CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.5.4. Nghiên cứu ảnh hưởng của pH lên sự sinh trưởng và phát triển của Bacillus subtilis
subtilis
Phương pháp: Nghiên cứu về ảnh hưởng của pH được thực hiện theo các phương pháp xác định số lượng tế bào bằng kỹ thuật đổ đĩa [theo mục 2.5.1] và phương pháp đo mật độ quang [theo mục 2.5.2].
Cách tiến hành:
Chuyển 10% giống ở bình nuôi trước 24h cho vào bình tam giác 250ml có chứa sẵn 100ml môi trường lỏng TCS. Sau đó, đem chỉnh pH với các pH khác nhau 5.5, 6.0, 6.5, 7.0, 7.1, 7.5, 8.0, 8.5 và nuôi trên máy lắc với tốc độ lắc của máy là 120v/ph. Sau 24h đem đo độ hấp thu quang và xác định số lượng tế bào.
Chuyển 10% giống ở bình nuôi trước 24h cho vào bình tam giác 250ml có chứa sẵn 100ml môi trường lỏng TCS. Sau đó, đem chỉnh pH với các pH khác nhau 5.5, 6.0, 6.5, 7.0, 7.1, 7.5, 8.0, 8.5 và nuôi trên máy lắc với tốc độ lắc của máy là 120v/ph. Sau 24h đem đo độ hấp thu quang và xác định số lượng tế bào.
Phương pháp: Phương pháp đo mật độ quang [ theo mục 2.5.2] và xác định tế bào khuẩn lạc bằng kỹ thuật đổ đĩa [theo mục 2.5.1] là hai phương pháp được sử dụng trong nghiên cứu này.
Cách tiến hành:
Chuẩn bị bình giống ở nhiệt độ tối ưu là 300C và pH tối ưu pH = 6,0. Cấy 10% giống đã nuôi ở 24h cho vào bình tam giác 250ml có chứa sẵn 100ml môi trường lỏng TCS với các nguồn cacbon khảo sát là: rỉ đường, tinh bột, glucose, succarose, bột mì. Trước khi cấy chủng cần chỉnh các môi trường về pH = 6 và đem thanh trùng ở chế độ 1210C, trong 15 phút. Sau đó, nuôi trên máy lắc với chế độ nuôi là 120v/phút, nhiệt độ 300C, thời gian 24h. Sau 24h đem đo mật độ quang và xác định số lượng tế bào ở nguồn cacbon có độ hấp thu cao nhất bằng phương pháp đổ đĩa thạch.
2.5.6. Nghiên cứu ảnh hưởng của nguồn nitơ lên sự sinh trưởng và phát triển của
Bacillus subtilis
Phương pháp: Nghiên cứu này được thực hiện theo các phương pháp của mục 2.5.1 và 2.5.2.