Phương pháp xác định chỉ số EID50 (liều gây nhiễm 50% phôi) của chủng virus dịch tả vịt.

- Chuẩn bị trứng: Như phần 2.3.3.1.

- Tiến hành: Thí nghiệm được tiến hành 3 lần, mỗi lần pha giống virus với nước sinh lý thành 12 độ pha loãng từ 10-1 đến 10-12. Mỗi độ pha loãng tiêm cho 5 phôi, mỗi phôi tiêm 0,2 ml.

Sau khi tiêm, theo dõi phôi ở các thời điểm từ 1 - 6 ngày. Xác định tổng số phôi chết và tổng số phôi sống ở từng độ pha loãng. Tính tỷ lệ phôi chết theo công thức:

Tỷ lệ phôi chết (%) = Tổng số phôi chết x 100

Tổng số phôi chết + Tổng số phôi sống

Áp dụng công thức tính ELD50 của Reed Muench Lg ELD50 = lgA + X lgf

X = 50 - A’ A’ - B’ Trong đó:

X: Khoảng cách cân đối

A: Độ pha loãng virus gây chết cận trên 50% A’: Tỷ lệ % phôi chết cận trên 50%

B’: Tỷ lệ phôi chết cận dưới 50% f: Bậc pha loãng của virus

2.3.3. Phương pháp xác định chỉ số EID50 (liều gây nhiễm 50% phôi) của chủng virus dịch tả vịt. chủng virus dịch tả vịt.

- Chuẩn bị trứng: Như phần 2.3.3.1.

- Tiến hành: Thí nghiệm được tiến hành 3 lần, mỗi lần pha giống virus vacxin với nước sinh lý thành 12 độ pha loãng từ 10-1 đến 10-12. Mỗi độ pha loãng tiêm cho 5 phôi, mỗi phôi tiêm 0,2 ml. Sau khi tiêm, theo dõi phôi ở các

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 25

thời điểm từ 1 - 6 ngày. Kiểm tra và cho những thai chết vào tủ lạnh 40C trong 24 giờ. Sau 6 ngày cho toàn bộ trứng vào tủ lạnh 40C trong 24 giờ rồi mổ khám bệnh tích. Xác định tổng số phôi có bệnh tích (phôi nhiễm) và tổng số phôi không có bệnh tích (phôi không nhiễm) ở từng nồng độ.

Tính tỷ lệ phôi nhiễm theo công thức:

Tỷ lệ phôi nhiễm (%) = Tổng số phôi nhiễm + Tổng số phôi không nhiễm ×100 Tổng số phôi nhiễm Tính EID50 theo công thức của Reed Muench.