5. Tính mới của đề tài
3.3. Thiết lập quy trình xây dựng, cấy chuyền lưu giữ, bảo quản và sử dụng quỹ gen
môi trường ½MS + 15g/l sucrose + 12g/l agar, cho thời gian lưu giữ từ 3,5 - 4 tháng, chiều cao trung bình chồi tương ứng từ 4,3 - 4,9 cm.
3.3. Thiết lập quy trình xây dựng, cấy chuyền lưu giữ, bảo quản và sử dụng quỹ gen invitro giống hoa cúc giống hoa cúc
Dựa vào kết quả thu được, tiến hành thiết lập quy trình xây dựng, cấy chuyền lưu giữ và sử dụng quỹ gen invitro mẫu giống nghiên cứu. Kết quả được trình bày trong hình bên dưới.
37
VÀO MẪU BAN ĐẦU / TẠO CALLUS
TÁI SINH CHỒI
NHÂN NHANH TẠO CÂY HOÀN CHỈNH QUỸ GEN VƯỜN ƯƠM Mô tả
- Phương pháp: Nụ non của hoa cúc cắt thành từng
đoạn có cuống dài 1cm. Rửa sạch nụ bằng xà phòng rồi tráng dưới vòi nước chảy nhiều lần. Tráng mẫu bằng cồn 700
trong 30 giây rồi tráng lại bằng nước cất vô trùng. Tiếp đó cho mẫu vào bình đựng HgCl2 0,1% lắc trong 10 phút. Sau đó gạn bỏ các hóa chất khử trùng và tráng lại mẫu bằng nước cất vô trùng nhiều lần. (Hoặc sử dụng lá, thân, rễ cây cúc invitro trên quỹ gen)
- Môi trường: MS+30g/l sucrose+6,5g/l agar+ 2mg/l
BAP
Mô tả
- Phương pháp: Các callus hình thành trên môi
trường vào mẫu ban đầu được sử dụng để tái sinh chồi. (Hoặc sử dụng lá, thân, rễ cây cúc invitro trên quỹ gen)
- Môi trường: MS + 30g/l sucrose +6,5g/l agar +
2mg/l BAP + 0,2 mg/l NAA
Mô tả
- Phương pháp: Các chồi tái sinh trên callus
(hoặc các chồi trên quỹ gen) được dùng để nhân nhanh tạo số lượng lớn.
- Môi trường: MS + 30g/l sucrose + 6,5g/l agar
+ 1mg/l BAP
Mô tả
- Phương pháp: Các chồi trên môi trường nhân
nhanh (hoặc các chồi trên quỹ gen) được cắt thành từng đoạn có chiều dài 1cm và cấy trên môi trường tạo rễ.
- Môi trường: MS + 30g/l sucrose +6,5g/l agar +
0,5mg/l NAA
Mô tả
- Phương pháp: Các chồi cúc trên môi trường
nhân nhanh (hoặc các chồi trên quỹ gen) được cắt thành từng đoạn có chiều dài 1cm và cấy trên môi trường lưu giữ.
- Môi trường: ½MS + 15g/l sucrose + 12g/l agar
Mô tả
- Phương pháp: Khi các chồi trên môi trường ra
rễ (hoặc các chồi trên quỹ gen) có kích thước từ 1-2 cm, rễ dài 0,5-1 cm cho cây ra vườn ươm.
Ghi chú: Cấy chuyền
Mô tả giai đoạn thực hiện
38
CHƯƠNG 4 : KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ