù hợp cho các thí nghiệm tiếp theo trong nghiên cứu.
26
Hình 3.1. Đánh giá thời gian gây mô hình OGD tối ưu. (A) Sơ đồ thử nghiệm. (B) Hình ảnh đặc trưng lát cắt hồi hải mã. (C) Mức độ hấp thụ PI. *p < 0,05 so với OHSCs sinh lý, ***p < 0,001 so với OHSCs sinh lý
Kết quả hình trên chỉ ra rằng:
Thời gian OGD trong vòng 30, 60, 90 phút đều làm tăng có ý nghĩa thống kê % hấp thụ PI của OHSCs bệnh lý so với OHSCs sinh lý. Mức độ tổn thương tế bào thần kinh trên OHSCs phụ thuộc vào thời gian tiến hành OGD.
Tại thời điểm 30 phút, số lượng tế bào chết còn ít, nên sẽ không thể hiện rõ được tác dụng của thuốc nếu áp dụng trong các thí nghiệm nghiên cứu tiếp theo. Tại thời điểm 90 phút, số lượng các tế bào thần kinh chết quá lớn (≈ 100 %) nên nếu dùng thuốc cũng không thể hồi phục được.
Do đó, 60 phút là thời gian tối ưu để tiến hành các nghiên cứu tiếp theo.