3 Số hộ ựiều tra hiểu biết về thuốc bảo vệ thực vật
3.4. Nghiên cứu mối quan hệ giữa vi khuẩn gây bệnh Greening và rầy chổng cánh Diaphorina citri Kuwayama
Kuwayama
3.4. Nghiên cứu mối quan hệ giữa vi khuẩn gây bệnh Greening và rầy chổng cánh Diaphorina citri Kuwayama chổng cánh Diaphorina citri Kuwayama
3.4.1. đánh giá khả năng nhiễm vi khuẩn gây bệnh Greening của rầy non và rầy trưởng thành và rầy trưởng thành
Thắ nghiệm ựánh giá khả năng nhiễm và dung nạp vi khuẩn gây bệnh Greening của rầy non và rầy trưởng thành ựược tiến hành tại nhà lưới Viện
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 67
Bảo vệ thực vật năm 2011. Rầy ựược nuôi trên cây cam Trưng Vương bị nhiễm bệnh Greening, sau 15 ngày thu rầy và xác ựịnh vi khuẩn gây bệnh Greening có trong cơ thể rầy bằng phương pháp PCR. Kết quả ựược bảng 3.8.
Bảng 3.8. Khả năng nhiễm vi khuẩn gây bệnh Greening của rầy non và trưởng thành (Viện BVTV, 2011) Công thức Rầy thắ nghiệm Thời gian nuôi rầy trên cây bệnh(ngày) Số rầy thắ nghiệm(con) Số rầy mang vi khuẩn (con) Tỷ lệ (%) 1 Trưởng thành 15 45 13 28,8 2 Rầy non 15 45 39 86,7
Kết quả thắ nghiệm cho thấy, khi ựược nuôi trên cây bị bệnh khả năng nhiễm và dung nạp vi khuẩn của rầy non cao hơn so với rầy trưởng thành. Ở công thức nuôi rầy non trên cây bị bệnh sau 15 ngày, trong tổng số 45 rầy thắ nghiệm có tới 39 rầy mang vi khuẩn gây bệnh Greening trong cơ thể, ựạt 86,7%. Trong khi ựó ở cơng thức ni rầy trưởng thành trên cây bị bệnh sau 15 ngày chỉ có 13 rầy mang vi khuẩn gây bệnh Greening trong tổng số 45 rầy thắ nghiệm, chiếm tỷ lệ 28,8%. Khả năng nhiễm và dung nạp vi khuẩn gây bệnh Greening của rầy non cao hơn rầy trưởng thành, một mặt vì rầy non hầu như khơng di chuyển nên thời gian chắch hút dài, hơn nữa nhu cầu thức ăn ựể hoàn thành các pha phát dục lớn nên rầy non chắch hút nhiều, kéo theo hàm lượng vi khuẩn vào trong cơ thể lớn. Mặt khác có thể cơ thể của rầy non phù
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 68
hợp hơn cho vi khuẩn tồn tại và sinh sản tăng số lượng hơn so với rầy trưởng thành nên tỷ lệ rầy non mang vi khuẩn cao hơn.
Kết quả của thắ nghiệm này cũng ựã nói lên vai trị và sự nguy hiểm của rầy non trong quá trình truyền bệnh, vì vậy ngồi việc dùng thuốc hố học ựể diệt rầy trưởng thành hạn chế sự ựẻ trứng thì việc dùng thuốc nội hấp ựể diệt trứng rầy ngăn chặn rầy non phát triển là hết sức cần thiết.
3.4.2. Ảnh hưởng của thời gian chắch hút trên cây bệnh ựến khả năng
nhiễm vi khuẩn gây bệnh Greening của rầy trưởng thành
Khả năng nhiễm vi khuẩn gây bệnh Greening của rầy trưởng thành không những phụ thuộc vào lượng vi khuẩn Liberobacter có trong cây bị
bệnh mà còn phụ thuộc vào thời gian chắch hút của rầy trên cây bị bệnh. Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian chắch hút trên cây bệnh ựến khả năng nhiễm vi khuẩn gây bệnh Greening của rầy trưởng thành(bảng 3.9).
Bảng 3.9. Ảnh hưởng của thời gian chắch hút trên cây bệnh ựến khả năng nhiễm vi khuẩn gây bệnh Greening của rầy trưởng thành
(Viện BVTV, 2011) Công
thức
Thời gian nuôi rầy trên cây
bệnh(ngày) Số rầy thắ nghiệm (con) Số rầy mang vi khuẩn (con) Tỷ lệ (%) 1 7 37 - - 2 14 37 10 27,5 3 21 37 13 35,1 4 28 37 20 54,3
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 69
Tỷ lệ nhiễm vi khuẩn gây bệnh Greening của rầy trưởng thành tỷ lệ thuận với thời gian rầy chắch hút trên cây bị bệnh. Sau 7 ngày chắch hút trên cây bệnh không cá thể rầy nào ựược phát hiện mang vi khuẩn gây bệnh Greening trong cơ thể bằng phương pháp PCR. Sau 14 ngày sống trên cây bệnh tỷ lệ rầy mang vi khuẩn gây bệnh ựạt 27,5%. Sau 21 ngày tỷ lệ rầy mang vi khuẩn gây bệnh Greening ựạt 35,1% và tỷ lệ này tăng lên 54,3% sau 28 ngày (bảng 3.9). Khả năng nhiễm vi khuẩn gây bệnh của rầy tỷ lệ thuận với số ngày rầy chắch hút trên cây bệnh, một mặt là do lượng vi khuẩn ựược ựưa vào trong cơ thể rầy hàng ngày qua con ựường chắch hút. Mặt khác vi khuẩn gây bệnh Greening cũng cần có thời gian ựể nhân lên trong cơ thể rầy. điều này có thể giải thắch cho sự chênh lệch rất lớn giữa tỷ lệ cá thể rầy mang vi khuẩn gây bệnh Greening sau 7 ngày và 14 ngày. So sánh với nghiên cứu của Inoue et al. (2009)[45] thì tỷ lệ rầy nhiễm vi khuẩn gây bệnh ở thắ nghiệm này thấp hơn. Sự sai khác này có thể do nguồn rầy ở hai vùng ựịa lý khác nhau, hoặc do nguồn cây dùng trong thắ nghiệm khác nhau, hoặc cũng có thể do nguồn bệnh, hoặc cả hai.
Một cá thể rầy có thể tồn tại trên ựồng ruộng 3 tháng từ tuổi 1 ựến khi chết, ựiều này cho thấy nếu tiếp xúc với cây bị bệnh trong bất kỳ giai ựoạn nào rầy cũng ựều có khả năng nhân vi khuẩn gây bệnh trong cơ thể và truyền bệnh cho cây. Vì vậy một trong những biện pháp ựể hạn chế tỷ lệ rầy nhiễm bệnh trên ựồng ruộng là phải huỷ bỏ những cây bị bệnh.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nơng nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 70
Hình 3.14. Thắ nghiệm ảnh hưởng của thời gian chắch hút trên cây bệnh ựến
khả năng nhiễm bệnh của rầy
Diaphorina citri Kuwayama
Hình 3.15. Mẫu rầy Diaphorina
citri Kuwayama chuẩn bị
kiểm tra bệnh
Hình 3.16. Kiểm tra mẫu rầy mang vi khuẩn gây bệnh Greening tại
phịng thắ nghiệm
Hình 3.17. Kết quả giám ựịnh bệnh Greening trên rầy
Diaphorina citri Kuwayama 3.4.3. Khả năng tồn tại của vi khuẩn gây bệnh Greening trong cơ thể rầy Diaphorina citri Kuwayama
Rầy chổng cánh Diaphorina citri Kuwayama sau khi chắch hút trên cây bệnh sẽ trở thành môi giới truyền bệnh, song hiệu quả truyền bệnh của rầy lại phụ thuộc vào lượng vi khuẩn gây bệnh Greening có trong cơ thể rầy. để xác
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 71
ựịnh khả năng tồn tại của vi khuẩn gây bệnh Greening trong cơ thể rầy, sau khi cho rầy chắch hút trên cây bị bệnh 15 ngày, rầy ựược tách ra nuôi cách ly trên cây sạch bệnh. Kiểm tra số lượng cá thể rầy mang vi khuẩn gây bệnh Greening sau 0, 5, 10, 15, 20 và 25 ngày bằng phương pháp PCR, kết quả (bảng 3.10).
Bảng 3.10. Khả năng tồn tại của vi khuẩn gây bệnh Greening trong cơ thể rầy Diaphorina citri Kuwayama (Viện BVTV, 2011)
Công thức
Thời gian rầy mang nguồn bệnh ựược cách ly với nguồn bệnh (ngày) Số rầy thắ nghiệm Số rầy mang vi khuẩn gây bệnh (con) Tỷ lệ (%) 1 0 45 39 86,7 2 5 45 39 86,7 3 10 45 37 82,2 4 15 45 34 75,6 5 20 45 29 64,5 6 25 45 22 48,9
Nguồn vi khuẩn gây bệnh Greening tồn tại trong trong cơ thể rầy sẽ bị giảm dần theo thời gian nếu rầy ựược nuôi cách ly trên cây sạch bệnh. Nếu không ựược tiếp tục chắch hút bổ sung lượng vi khuẩn gây bệnh Greening, sau 10 ngày tỷ lệ rầy mang vi khuẩn gây bệnh ựã bắt ựầu giảm, tuy nhiên mức ựộ giảm không nhiều từ 86,7% xuống 82,2%. Tỷ lệ cá thể rầy mang vi khuẩn tiếp tục giảm dần theo thời gian và sau 25 ngày số lượng cá thể rầy mang vi khuẩn gây bệnh Greening ựã giảm gần 40% so với ban ựầu (bảng 3.10). Kết quả này cũng phù hợp với nghiên cứu của Rogers et al.,(2010)[65]. Theo Purcell.
(1982)[63] khi rầy ựã mang nguồn vi khuẩn gây bệnh trong cơ thể, nguồn vi khuẩn ựó khơng ựược nhân lên mà lại giảm ựi theo thời gian, một phần do cơ
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 72
thể rầy bị già hố khơng phù hợp cho vi khuẩn sinh trưởng và phát triển, mặt khác cũng có thể hàng ngày rầy chắch hút trên cây ựã truyền vi khuẩn cho cây, hàm lượng vi khuẩn truyền cho cây lớn hơn lượng vi khuẩn ựược nhân lên trong cơ thể rầy nên số rầy mang hàm lượng vi khuẩn lớn bị giảm, ựiều này ựồng nghĩa với nguồn bệnh không tồn tại trong cơ thể rầy.
Kết quả thắ nghiệm này ựã cho thấy cây nguồn bệnh ựóng vai trị rất quan trọng trong q trình lan truyền bệnh. Nếu trên ựồng ruộng khơng có cây bị bệnh thì hàm lượng vi khuẩn trong cơ thể rầy sẽ dần bị suy giảm, số cá thể rầy mang vi khuẩn gây bệnh trong quần thể cũng sẽ giảm, khi ựó quần thể rầy mang nguồn bệnh trên ựồng ruộng sẽ giảm hay sẽ mất khả năng truyền bệnh. Vì vậy một trong những biện pháp hạn chế tỷ lệ rầy mang nguồn bệnh trên ựồng ruộng cần phải phải chặt bỏ những cây bị bệnh ựể hạn chế sự lây lan.
48,964,5 64,5 75,6 86,7 86,7 82,2 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
0 ngày 5 ngày 10 ngày 15 ngày 20 ngày 25 ngày
Thời gian rầy nhiễm bệnh ựược chuyển sang cây sạch bệnh
T ỷ lệ % r ầy m an g ng uồ n bệ nh
Hình 3.18. Khả năng tồn tại của vi khuẩn gây bệnh Greening trong cơ thể rầy Diaphorina citri Kuwayama
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦ 73