M: Abumin T: Enzyme thô
3.6.Tính chất lý hóa của fucoidanase
S: Hổn hợp sau khi đi qua cột E1 E7: Các phân đoạn từ
3.6.Tính chất lý hóa của fucoidanase
3.6.1.Tính đặc hiệu cơ chất
Tính đặc hiệu cơ chất của enzyme chủng đột biến
Để kiểm tra tính đặc hiệu cơ chất của enzyme, chúng tôi tiến hành các thí nghiệm cho fucodanase cắt thử với các cơ chất khác nhau. Kết quả được trình bày ở
hình 3.16.
Từ số liệu hình 3.16, chúng tôi nhận thấy hoạt tính fucoidanase có khả năng phân cắt được tất cả cơ chất mà chúng tôi đã sử dụng, nhưng hoạt tính phân cắt là khác nhau ở các cơ chất khác nhau.
Fucoidanase có thể cắt các liên kết glusosit bên trong phân tử polysaccharide làm giảm nhanh chóng trọng lượng phân tử. Khả năng phân cắt mạch polysaccharide cao nhất
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 39
unit/ml và thấp nhất ở tinh bột với hoạt tính 0,012 unit/ml. Kết quả trên cũng phù hợp với những nghiên cứu trước kia của Minh Lý và cộng sự năm 2006 (Bùi Minh Lý, 2006).
Hình 3.16. Tính đặc hiệu cơ chất của fucoidanase
So sánh tính đặc hiệu cơ chất của fucoidanase có nguồn gốc từ chủng tự nhiên và chủng đột biến
Tiến hành thí nghiệm đồng thời cả fucoidanase có nguồn gốc từ chủng tự nhiên T13 và chủng đột biến NV60.36 và so sánh tính chất lý hóa của hai loại enzyme. Kết quả so sánh tính đặc hiệu cơ chất của enzyme có nguồn gốc từ chủng tự nhiên và enzyme có nguồn gốc từđột biến được trình bày ở hình 3.17:
Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 40
Khả năng phân cắt cũng như tính đặc hiệu cơ chất của fucoidanase có nguồn gốc từ chủng T13 và chủng NV60.36 là khác nhau ở các cơ chất khác nhau. Khả năng cắt của enzyme từ hai chủng T13 và NV60.36 cao nhất đối với cơ chất là fucoidan.
Tính đặc hiệu cơ chất của fucoidanase từ chủng NV60.36 và T13 có sự khác biệt, sự khác biệt đó thể hiện ở mức chênh lệch ở hiệu suất phản ứng. Đối với cơ chất là fucoidan thì hoạt tính fucoidanase có nguồn gốc từ chủng NV60.36 là 2,71 unit/ml trong khi đó hoạt tính fucoidanase có nguồn gốc từ chủng tự nhiên là 2,31 unit/ml
Tính đặc hiệu cơ chất còn thể hiện rõ đối với các cơ chất khác ngoài fucoidan như Malto dexrtrin, fucoidanase có nguồn gốc từ chủng tự nhiên phản ứng mạnh với có chất này với hoạt tính là 2,1 unit/ml trong khi khả năng phản ứng của enzyme có nguồn gốc đột biến là 0,29 unit/ml.
Như vậy đối với các cơ chất khác nhau ngoài fucoidan thì hoạt tính fucoidanase của chủng đột biến đều giảm hơn rất nhiều so với chủn tự nhiên chứng tỏ rằng tính đặc hiệu của fucoidanase này cao hơn enzyme có nguồn gốc từ chủng tự nhiên.