4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.3.Xác ựịnh LMoV trên hoa bằng RT-PCR dùng mồi ựặc hiệu
Do virus Lily mottle virus (LMoV) là một virus phổ biến nhất trên cây hoa trồng bằng củ họ Lyliaceae và Amarilidaceae nên chúng tôi ựã thiết kế một cặp mồi ựặc hiệu virus này là LMoV-CP3-F & LMoV-CP3-R. Cặp mồi ựược thiết kế trên vùng gen mã hóa vỏ protein CP của virus (Hình 4.5). Trình tự của cặp mồi ựược trình bày trong phần vật liệu và phương pháp.
Hình 4.5. Vị trắ cặp mồi ựặc hiệu LMoV trên bộ gen potyvirus
Dùng cặp mồi này, chúng tôi ựã kiểm tra sự có mặt của LMoV trên 6 mẫu loa kèn trắng và 6 mẫu loa kèn ựỏ bị bệnh khảm lá. Kết quả phản ứng RT-PCR (Bảng 4.5 và hình 4.6) cho thấy chỉ các mẫu loa kèn trắng tạo sản phẩm có kắch thước mong muốn ~ 1 kb với số mẫu dương tắnh là 5/6 mẫụ Như vậy, kết quả này ựã chứng tỏ rằng hoa loa kèn trắng bị bệnh khảm lá ựã nhiễm LMoV còn các mẫu loa kèn ựỏ nhiễm một loại potyvirus khác. Kết quả này cũng phù hợp với một nghiên cứu do Hà Thị Trang (2010) thực hiện trong cùng thời gian với chúng tôị Tác giả cũng sử dụng cặp mồi LMoV-CP3-F & LMoV-CP3-R ựể phát hiện bằng RT-PCR và giải trình tự vùng gien CP của 1 mẫu LMoV trên cây loa kèn trắng bị bệnh khảm lá.
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 43
Bảng 4.5. Kết quả kiểm tra RT-PCR với mồi ựặc hiệu LMoV trên các mẫu hoa loa kèn ựỏ và hoa loa kèn trắng
TT Cây Nguồn gốc LMoV-CP3-F/
LMoV-CP3-R
1 Loa kèn trắng đại học Nông Nghiệp +
2 Loa kèn trắng Tây Tựu -
3 Loa kèn trắng Tây Tựu +
4 Loa kèn trắng Tây Tựu +
5 Loa kèn trắng đại học Nông Nghiệp +
6 Loa kèn trắng đại học Nông Nghiệp +
7 Loa kèn ựỏ đại học Nông Nghiệp -
8 Loa kèn ựỏ đại học Nông Nghiệp -
9 Loa kèn ựỏ đại học Nông Nghiệp -
10 Loa kèn ựỏ đại học Nông Nghiệp -
11 Loa kèn ựỏ đại học Nông Nghiệp -
12 Loa kèn ựỏ đại học Nông Nghiệp -
Hình 4.6. Phát hiện LMoV bằng RT-PCR trên các mẫu loa kèn trắng và loa kèn ựỏ bị bệnh khảm lá. M là thang DNA 1 kb (Fermentas) với mũi tên chỉ
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 44