- Xác định quá trình phát triển của Histomonas meleagridis trong cơ thể gà được bố trí trên 3 lô thí nghiệm. Gà thí nghiệm được chọn là gà 1 – 3 tháng tuổi không nhiễm trứng giun kim Heterakis gallinarum và đơn bào Histomonas meleagridis.
35
+ Để xác định gà thí nghiệm có bị nhiễm trứng giun kim Heterakis gallinarum
và đơn bào Histomonas meleagridis hay không tiến hành xét nghiệm trứng giun kim bằng phương pháp phù nổi Fulleborn; xét nghiệm Histomonas meleagridis bằng kỹ thuật PCR.
- Phương pháp phù nổi Fulleborn:
Nguyên lý: Lợi dụng tỷ trọng của một số dung dịch lớn hơn tỷ trọng của trứnggiun, làm cho trứng nổi lên. Ví dụ dung dịch nước muối bão hoà (NaCl), dung dịch Sodium hyposulfat, dung dịch đường glucose.
+ Chuẩn bị dung dịch NaCl: Cân 380 g NaCl cho vào 1000 ml nước sôi và dùng đũa thuỷ tinh khuấy đều đến khi muối không tan được nữa. Để nguội và lọc qua vải màn để loại bỏ cặn và lớp muối kết tinh.
+ Lấy 5 – 10 g phân gà cần kiểm tra vào một cốc thuỷ tinh nhỏ, dung đũa thuỷ tinh khuấy nát phân trong 50 ml dung dịch NaCl bão hoà. Sau đó lọc qua lưới lọc để loại bỏ bã cặn, dung dịch lọc thu được để yên tĩnh trong cốc.
+ Sau khoảng 15 – 30 phút trứng sẽ nổi lên nếu có. Dùng vòng vớt thép đường kính 5 mm vớt lớp váng ở phía trên, để lên lam kính, đậy lamen và quan sát tìm trứng giun dưới kính hiển vi.
- Bố trí thí nghiệm gây nhiễm Histomonas meleagridis trên gà:
+ Lô 1: Gây nhiễm 40 con gà bằng trứng giun kim Heterakis gallinarum (có chứa Histomonas meleagridis) chưa hình thành ấu trùng với liều là 1000 trứng giun kim/gà qua đường miệng.
+ Lô 2: 40 con gà được gây nhiễm trứng giun kim Heterakis gallinarum (có chứa Histomonas meleagridis) đã hình thành ấu trùng với liều 1000 trứng giun kim/gà bằng đường miệng.
+ Lô 3: 20 con gà đối chứng, không gây nhiễm.
- Xác định gà bị bệnh do Histomonas meleagridis qua theo dõi triệu chứng lâm sàng, bệnh tích. Sau 2 tuần gây nhiễm, lấy mẫu phân hàng ngày để xét nghiệm bằng phương pháp phù nổi Fulleborn và phương pháp PCR.