Xác định tính chất lý hóa của fucoidanase

Một phần của tài liệu nghiên cứu, sàng lọc và cải tiến chủng vi khuẩn sinh fucoidanase và tối ưu môi trường sản xuất fucoidanase cao sản (Trang 26 - 27)

Xác định tính đặc hiệu cơ chất: Để kiểm tra tính đặc hiệu cơ chất của fucoifanase, thí nghiệm được tiến hành với enzyme có nguồn gốc từ chủng tự nhiên và chủng đột biến. Cho các enzyme này cắt thử với các cơ chất như fucoidan, tinh bột, Malto dexrtrin, xylan, CMC (nồng độ mỗi cơ chất là 0,01%) sau đó xác định hoạt tính của fucoidanase sau phản ứng bằng phương pháp của Miller.

Ảnh hưởng của chất hoạt động bề mặt: Để kiểm tra ảnh hưởng của chất hoạt

động bề mặt đến fucoifanase, thí nghiệm được tiến hành với enzyme có nguồn gốc từ

chủng tự nhiên và chủng đột biến. Cho các enzyme này cắt cơ chất fucoidan, trong môi trường có bổ sung chất hoạt động bề mặt như: SDS, Tween80, EDTA (nồng độ

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 18

mỗi chất là 0,1 mM). Sau đó xác định hoạt tính của enzyme sau phản ứng bằng phương pháp của Miller.

Ảnh hưởng của ion kim loại: Để kiểm tra ảnh hưởng của ion kim loại đến fucoifanase, thí nghiệm được tiến hành với enzyme có nguồn gốc từ chủng tự nhiên và chủng đột biến. Cho các enzyme này cắt cơ chất fucoidan, trong môi trường có bổ

sung ion kim loại như: Ca2+, Fe2+, Na+, Cu2+ ( ở nồng độ 0,1 mM mỗi loại). Sau đó xác

định hoạt tính của enzyme sau phản ứng bằng phương pháp của Miller

Ảnh hưởng của nhiệt độ:Để kiểm tra ảnh hưởng của nhiệt độđến fucoifanase, thí nghiệm được tiến hành với enzyme có nguồn gốc từ chủng tự nhiên và chủng đột biến. Cho các enzyme này cắt cơ chất fucoidan, trong môi trường có nhiệt độ thay đổi từ 300C đến 600C sau đó xác định hoạt tính của fucoidanase sau phản ứng bằng phương pháp của Miller

Ảnh hưởng của pH: Để kiểm tra ảnh hưởng của pH đến fucoifanase, thí nghiệm được tiến hành với enzyme có nguồn gốc từ chủng tự nhiên và chủng đột biến. Cho các enzyme này cắt cơ chất fucoidan trong môi trường có điều kiện pH thay đổi từ

pH5 đến pH8. Sau đó xác định hoạt tính của fucoidanase sau phản ứng bằng phương pháp của Miller.

Một phần của tài liệu nghiên cứu, sàng lọc và cải tiến chủng vi khuẩn sinh fucoidanase và tối ưu môi trường sản xuất fucoidanase cao sản (Trang 26 - 27)