Chuẩn bị mẫu phân tích OA: Cân cao sâm vũ diệp hịa tan trong MeOH. Lọc qua màng lọc 0,2 µm trước khi tiêm vào hệ thống HPLC
Chuẩn bị mẫu phân tích saponin tổng số: Cân khoảng 0,2 g cao dược liệu cho vào bình cổ nhám. Thêm 50ml nước nĩng, ủ tại 90ºC trong 10 phút. Thêm 7,5 ml HCl đậm đặc và đun hồi lưu cách thủy trong 2 giờ. Tiếp theo, chiết 4 lần x 100 ml
29
dicloromethan. Pha dicloromethan cơ quay tới gần cạn. Hịa tan phần cặn bằng 2ml MeOH, lọc qua màng lọc 0,2 micro trước khi tiêm.
- Điều kiện sắc ký: như mục 3.1.2 - Tính kết quả:
+ Ghi lại diện tích pic thu được trên sắc ký đồ của mẫu thử khơng thủy phân, tính nồng độ OA cĩ trong mẫu thử dựa trên đường tuyến tính đã lập. Từ đĩ tính hàm lượng OA trong cao SVD.
+ Tương tự tính hàm lượng OA trong mẫu thử sau thủy phân. + Từ đĩ tính hàm lượng saponin tổng số trong cao sâm vũ diệp.
Msaponin tổng số = MOA STP – M OA KTP
Kết quả tính tốn hàm lượng saponin tổng số trong cao sâm vũ diệp trong bảng sau:
Bảng 3.6. Kết quả hàm lượng saponin tổng số trong dược liệu và cao sâm vũ diệp
STT Khối lượng cao (g) Khối lượng cắn STP (g) Nồng độ cao STP (µg/ml) MOA STP trong cao SVD (%) 1 0,2171 0,036 18000 0,380 2 0,2223 0,038 19000 0,407 3 0,2055 0,035 17500 0,409 Trung bình 0,398
Msaponin tổng số trong cao SVD (%) 0,364
Msaponin tổng số dược liệu SVD (%) 0,0698
Kết quả trình bày ở bảng 3.6 cho thấy hàm lượng saponin tổng số dược liệu và cao sâm vũ diệp lần lượt là 0,0698% và 0,364%.
30